Metabolomica non mirata per l'aldosteronismo primario (PUMPAP)

Reclutamento dei partecipanti

• I partecipanti idonei saranno identificati dai membri dei loro team di assistenza, per i quali lo screening, i test di conferma e la lateralizzazione saranno/saranno stati completati presso LUHFT.
• I potenziali partecipanti verranno avvicinati da un membro del team di studio in cerca di consenso. Il test dell'infusione salina e il campionamento della vena surrenale sono punti chiave nell'iter diagnostico per il reclutamento dei partecipanti rispettivamente per le coorti non PA e PA.
• Ai partecipanti consenzienti verrà raccolto e conservato il plasma con eparina di litio fino al raggiungimento della dimensione del campione richiesta (n = 40; 20 con PA e 20 con PA esclusa dal rapporto aldosterone: renina allo screening o al test di conferma dell'infusione salina). Verrà utilizzata una provetta con eparina di litio per i profili renali di routine richiesti come parte dei test di infusione salina o del campionamento della vena surrenale per evitare la necessità di eventuali provette di sangue aggiuntive. Il campione verrà centrifugato e separato in due aliquote. Un'aliquota per l'analisi metabolomica presso l'Università di Liverpool e una per la conservazione presso LUHFT fino alla fine dello studio (2 anni) nel caso in cui sia richiesta la convalida dei dati. Le informazioni cliniche, biochimiche, radiologiche e istologiche derivanti dalle cure di routine aiuteranno a classificare i partecipanti in gruppi PA (n = 20) e non PA (n = 20), nonché ad assegnare lo stato di lateralizzazione. Idealmente ci sarà una rappresentanza equa di malattia unilaterale sinistra, unilaterale destra e bilaterale nel sottoinsieme PA.
• Il reclutamento si chiuderà dopo 18 mesi.

Analisi di laboratorio

• Verranno eseguite analisi metabolomiche non mirate utilizzando metodi cromatografia-spettrometria di massa sul plasma con eparina di litio di tutti i partecipanti consenzienti. Un'aliquota di questo campione verrà trasferita all'Università di Liverpool per l'analisi e utilizzata per la distruzione (senza trasferimento all'indietro).

Analisi dei dati

• L'analisi computazionale del set di dati verrà utilizzata per individuare nuovi biomarcatori PA che potrebbero essere ulteriormente studiati in studi successivi.
• Verranno applicati metodi univariati e multivariati. Questi includeranno calcoli statistici univariati e AUROC, tecniche di regressione logistica aggiustata, metodi multivariati non supervisionati (clustering/visualizzazione) e supervisionati (basati su classificatore).
• I calcoli della potenza e l'analisi del set di dati pilota forniranno informazioni sulla futura progettazione sperimentale.

Conservazione dei campioni

• Le aliquote primarie verranno conservate presso LUHFT per un massimo di 18 mesi in attesa dell'analisi. Verranno quindi trasferiti in un unico lotto all'Università di Liverpool e utilizzati per la distruzione.
• Aliquote secondarie di materiale biologico (che sono intese come backup nel caso sia richiesta la validazione dei dati) saranno conservate in condizioni adeguate per preservarne l'integrità fino alla fine dello studio. I campioni verranno smaltiti dopo il completamento dello studio pilota (2 anni) in linea con la pratica di laboratorio di routine.

Archivio dati

• La conservazione dei dati analitici e dei metadati avrà una durata di cinque anni. Verranno archiviati su un computer sicuro sulla rete del Royal Liverpool University Hospital (RLUH).