Ungezielte Metabolomik bei primärem Aldosteronismus (PUMPAP)

Teilnehmerrekrutierung

• Geeignete Teilnehmer werden von Mitgliedern ihres Pflegeteams identifiziert, für die Screening, Bestätigungstests und Lateralisierung am LUHFT durchgeführt werden/wurden.
• Potenzielle Teilnehmer werden von einem Mitglied des Studienteams um Zustimmung gebeten. Kochsalzinfusionstests und Nebennierenvenenproben sind wichtige Punkte bei der diagnostischen Aufarbeitung für die Teilnehmerrekrutierung für Nicht-PA- bzw. PA-Kohorten.
• Bei einwilligenden Teilnehmern wird Lithium-Heparin-Plasma gesammelt und gelagert, bis die erforderliche Probengröße erreicht ist (n=40; ​​20 mit PA und 20 mit PA, ausgeschlossen durch Aldosteron:Renin-Verhältnis beim Screening oder bei Bestätigungstests mit Kochsalzinfusion). Für routinemäßige Nierenprofile, die im Rahmen von Kochsalzinfusionstests oder Nebennierenvenenproben angefordert werden, wird ein Lithium-Heparin-Röhrchen verwendet, um den Bedarf an zusätzlichen Blutröhrchen zu vermeiden. Die Probe wird zentrifugiert und in zwei Aliquots aufgeteilt. Ein Aliquot für die Metabolomanalyse an der University of Liverpool und eines zur Lagerung innerhalb von LUHFT bis zum Ende der Studie (2 Jahre), falls eine Datenvalidierung erforderlich ist. Klinische, biochemische, radiologische und histologische Informationen aus der Routineversorgung werden dabei helfen, die Teilnehmer in PA- (n=20) und Nicht-PA-Gruppen (n=20) einzuteilen und den Lateralisierungsstatus zuzuordnen. Im Idealfall sind einseitige linke, einseitige rechte und beidseitige Erkrankungen in der PA-Untergruppe gleichmäßig vertreten.
• Die Einstellung endet nach 18 Monaten.

Laboranalyse

• Eine ungezielte Metabolomics-Analyse mittels chromatographischer und massenspektrometrischer Methoden wird an Lithium-Heparin-Plasma aller einwilligenden Teilnehmer durchgeführt. Ein Aliquot dieser Probe wird zur Analyse an die Universität Liverpool übertragen und zur Vernichtung verwendet (ohne Rückübertragung).

Datenanalyse

• Die Computeranalyse des Datensatzes wird verwendet, um nach neuen PA-Biomarkern zu suchen, die in späteren Studien weiter untersucht werden könnten.
• Dabei kommen univariate und multivariate Methoden zum Einsatz. Dazu gehören univariate statistische und AUROC-Berechnungen, angepasste logistische Regressionstechniken, unbeaufsichtigte (Clustering/Visualisierung) und überwachte (klassifikatorbasierte) multivariate Methoden
• Leistungsberechnungen und Pilotdatensatzanalysen werden in die künftige experimentelle Gestaltung einfließen.

Probenlagerung

• Primäraliquote werden bis zur Analyse bis zu 18 Monate bei LUHFT gelagert. Anschließend werden sie in einer Charge an die Universität Liverpool überführt und dort der Vernichtung zugeführt.
• Sekundäraliquote biologischen Materials (die als Backup für den Fall gedacht sind, dass eine Datenvalidierung erforderlich ist) werden unter geeigneten Bedingungen gelagert, um die Integrität bis zum Ende der Studie zu wahren. Die Proben werden nach Abschluss der Pilotstudie (2 Jahre) entsprechend der routinemäßigen Laborpraxis entsorgt.

Datenspeicher

• Die Speicherung der Analyse- und Metadaten erfolgt für einen Zeitraum von fünf Jahren. Es wird auf einem sicheren Computer im Netzwerk des Royal Liverpool University Hospital (RLUH) gespeichert.