Gene polimorfico endoteliale NO sintasi nella malattia da dilatazione dell'arteria coronaria

Scopo del lavoro Il nostro obiettivo è determinare le potenziali correlazioni tra il polimorfismo del gene dell'ossido nitrico (c.894G>T) e le arterie coronarie dilatate angiograficamente (aneurisma dell'arteria coronaria o ectasia), nonché per determinare se esiste qualche collegamento con malattie coronariche aterosclerotiche (ACAD).

Metodologia:

Sulla base delle visualizzazioni angiografiche coronariche standard, due esperti operatori indipendenti hanno valutato la presenza di dilatazioni dell'arteria coronaria (CAA, CAE) e CAD aterosclerotica associata negli angiogrammi di tutti i pazienti.

Criteri di inclusione Pazienti che presentano dilatazioni angiograficamente dell'arteria coronaria (aneurisma o ectasia dell'arteria coronaria) (CAA/CAE) con o senza evidenza angiografica di CAD aterosclerotica.

Un altro gruppo di pazienti con coronarie angiograficamente normali o aterosclerotiche senza evidenza di dilatazione.

Criteri di esclusione Da questo studio sono stati esclusi i pazienti con dilatazioni coronariche secondarie dopo angioplastica con palloncino, impianto di stent coronarico, pazienti con intervento di bypass coronarico che avevano dilatazioni coronariche native post CABG.

Definizioni Per CAE si intende una dilatazione diffusa che interessa più di 1/3 della lunghezza del CAE, dove il suo diametro è 1,5 maggiore della successiva porzione coronarica sana [1, 2, 3].

L'ACA è un reperto clinico meno comune descritto come una dilatazione dell'AC che è < 1/3 della lunghezza dell'AC anche con un diametro maggiore di 1,5 rispetto alla lunghezza normale della parte vicina [1, 2, 3, 4].

Metodo di laboratorio e analisi genetica Il test di laboratorio PCR genetico specifico è stato eseguito per tutti i pazienti selezionati per gli SNP eNOS (polimorfismo a singolo nucleotide), vale a dire 894G > T (Glu298Asp; rs 1799983), utilizzando la PCR in tempo reale (QuantStudioTM 3 Real-Time PCR) con una sonda oligonucleotidica fluorogenica allele-specifica e un test di genotipizzazione SNP pre-progettato TaqMan (tecnica TaqMan; Applied Biosystems, Germania). I coloranti fluorogenici utilizzati per ottenere la discriminazione allelica erano FAM (6-carbossi-fluoresceina) e VIC (proprietario di Applied Biosystems tintura). per eseguire la PCR viene utilizzato un volume di reazione totale di 25 L (12,5 L di Master Mix di genotipizzazione TaqMan®) (2x) - 1,25 µL di test di genotipizzazione TaqMan (20x) -5,0 µL di DNA genomico - 6,25 µL di acqua priva di DNasi e RNasi).

Risultato primario: studiare la correlazione tra il polimorfismo del gene c.894G>T e l'arteria coronaria dilatata angiograficamente (CAA/CAE). Risultato secondario: determinare se esiste qualche associazione tra questo polimorfismo e la CAD aterosclerotica.

Analisi statistica Il pacchetto statistico SPSS v.21 è stato utilizzato per codificare e inserire i dati, dove è stato descritto come numero e percentuale per la media qualitativa e la deviazione standard (SD) per i dati distribuiti normalmente mentre la mediana e l'intervallo interquintile (IQR) scelti per quelli non normalmente dati quantitativi distribuiti.

I confronti per le variabili qualitative tra i gruppi sono stati effettuati mediante test chi-quadrato o test esatti della fessura, mentre i confronti tra variabili quantitative distribuite normalmente sono stati eseguiti utilizzando l'analisi della varianza e il test post hock 2khs e variabili quantitative che non sono distribuite normalmente, dove confrontate utilizzando (non -croscal parametrico e test u di Mann-Whitney), statisticamente significativo considerato quando i valori di P. erano inferiori o uguali (0,05).