Base fisiopatologica dell'idrosadenite suppurativa

Allo studio parteciperebbero pazienti con HS, divisi in tre gruppi a seconda dello stadio dell'idrosadenite.

Il primo e il secondo gruppo includerebbero pazienti allo stadio 2-3 (secondo la scala Hurley) in cui si è verificata una remissione clinica parziale o completa dopo la terapia biologica e il trattamento chirurgico secondo le linee guida.

Nel terzo gruppo (di controllo) classificheremo i campioni ottenuti dai pazienti sopra menzionati, dai quali preleveremo un campione di pelle "normale" di 1 x 1 cm.

Con la procedura standard di processazione istopatologica del tessuto dopo fissazione del tessuto con formalina tamponata al 10% e inclusione in paraffina, le sezioni di tessuto colorate con la colorazione standard con ematossilina ed eosina (HE) verranno analizzate utilizzando un microscopio ottico in modo tale da determinare il tipo e quantità di infiltrato infiammatorio, quantità di tessuto di granulazione e fibrosi e cambiamenti epiteliali della superficie e dell'epitelio follicolare e classificati in base all'intensità in 3 categorie.

I campioni di tessuto fissati in formalina e inclusi in paraffina verranno utilizzati per realizzare sezioni di tessuto per la colorazione immunoistochimica. L'espressione delle citochine infiammatorie sarà analizzata utilizzando il metodo immunoistochimico della perossidasi indiretta. Gli anticorpi primari e secondari verranno utilizzati per le analisi immunoistochimiche. Le sezioni di tessuto preparate verranno deparaffinate in una soluzione di xilene e poi disidratate in una serie di alcoli etilici a concentrazioni decrescenti (100%, 96% e 75%). Verrà quindi lavato tre volte con una soluzione PBS e in tampone citrato (10 mM, pH 6,0). Le sezioni verranno quindi lavate con soluzione Triton X 100 (0,3% in PBS) a temperatura ambiente. Successivamente, la perossidasi endogena verrà inattivata utilizzando acqua ossigenata in metanolo (0,3%) per 30 minuti. Dopo aver lavato le sezioni di tessuto con una soluzione PBS, verrà aggiunto siero normale (10%) per 60 minuti. Dopo aver lavato le sezioni di tessuto in soluzione PBS (pH 7,4), verrà aggiunto l'anticorpo secondario a seconda di quello primario. La reidratazione dei tessuti verrà effettuata in alcoli etilici a concentrazioni crescenti (75%, 96% e 100%). Dopo chiarificazione con xilolo, il preparato verrà incorporato nell'entalano.

L'intensità della colorazione immunoistochimica verrà analizzata utilizzando il programma per computer ImageJ in base all'intensità della colorazione.