Patofysiologisk grundlag for Hidradenitis Suppurativa

HS-patienter, opdelt i tre grupper afhængigt af stadiet af hidradenitis, ville deltage i undersøgelsen.

Den første og anden gruppe vil omfatte patienter i stadie 2-3 (ifølge Hurley-skalaen), hvor der opstod delvis eller fuldstændig klinisk remission efter biologisk terapi og kirurgisk behandling blev udført i henhold til retningslinjerne.

I den tredje (kontrol) gruppe ville vi klassificere prøverne opnået fra de ovennævnte patienter, fra hvem vi ville tage en prøve af "normal" hud, der måler 1 x 1 cm.

Med standardproceduren for patohistologisk vævsbehandling efter vævsfiksering med 10 % bufferet formalin og indlejring i paraffin, vil vævssnit farvet med standard hæmatoxylin og eosin (HE) farvning blive analyseret ved hjælp af et lysmikroskop på en sådan måde, at det bestemmes typen og mængden af ​​inflammatorisk infiltrat, mængden af ​​granulationsvæv og fibrose og epitelændringer af overfladen og follikulært epitel og inddeles efter intensitet i 3 kategorier.

De nævnte vævsprøver fikseret i formalin og indlejret i paraffin vil blive brugt til at lave vævssnit til immunhistokemisk farvning. Ekspressionen af ​​inflammatoriske cytokiner vil blive analyseret ved hjælp af den indirekte peroxidase immunhistokemiske metode. Primære og sekundære antistoffer vil blive brugt til immunhistokemiske analyser. De forberedte vævssnit vil blive afparaffineret i en xylenopløsning og derefter dehydreret i en række ethylalkoholer med faldende koncentrationer (100 %, 96 % og 75 %). Det vil derefter blive vasket tre gange med PBS-opløsning og i citratbuffer (10 mM, pH 6,0). Sektioner vil derefter blive vasket med Triton X 100-opløsning (0,3% i PBS) ved stuetemperatur. Derefter vil endogen peroxidase blive inaktiveret ved hjælp af hydrogenperoxid i methanol (0,3%) i 30 minutter. Efter vask af vævssnittene med PBS-opløsning tilsættes normalt serum (10%) i 60 minutter. Efter vask af vævssnittene i PBS-opløsning (pH 7,4), vil det sekundære antistof blive tilsat afhængigt af det primære. Vævsrehydrering vil blive udført i ethylalkoholer med stigende koncentrationer (75%, 96% og 100%). Efter klaring med xylol vil præparatet blive inkorporeret i entalan.

Intensiteten af ​​immunhistokemisk farvning vil blive analyseret ved hjælp af ImageJ computerprogrammet i henhold til farvningsintensiteten.