Patofysiologisk grund för Hidradenitis Suppurativa

HS-patienter, indelade i tre grupper beroende på stadiet av hidradenit, skulle delta i studien.

Den första och andra gruppen skulle inkludera patienter i stadium 2-3 (enligt Hurley-skalan) hos vilka partiell eller fullständig klinisk remission inträffade efter att biologisk terapi och kirurgisk behandling utförts enligt riktlinjerna.

I den tredje (kontroll)gruppen skulle vi klassificera proverna som erhållits från ovan nämnda patienter, från vilka vi skulle ta ett prov av "normal" hud som mäter 1 x 1 cm.

Med standardförfarandet för patohistologisk vävnadsbearbetning efter vävnadsfixering med 10 % buffrat formalin och inbäddning i paraffin, kommer vävnadssnitt färgade med standard hematoxylin och eosin (HE) färgning att analyseras med hjälp av ett ljusmikroskop på ett sådant sätt att man kan bestämma typen och mängden inflammatoriskt infiltrat, mängden granulationsvävnad och fibros och epitelförändringar av ytan och follikulärt epitel och graderas efter intensitet i 3 kategorier.

De nämnda vävnadsproverna fixerade i formalin och inbäddade i paraffin kommer att användas för att göra vävnadssnitt för immunhistokemisk färgning. Uttrycket av inflammatoriska cytokiner kommer att analyseras med den indirekta peroxidasimmunhistokemiska metoden. Primära och sekundära antikroppar kommer att användas för immunhistokemiska analyser. De preparerade vävnadssnitten kommer att avparaffineras i en xylenlösning och sedan dehydratiseras i en serie etylalkoholer med minskande koncentrationer (100 %, 96 % och 75 %). Den kommer sedan att tvättas tre gånger med PBS-lösning och i citratbuffert (10 mM, pH 6,0). Sektioner kommer sedan att tvättas med Triton X 100-lösning (0,3 % i PBS) vid rumstemperatur. Därefter kommer endogent peroxidas att inaktiveras med väteperoxid i metanol (0,3%) i 30 minuter. Efter tvättning av vävnadssektionerna med PBS-lösning tillsätts normalt serum (10%) i 60 minuter. Efter tvättning av vävnadssektionerna i PBS-lösning (pH 7,4) tillsätts den sekundära antikroppen beroende på den primära. Vävnadsrehydrering kommer att göras i etylalkoholer med ökande koncentrationer (75%, 96% och 100%). Efter klarning med xylol kommer preparatet att inkorporeras i entalan.

Intensiteten av immunhistokemisk färgning kommer att analyseras med hjälp av datorprogrammet ImageJ enligt färgningsintensiteten.