Efficacia dei Probiotici Orali SALI-10 nella Gengivite Sperimentale

La gengivite è una condizione patologica orale che colpisce dal 50% al 90% degli adulti a livello globale. La patologia gengivale può essere invertita riducendo o rimuovendo la placca microbica che si accumula sui tessuti duri e molli ed è considerata lo standard di cura del settore. Si ritiene che un'igiene orale regolare in combinazione con terapie che offrono un beneficio antimicrobico possa mitigare l'insorgenza della gengivite. Tuttavia, il test delle terapie per il beneficio profilattico per mitigare lo sviluppo della gengivite non è stato completamente esaminato.

Il modello classico di gengivite sperimentale (EG) è stato sviluppato nel 1965 da Loe e Silness, che hanno dimostrato in modo convincente la relazione causale tra l'accumulo di placca dentale e lo sviluppo di gengivite clinicamente evidente in giovani adulti sani che si astenevano da tutte le pratiche di igiene orale per un periodo di 21 giorni. Inoltre, riprendendo le consuete pratiche di igiene orale, tutti i soggetti hanno dimostrato un ritorno alla salute gengivale. Comprendere come i partecipanti siano tornati rapidamente alla salute gengivale si allinea con la comprensione attuale che lo stato clinicamente sano è un processo attivo e dinamico.

I neutrofili, un tipo di globulo bianco (leucocita), rappresentano un componente chiave del sistema di difesa innato che protegge il tessuto parodontale sia dalla gengivite che dalla parodontite. Non solo sono la prima linea di difesa cellulare, ma sono tra i leucociti più abbondanti all'interno dei tessuti parodontali. La gengivite è associata a un aumento significativo del numero di neutrofili che migrano verso il tessuto parodontale. Al contrario, individui con troppo pochi neutrofili causati da carenze congenite nel numero o nel transito dei neutrofili (LAD 1 e 2), o quelli con neutropenia indotta da induzione chimica con agenti antimitotici come la ciclofosfamide, sviluppano invariabilmente parodontite. Allo stesso modo, studi su topi knockout difettosi nel transito dei neutrofili sviluppano anch'essi parodontite. Coerente con il contributo chiave dei neutrofili sia alla gengivite che alla parodontite, il transito dei neutrofili verso il tessuto gengivale è altamente regolato. Il parodonto contiene mediatori di difesa innata dell'ospite che facilitano il transito dei neutrofili dal tessuto gengivale altamente vascolarizzato al solco gengivale, dove formano una "barriera" tra il tessuto ospite e il biofilm della placca dentale.

Tuttavia, la presenza prolungata di neutrofili nel tessuto gengivale non è tollerata nello stato di salute. Il fallimento nel downregolare il transito dei neutrofili si traduce in un aumento del numero di neutrofili nel tessuto gengivale e in un aumento significativo della perdita ossea parodontale. Pertanto, l'homing dei neutrofili verso il solco gengivale è altamente regolato in modo che, in condizioni di salute parodontale, sia presente la quantità appropriata di neutrofili per mantenere il controllo della crescita batterica della placca dentale e non provocare danni tissutali. La valutazione dei neutrofili orali e sanguigni durante la gengivite sperimentale ha mostrato che le persone con una risposta infiammatoria eccezionalmente alta hanno una risposta esagerata dei neutrofili polimorfonucleati sia nella cavità orale che nel sangue.

La gengivite è una condizione infiammatoria reversibile causata dall'accumulo di placca dentale e dall'associata alterazione dell'omeostasi ospite-microbica. Durante la gengivite, la comunità microbica passa dall'essere dominata da batteri gram-positivi associati alla salute, come le specie di Streptococcus, a periopatogeni gram-negativi, inclusi specie dei generi Porphyromonas, Tannerella, Treponema e Prevotella. Questo spostamento disbiotico innesca risposte infiammatorie, portando a danni tissutali e, in alcuni casi, alla progressione verso la parodontite.

Un recente studio sulla gengivite sperimentale umana ha identificato tre distinti fenotipi di risposta dell'ospite - risponditori alti, bassi e lenti - basati su parametri clinici, infiammatori e microbici:

Risponditori Alti: Rapido accumulo di placca accompagnato da un aumento significativo di periopatogeni gram-negativi e marcatori infiammatori elevati, come l'interleuchina-1β (IL-1β).

Risponditori Bassi: Accumulo di placca simile ai risponditori alti ma infiammazione inferiore, suggerendo una risposta dell'ospite più attenuata alla disbiosi batterica.

Risponditori Lenti: Accumulo di placca e successione microbica ritardati, con prolungata dominanza di specie di Streptococcus associate alla salute e una risposta infiammatoria ritardata o ridotta.

L'analisi microbica ha rivelato che la persistenza di specie benefiche di Streptococcus, come S. sanguinis e S. oralis, nei risponditori lenti e bassi si correla con un effetto protettivo contro l'emergenza di periopatogeni e la relativa cascata infiammatoria. Al contrario, la perdita di questi batteri benefici nei risponditori alti è stata collegata a un'infiammazione più grave, evidenziando il ruolo critico del microbioma orale nel modulare la gravità della gengivite.

Le salivaricine lantibiotiche sono peptidi policiclici contenenti residui di lantionina e/o β-metillantionina prodotti da alcuni ceppi di Streptococcus salivarius, che risiedono quasi esclusivamente nella cavità orale umana. Queste molecole sono notevoli per la loro attività antimicrobica verso patogeni orali rilevanti, supportando lo sviluppo di ceppi probiotici produttori di salivaricina. Le salivaricine sono anche rilevanti per lo sviluppo di nuove terapie antibatteriche nel contesto dell'emergente resistenza agli antibiotici. Lavori precedenti hanno mostrato le caratteristiche di batteriocina e sicurezza dei ceppi di S. salivarius isolati da soggetti sani, dimostrando il loro potenziale per l'uso come probiotici.

Soluzione Proposta: S. salivarius SALI-10

Gli investigatori propongono di utilizzare un nuovo ceppo, Streptococcus salivarius SALI-10, come intervento microbico mirato per modulare il microbioma orale e prevenire la gengivite. Si ipotizza che S. salivarius SALI-10:

• Mantenga una popolazione stabile di streptococchi benefici durante l'accumulo di placca.
• Inibisca la crescita dei periopatogeni attraverso competizione microbica e produzione di Salivaricina 10.
• Ritardi o sopprima lo spostamento disbiotico verso la dominanza gram-negativa, riducendo così la risposta infiammatoria.

Sostenendo l'omeostasi microbica, SALI-10 potrebbe emulare la resilienza osservata nei risponditori lenti e offrire una nuova strategia per la prevenzione della gengivite.

Regime di Dosaggio

Questo è uno studio controllato con placebo. Ogni partecipante randomizzato al gruppo di intervento riceverà pastiglie SALI-10 al gusto di menta. Prenderanno una pastiglia due volte al giorno - al mattino e alla sera - dopo essersi lavati i denti, lasciandola sciogliere in bocca. I partecipanti utilizzeranno le pastiglie dello studio per tutta la durata dello studio.

Schermatura Pre-studio e Valutazione Basale Telefonica Pre-Schermatura

I potenziali partecipanti allo studio che esprimono interesse saranno contattati telefonicamente. L'idoneità per lo screening sarà valutata utilizzando domande di reclutamento standard.

Screening di Persona

Prima che avvengano le procedure di screening, i partecipanti forniranno il consenso informato. I partecipanti completeranno informazioni demografiche e sanitarie e si sottoporranno a un esame orale dei tessuti molli e duri. Le partecipanti di sesso femminile si sottoporranno a un test di gravidanza delle urine. Lo screening continua fino a quando non saranno arruolati sessanta (60) partecipanti.

Visita 1 - Valutazione Basale

I partecipanti si sottoporranno a un esame orale che include profondità di sondaggio (PD), livello di attacco (AL), indice di placca visibile (VPI), indice gengivale (GI) e sanguinamento al sondaggio (BOP). I biospecimen raccolti includeranno fluido crevicolare gengivale (GCF), placca sottogengivale, saliva e un risciacquo orale. I partecipanti riceveranno una pulizia dentale e il prodotto dello studio assegnato con le istruzioni.

Programma delle Visite di Trattamento

I partecipanti consumeranno due pastiglie al giorno a casa e parteciperanno a otto (8) visite di studio.

Visita 2 (Giorno -14 / -7)

Esame orale e raccolta di biospecimen (GCF, placca, saliva, risciacquo orale). I partecipanti riferiscono l'uso di NHPs e gli effetti avversi.

Fase di Induzione (Nessuna Igiene Orale per 21 Giorni) Visita 3 (Giorno 0)

Esame orale e raccolta di biospecimen. I partecipanti si astengono da qualsiasi igiene orale per 21 giorni e continuano con le pastiglie assegnate.

Visita 4 (Giorno 7)

Esame orale e raccolta di biospecimen. Ai partecipanti viene ricordato di continuare ad astenersi dall'igiene orale.

Visita 5 (Giorno 14)

Esame orale e raccolta di biospecimen. I partecipanti continuano ad astenersi dall'igiene orale.

Fase di Risoluzione (I Partecipanti Riprendono l'Igiene Orale) Visita 6 (Giorno 21)

Esame orale e raccolta di biospecimen. I partecipanti ricevono una pulizia dentale e riprendono l'igiene orale domestica continuando con le pastiglie dello studio.

Visita 7 (Giorno 28)

Esame orale e raccolta di biospecimen.

Visita 8 - Fine dello Studio (Giorno 35)

Esame orale e raccolta di biospecimen. I partecipanti ricevono un compenso e riprendono la regolare igiene orale. Dopo il completamento dello studio, il produttore svelerà i gruppi di prodotto e i partecipanti saranno informati della loro assegnazione.