Cellule CAR-NK a Doppio Bersaglio per Glioblastoma Ricorrente/Progressivo e Glioma di Alto Grado (DUAL-CAR-NK-GB)

Razionale: Il GBM/HGG è eterogeneo a livello molecolare e può eludere l'immunoterapia a singolo antigene attraverso la perdita dell'antigene o l'espressione eterogenea dell'antigene. Questo studio valuta una strategia CAR-NK a doppio bersaglio in grado di riconoscere due antigeni associati al tumore selezionati tra IL13Rα2, EGFR/EGFRvIII e B7-H3 (CD276). Valutazione del bersaglio e assegnazione della coorte: Al momento dello screening, il tessuto tumorale archivio e/o fresco (da resezione o biopsia clinicamente indicata) sarà valutato mediante immunoistochimica (IHC) per IL13Rα2, EGFR e B7-H3, e mediante test molecolari (es. RT-PCR o NGS) per EGFRvIII quando applicabile. I partecipanti saranno assegnati a una delle tre coorti definite dai biomarcatori in base ai due antigeni ad alta priorità rilevati al di sopra delle soglie definite dal protocollo. Un comitato di revisione interno può raccomandare di dare priorità a un costrutto per un'espansione successiva sulla base di segnali emergenti di sicurezza/fattibilità/attività. Prodotto sperimentale: I prodotti sperimentali sono cellule CAR-NK allogeniche pronte all'uso, prodotte da una fonte standardizzata di cellule NK (es. cellule NK derivate da iPSC o una banca master di cellule NK qualificata) e geneticamente modificate per esprimere un CAR tandem (a doppio bersaglio). I costrutti includono un interruttore di sicurezza incorporato (es. caspasi-9 induttibile) e possono includere un modulo citochinico di supporto per le NK (es. IL-15) per migliorare la persistenza. L'esatto costrutto a doppio bersaglio utilizzato per ciascun partecipante dipende dal profilo antigenico rilevato allo screening.

Via di somministrazione: Le cellule CAR-NK saranno somministrate locoregionalmente alla parete della cavità chirurgica e/o nel sistema ventricolare tramite un catetere/serbatoio posizionato neurochirurgicamente, per massimizzare l'esposizione al sito tumorale limitando l'esposizione sistemica. Escalation di dose ed espansione: Ogni coorte definita dai biomarcatori segue uno schema modificato di escalation di dose 3+3 con fino a tre livelli di dose (es. 1×10^7, 3×10^7 e 1×10^8 cellule CAR-NK per infusione). Le tossicità dose-limitanti (DLT) saranno valutate durante i primi 28 giorni dopo la prima infusione. Dopo l'identificazione di una RP2D all'interno di una coorte, una fase di espansione caratterizzerà ulteriormente la sicurezza e l'attività preliminare e potrà consentire infusioni ripetute alla RP2D. Follow-up: I partecipanti saranno monitorati attentamente per eventi avversi, inclusi la sindrome da rilascio di citochine (CRS) e la sindrome da neurotossicità associata a cellule effettrici immunitarie (ICANS). La risposta tumorale sarà valutata con risonanza magnetica utilizzando i criteri RANO a intervalli regolari. Il follow-up a lungo termine per la sicurezza della terapia cellulare geneticamente modificata sarà condotto secondo le linee guida applicabili.