아스피린과 뇌졸중에 대한 혈소판 과민성 (PLARAS)

문맥

아스피린은 나트륨 와파린에 대한 특별한 적응증(예: 심장 혈전, 만성 심방 세동, 심장 색전성 허혈성 뇌졸중). 일부 메타 분석을 포함한 최근 연구에 따르면 아스피린을 사용하는 심혈관 질환 환자의 5-60%가 약물에 대한 혈소판 저항성을 보입니다. 그러나 이용 가능한 연구에는 해석과 실제 적용을 어렵게 만드는 몇 가지 방법론적 오류가 포함되어 있습니다. 따라서 혈소판 저항의 발생률과 결과는 특히 허혈성 뇌졸중 환자에서 제대로 이해되지 않고 있습니다. 또한 외래 추적 관찰에 환자를 포함시킨 연구는 거의 없습니다.

아스피린 치료

이 연구에서 처방되는 아스피린의 용량은 300mg 경구 또는 비위관을 통해 하루에 한 번(보조 요법) 환자가 혈전 용해 요법의 징후가 없는 경우 입원 직후 첫 번째 용량 단층 촬영을 합니다. 급성기가 지나면 환자는 아스피린을 하루에 200mg 복용하게 됩니다. 아스피린은 "간단한" 제제로 투여될 것입니다(완충액 없음, 연장 방출 없음).

병원 단계 동안의 결과 분석

결과는 환자가 퇴원할 때까지 입원 기간 동안 매일 평가됩니다. 의사, 환자 및 연구원은 혈소판 기능 검사 결과에 접근할 수 없습니다. 중환자실 입원 일수를 포함하여 입원 일수를 검토하게 됩니다. 사망을 분석하고 각각의 경우에 사망 원인을 자세히 설명합니다. 심전도는 숙련된 심장 전문의가 검사합니다. 심초음파는 이 방법을 전문으로 하는 숙련된 심장전문의가 검사합니다. 단층 촬영은 숙련된 신경방사선 전문의가 검사하고 공명/공명 혈관조영술은 또 다른 숙련된 신경방사선 전문의가 평가합니다. 둘 다 혈소판 결과에 대해 눈이 멀게 됩니다. 결과는 신경과 전문의, 혈액 전문의, 신경방사선 전문의, 심장 전문의, 역학 전문의로 구성된 위원회에서 판단하며, 이들 모두는 혈소판 기능 결과에 대해 눈이 멀게 됩니다.

퇴원 후 모니터링 및 관리

결과는 초기 신경학적 사건 이후 3, 12, 24, 36개월의 인터뷰와 월별 전화 인터뷰를 통해 분석됩니다. 잠재적인 불리한 결과(사망, 입원, 수행된 진단 테스트, 모든 상태의 치료 요청 또는 새로운 증상 발병)는 본 연구의 조사 위원회에서 자세히 평가할 것입니다. 이 평가 동안 의사, 환자 및 연구자는 혈소판 기능 검사 결과에 접근할 수 없습니다. 결과는 신경과 전문의, 혈액 전문의, 신경방사선 전문의, 심장 전문의, 역학 전문의로 구성된 위원회에서 판단하며, 이들 모두는 혈소판 검사 결과에 대해 눈이 멀게 됩니다. 방문 및 월별 전화 연락을 통해. 이 연구에는 아스피린 패키지에 대한 검토 외에도 환자와의 인터뷰와 가족과의 별도 인터뷰가 포함될 것입니다. 또한 순응도는 혈청 트롬복산 B2를 측정하여 평가합니다.

• 환자 및 그 가족과의 월별 전화 연락은 환자가 안정적으로 유지되었는지 또는 부정적인 결과(사망, 치료가 필요하거나 새로운 증상이 나타남)가 발생했는지 여부를 결정하는 데 사용됩니다. 이러한 결과가 있을 경우 세부 사항(사망 진단서, 입원 보고, 수행된 진단 테스트 분석)을 조사합니다. 또한 문의 또는 입원과 관련된 기록 및 의료 보고서를 조사할 것입니다.
• 3개월과 12개월의 평가는 다양한 혈소판 기능 테스트로 구성됩니다. 또한 표준화된 설문지가 관리됩니다. 상담에 참석하지 않는 환자에게는 30일 이내에 연락을 드립니다. 환자가 여전히 상담에 참석할 수 없는 경우(예: 보행 장애 등), 연구원은 환자의 집으로 이동합니다.

심한 출혈

• 치명적인 출혈 사건(모든 원인이 설명됨)
• 생명을 위협하는 출혈: 최소 50g/L의 헤모글로빈 감소, 근수축을 필요로 하는 저혈압(출혈성 쇼크) 증상이 있는 두개내 출혈; 또는 최소 4단위의 적혈구 수혈
• (지속적인 후유증이 있는) 현저한 장애로 정의되는 주요 출혈; 상당한 시력 상실로 이어지는 안내 출혈; 또는 1-3 단위의 적혈구 수혈

아스피린에 대한 과반응성의 정의

• C-EPI(콜라겐-에피네프린) 카트리지를 사용하는 PFA-100의 경우: 폐색 시간 < 150초
• Chrono-Log 모델 700 전혈: 0.75mM의 아라키돈산으로 0Ω 이상
• Chrono-Log Model 700 Whole-Blood: 공식 1에 따라 1 mg/L 및 5 mg/L의 콜라겐 사용 - (1 mg의 응집 속도 / 5 mg의 응집 속도). 0.50 미만의 값에 대해 과잉 반응이 정의됩니다.
• - Chrono-Log Model 700 Whole-Blood: 10Ω 이상에서 1mg/L의 콜라겐 함유
• Plateletworks: 아라키돈산으로 60% 이상의 응집은 저항성으로 간주됩니다.
• VerifyNow Aspirin Assay(Accumetrics): ≥ 550 아스피린 반응 단위(ARU)
• Impact-R(Diamed) > 아라키돈산과 함께 인큐베이션 후 플레이트 표면에 3.2% 혈소판 응집체

혈액 수집

응급실 도착 시(아스피린 첫 투여 전), 입원 5일째, 3개월 후, 12개월 후 다시 혈액 샘플을 채취합니다. ED에 도착하여 채취한 샘플을 제외하고 밤새 금식한 후 오전 9시에서 12시 사이에 샘플을 채취합니다. 혈액은 전주 정맥 또는 필요한 경우 다른 정맥에서 구연산염(3.2%; Vacuette, Greiner Bio-One) 병으로 또는 직접 Plateletworks 병 키트로 수집됩니다. 샘플은 총 약 20ml입니다. 지혈대는 30초 이상 착용하지 않으며 채취 전이나 채취하는 동안 움직임이 허용되지 않습니다. 수집에 의한 혈소판 활성화를 방지하기 위해 위의 주의사항을 준수하더라도 처음 5ml의 검체는 폐기합니다. 병은 상단까지 채워지고 항응고제와 혈액의 올바른 혼합을 얻기 위해 부드럽게 5번 뒤집어집니다. Plateletworks 테스트에서 분석은 수집 후 10분 이내에 수행됩니다. 나머지 분석은 30분 이내에 수행됩니다.

CHRONOLOG MODEL 700 및 소프트웨어(AGGRO/LINK-8, PA, USA)를 사용하여 전혈의 임피던스를 측정하여 응집 측정

구연산 처리된 전혈을 채취한 후 샘플은 30분 이내에 처리됩니다. 전혈을 멸균 식염수(0.9%)로 1:1로 희석하고 여러 시약(Chrono-Log, 0.5mM 아라키돈산, 1g/L 콜라겐 또는 5g/L 콜라겐) 중 하나로 자극합니다. 최대 임피던스는 6분 동안 샘플에 담긴 두 개의 전극을 사용하여 측정되고 Ω으로 표시됩니다.

PFA-100 (PLATELET FUNCTION ANALYZE-100, SIEMENS, USA)

PFA-100® 분석을 위한 혈액 표본은 제조업체의 지침에 따라 테스트됩니다. 모든 샘플에 대해 PFA-100® 자체 테스트 절차는 분석 전에 실행됩니다. 테스트는 콜라겐-에피네프린 카트리지가 있는 구연산 전혈을 사용하여 수행됩니다. 전혈은 콜라겐과 에피네프린이 함침된 멤브레인으로 덮인 150-µm 구멍을 통해 높은 전단 응력 조건에서 흡인됩니다. 혈소판 마개로 구멍을 막는 데 걸리는 시간을 폐쇄 시간(초 단위로 측정)으로 기록합니다.

혈청 트롬복산 B2 결정 - ELISA

수집 후 혈액은 즉시 원심분리(+4 °C)되고 혈장은 즉시 액체 질소(-190 °C)에서 동결된 다음 -80 °C 냉동고로 옮겨집니다. 혈청 트롬복산 B2는 제조업체의 지침에 따라 ELISA로 2회 측정하고 ng/ml로 표시합니다.

PLATELETWORKS (HELENA CORPORATION, 미국)

간략하게, 아라키돈산, 콜라겐, ADP 및 EDTA를 포함하는 키트에서 혈액을 채취한 후, Helena Laboratories(Helena Point of Care ® , 텍사스, 미국). 혈소판 응집 백분율은 다음 공식을 사용하여 계산됩니다: 응집 % = [EDTA의 혈소판 - 작용제가 있는 혈소판]/ EDTA의 혈소판 x 100

VERIFYNOW 아스피린, ACCUMETRICS, 미국

VerifyNow Aspirin 현장 진료 시스템(Accumetrics, San Diego, CA, USA)은 전혈에서 혈소판 응집의 탁도 광학 검출을 기반으로 합니다. 전혈은 인간 피브리노겐으로 코팅된 비드와 아라키돈산의 동결 건조 제제를 포함하는 표준 카트리지로 옮겨집니다. 응집이 발생하면 시스템은 광도 투과율 결과를 아스피린 반응 단위(ARU)로 변환합니다.

IMPACT-R, DIAMED, 미국

구연산 혈액(130μL)을 제조업체의 프로토콜에 따라 테스트 키트(웰)에 넣고 회전 원뿔을 사용하여 2분(1800s-1) 동안 전단 흐름을 적용합니다. 그런 다음 우물을 세척하고 May Grünwald로 염색합니다. 표면에 대한 혈소판의 접착력은 Impact-R에 연결된 이미지 분석 시스템을 사용하여 평가되며 결과는 염색된 영역의 백분율로 표시됩니다.

통계 분석

모든 계산에는 Windows용 소프트웨어 IBM SPSS 21.0(SPSS Inc, Chicago, IL, USA)을 사용합니다. 데이터베이스는 SPSS Data Entry Builder 4.0에서 복식 입력 시스템을 사용하여 생성됩니다.

프로젝트 실행 일정

단계 개월 달력 날짜 시험 활동 및 추정

1. 13 2007년 3월 - 2008년 4월 프로토콜 개발
2. 2 2008년 5월 - 2008년 6월 절차 확정
3. 5 2008년 7월 - 2008년 12월 프로토콜 개정
4. 6 2009년 1월 - 2009년 6월 교육
5. 12 2009.07 - 2010.06 응급실 본심모집
6. 36 2009년 8월 - 2013년 6월 후속 조치
7. 3 2013년 7월 - 2013년 10월 분석 및 보고.

이해 상충

데이터의 조사, 수집 또는 분석에 대한 외부 영향이나 후원자는 없습니다. 유사하게, 원고의 통계 분석, 준비 및 출판은 USP 의학부의 역학자 및 통계학자와 협력하여 전적으로 연구원이 직접 수행합니다. 혈소판 검사용 키트 및 장비를 제공한 회사 및 기관은 컨퍼런스 프레젠테이션 및 간행물에 설명됩니다.