급성 폐손상에서 지연된 호중구 세포사멸의 기전

1. 문학적 근거 귀여운 호흡곤란 증후군(ARDS)은 호흡곤란과 진행성 저산소혈증을 특징으로 하는 임상 증후군으로 심인성 요인 이외의 다양한 폐 및 폐외 요인에 의해 미만성 폐포 및 폐 간질 부종이 발생한다. ARDS 발생률은 연간 75/10,000 정도로 높으며 패혈증 및 폐 감염이 가장 흔한 원인입니다. 과거에는 과도한 면역 활성화가 ARDS의 병태생리학의 핵심이라고 일반적으로 믿어졌으며, 호중구는 ARDS에서 염증성 과잉행동 및 폐 손상의 핵심 동인으로 인식되고 있습니다. 지난 50년 동안 ARDS의 역학, 병인 및 병리생리학에서 일부 진전이 있었지만 일부 ARDS 환자의 임상 결과는 기계 환기 및 수액 치료 모드를 최적화하고 경향 환기 및 근육이완제의 사용으로 인해 ARDS는 여전히 중환자실에서 가장 흔한 사망 및 장애 원인 중 하나이며, 이 질병의 사망률은 현재 30-40%로 높습니다. 임상에서 ARDS 치료를 위한 효과적인 약물이 아직 부족하고, 면역 과활성화에 적용된 글루코코르티코이드도 좋은 결과를 얻지 못하고 있다. 이는 ARDS의 불분명한 병인과 관련이 있습니다. 따라서 ARDS의 병인과 진행을 더 탐구하고 새로운 치료 표적을 찾는 것은 여전히 ​​뜨겁고 어려운 시점입니다.

과거에는 말초 혈액의 성숙한 PMN이 일반적으로 말기의 기능성 세포로 간주되었지만 다양한 선천적 면역 반응(염증, 감염, 종양, 자가 면역 등 포함)에 광범위하게 관여하며 매우 다른 이펙터를 채택할 수 있습니다. 메커니즘. 따라서 연구가 심화됨에 따라 최근 몇 년 동안 다양한 기능(예: 면역 조절 및 복구)을 가진 호중구 하위 유형인 cd16dimcd62lbrightpmn 및 cd16brightcd62ldimmpmn이 확인되었습니다. 건강한 사람의 정상 상태에서 말초 혈액의 전형적인 성숙한 호중구(cd16brightcd62lbright)는 전체 PMN의 98% 이상을 차지하며 두 호중구 아형의 비율은 상대적으로 낮습니다. 염증 상태에서 cd16dimcd62lbright 및 cd16brightcd62ldim 호중구의 비율이 크게 증가했습니다. Proteomic 분석은 호중구의 두 하위 유형 사이에 상당한 차이가 있음을 보여주었습니다. cd16dimcd62lbbright neutrophil subgroup의 핵은 banded이며, 이는 lipopolysaccharide (LPS)에 의해 자극된 후 골수에서 방출됩니다. LPS 감염 모델에서 전혈에서 PMN의 20% - 25%를 차지합니다. 아폽토시스 속도가 현저하게 감소하고 산화 폭발 및 식균 작용과 같은 정균 효과가 크게 향상됩니다. 반대로 cd16brightcd62ldim 호중구 하위 그룹은 항균 능력이 감소하고 면역 억제 표현형을 나타냅니다. 최근 몇 년 동안 면역억제 기능을 가진 새로 발견된 호중구 아형으로 실험적 인간 내독소혈증 모델에서 면역억제와 관련된 T 세포 증식을 억제할 수 있습니다.

우리의 이전 연구에서, 우리는 ocotillol ginsenoside와 glycine의 약리 활성을 가질 수 있는 ocotillol ginsenoside의 새로운 아미노산 유도체를 성공적으로 얻었고, ARDS 호중구 아형의 세포 사멸 지연 및 면역 억제를 개선하는 잠재적인 역할을 가지고 있으며, ARDS 치료를 위한 신약 개발 가능성.

2. 실험 단계는 다음과 같다.

1. ARDS 환자의 말초 혈액 샘플을 수집하여 염증 마커를 검출했습니다.
2. 호중구는 ARDS 환자의 말초 혈액에서 분리되었습니다.
3. 호중구 아형의 비율은 유세포 분석법으로 검출되었고 호중구 아형이 분리되었습니다.
4. 호중구 아형을 말초 혈액 T 림프구와 공동 배양하여 T 세포 증식 및 호중구 아형의 세포사멸을 억제하는 능력을 검출했습니다.
5. ARDS(2050100 μm) 환자의 말초 혈액 호중구 및 다양한 용량의 진세노사이드 글리신 유도체
6. Bax, Mcl-1 및 cleaved caspase-3는 Western blot으로 검출되었다.
7. akg38k 경로에서 세포사멸 관련 유전자의 발현을 검출하기 위해 고처리량 PCR 및 mapp-4를 사용하였다.
8. 대사체 분석: 대사체 분석을 위해 ARDS 환자의 말초 혈액을 수집합니다.

3. 연구방법

1. 진단 기준: ARDS의 진단 기준은 2012 베를린 표준을 참조하십시오.
2. 포함 기준: (1) 연령 ≥ 18세; (2) 24시간 이내의 급성 폐손상 진단(베를린 급성 폐손상 진단 기준)
3. 제외 기준: (1) 연령 < 18세; (2) 입원 후 48시간 이내 퇴원 또는 사망; (3) 임신 또는 산욕기; (4) 면역 억제 환자.

4. 테스트 절차

1. 방법: 선정기준에 부합하는 중환자실 환자를 선정하였다.
2. 사전 동의 절차: 환자 또는 법정대리인과 의사소통 후 사전 동의서에 서명

5. 실험 시작 및 종료 2020년 1월에 사전동의서 서명

6. 데이터 보안 및 모니터링 계획 환자의 의료 기록(연구 의료 기록/CRF, 테스트 양식 등)은 병원에 완전히 보관됩니다. 의사는 실험실 테스트 및 기타 검사 결과를 의료 기록에 기록합니다. 연구원, 윤리위원회 및 약물 관리는 그의 의료 기록에 대한 액세스가 허용됩니다. 연구 결과에 대한 공개 보고서는 환자의 개인 신원을 밝히지 않습니다. 우리는 법이 허용하는 범위 내에서 환자 정보를 보호하기 위해 최선을 다할 것입니다. 의학 연구 윤리에 따라 개인 프라이버시 정보를 제외하고 실험 데이터는 공개 조회 및 공유가 가능하며 조회 및 공유는 네트워크 기반의 전자 데이터베이스로 제한하여 개인 프라이버시 정보가 노출되지 않도록 합니다.

7. 윤리적 원칙과 관련 법규를 준수한다. 연구 참여 여부는 전적으로 환자와 법정대리인의 의사에 달려 있다. 환자 및 그 가족은 연구 과정 중 언제든지 연구 참여를 거부하거나 연구에서 철회할 수 있습니다. 이는 환자와 의사 간의 관계에 영향을 미치지 않으며 환자의 의료 또는 기타 혜택 손실에도 영향을 미치지 않습니다.

8. 통계 분석 계획 통계 분석은 SPSS15.0 소프트웨어를 사용하였다. 측정자료는 평균±표준편차로 표현하였고, 집단 간 비교는 t 검정 또는 비모수 검정을, 계수는 카이제곱 검정을, 변수 간의 관계는 선형상관분석을 사용하였으며, P<0.05는 다음과 같이 하였다. 통계적으로 유의미한.