치근단 치주염에서 프로스타글란딘과 산화질소 합성의 중요성

• 연구 설계 이 관찰, 분석, 단면 연구는 단일 센터에서 수행되었습니다. 계획된 표본 크기에 도달하기 위해 2021년 6월부터 2022년 5월 사이에 치근단 치주염(AP) 및/또는 만성 치주염(CP)으로 인해 xxxx 대학 근관치료학과에 지원한 약 1200명의 환자를 구강 내 검사 및 인구통계학적 특성. 검사 결과, 진단이 확정된 AP만 있는 환자 85명(AP군)과 CP만 있는 환자 50명(CP군)을 연구에 포함시켰다. AP와 P가 모두 있는 환자는 연구에서 제외되었습니다. 최근 6개월 이내에 항생제 및/또는 항염증제를 복용한 환자, 임신 또는 수유중인 환자도 제외하였다. 또한, 지난 48시간 동안 스테로이드 또는 비스테로이드성 항염증제, 고용량 비오틴 비타민을 사용한 이력이 있는 경우는 결과에 영향을 미칠 수 있어 연구에서 제외하였다. 치주 질환 및 급성/만성 질환(근육/관절/뼈 질환, 염증성 장 질환, 국소 또는 전신 감염, 중증 장기 질환, 심혈관 질환 및 당뇨병)이 없는 건강한 대조군 50명이 연구에 포함되었습니다. . 연구그룹에 포함된 자 성별, 연령, 체중 특성이 유사한 사람들 중에서 무작위로 선택됩니다.
• 인구통계-임상 이력 연구에 참여한 모든 환자의 성별, 연령, 체질량지수(BMI), 동반질환 상태를 기록했습니다. 구강내 검사 결과 환자의 근관치료(RCT), 치관, 복합/아말감 충전재(CF), 상실치수(NMT) 소견을 얻었다.
• 치근단 및 치주 질환 채점 구강 내에 존재하는 모든 치아를 방사선 촬영하였고 치근단 부위와 관련된 방사선 투과 영상의 존재 및 방사선학적 뼈 손실을 평가했습니다. 연구에서 파노라마 방사선 사진은 표준 모드에서 노출 시간 13500밀리초, 73kVp 및 10mA에서 작동하는 디지털 파노라마 장치(VistaPano S, Durr Dental AG, 독일)를 사용하여 획득했습니다. 치근단 방사선 사진의 경우 Carestream RVG 5200(RVG; Carestream Health Inc, Atlanta, CA, USA) 시스템을 X선 장치, 70kV, 8mA 설정과 함께 사용했습니다. 치근단 영상 획득에는 이등분 각도 기술이 적용되었습니다. 그런 다음 방사선 사진을 Kodak Dental Imaging Software로 분석했습니다. 치아의 방사선학적 평가에서 치주질환이 없는 치근단 방사선 투과성이 있으면 AP 진단에 충분하다고 간주되었습니다. 치근단 지수를 기반으로 한 농양 채점(AS-PAI)은 AP 그룹 내 질병 진행의 지표로 수행되었습니다. 이 채점에는 치근단 치주염의 방사선학적 평가를 위한 채점 체계인 PAI(Perapical Index) 채점 체계10를 사용하였다. 이에 따라 AP그룹은 3개의 하위그룹으로 나누어진다. AS-PAI 1(약함): 치아가 1개 이상 있고 PAI 3 또는 PAI 4인 경우, AS-PAI 2(중등도): 치아가 1개만 있고 PAI 5인 경우, AS-PAI 3(심각): 치아가 1개 있는 경우 PAI가 있는 두 개 이상의 치아 5.

연구를 위해 얻은 치주 측정은 참가자당 약 6개의 선택된 치아에 기록된 가장 높은 탐침 깊이(밀리미터)로 구성되었습니다. 본 연구에서는 CP군을 치주염 병기결정체계(PSS)(Tonetti)에 따라 4개의 하위군으로 나누었다. 이 시스템은 치간 임상적 부착 손실(CAL), 방사선학적 뼈 손실(RBL) 및 치아 손실에 따라 치주염을 I에서 IV까지 분류합니다. 이 점수는 다음과 같습니다: 1단계: CAL 1~2mm, RBL은 관상면 3번째(<15%)이고 치아 손실 없음, 2단계: CAL 3~4mm, RBL은 관상면 3분위(15%~33%) ) 및 치아 손실 없음, 3단계: CAL > 5mm, RBL은 치근의 1/3 및 그 이상까지 확장되고 치아 손실은 치아 4개 미만, 4단계: CAL > 5mm, RBL은 치근의 1/3 중간까지 확장됩니다. 그 이상 및 치아 상실 > 5개 치아. 다만 1단계와 2단계는 사례수가 적어 동일군으로 평가했다. 그 결과 그룹은 1~2단계: PSS 1~2, 2단계: PSS 2, 3단계: PSS 3으로 설계되었다.

• 정맥혈 및 치은연골액(GCF) 수집 금식(8~10시간) 모든 참가자의 정맥혈을 팔뚝 전주정맥/기본정맥에서 채취했습니다. 혈액을 실온에 30분간 보관한 후 2500 xg에서 10분간 원심분리하였다. 원심분리 후, 튜브의 상부 혈청을 분리하였다. 광학 간섭을 방지하기 위해 혈청의 용혈 지수(HI)를 측정했습니다. (Cobas 8000 화학 분석기, 미국). 용혈지수가 50(mg/dl Hb)보다 큰 환자는 연구에서 제외되었습니다. 적절한 혈청을 분석일까지 -80oC에 보관했습니다. 정맥혈 외에도 치은열구액(GCF) 샘플도 수집하여 유사한 조건에서 -80oC에 보관했습니다. 분석 당일 모든 혈청과 GCF는 먼저 +4 oC에서 천천히 용해시킨 다음 측정 전 실온에 두었습니다.

혈액에 의한 오염을 피하기 위해 치주 탐침 전에 치은 열구액 샘플을 채취했습니다. 샘플의 오염을 방지하기 위해 환자는 시술 전 최소 30분 동안 아무것도 먹거나 마시지 않도록 요청 받았습니다. 관련 치아의 근심, 원위 및 협측 표면에서 3개의 샘플을 채취했습니다. 선택한 부위를 면봉으로 격리하고 치은연상 플라크가 있는 경우 큐렛을 사용하여 제거하여 타액 및/또는 플라크 오염을 방지했습니다. 약간의 저항이 느껴질 때까지 부드럽게 놓인 PerioPaper 스트립(OraFlow Inc., NY, USA)을 사용하여 60초 동안 GCF를 수집했습니다. 3개의 샘플을 Eppendorf 튜브에 모은 다음 보관을 위해 -80°C의 실험실 냉동고에 두었습니다. Periopaper를 자동 피펫을 사용하여 100μl의 인산염 완충 식염수(PBS)가 포함된 0.5ml 에펜도르프 튜브(튜브의 자체 중량을 뺀 후)에서 철저하게 세척했습니다. 혈액으로 얼룩진 종이 조각을 샘플에서 제거했습니다. 모든 GCF 샘플은 정밀 저울(Shimadzu Libror, 모델 AEG-220, 독일)에서 무게를 측정하고 기록했습니다. 모든 샘플을 15-20초 볼텍스 장치(Heidolph Reax Top Vortex, Schwabach, Germany)를 사용하여 완전히 혼합했습니다. 이를 통해 GCF가 PBS로 전달될 수 있었습니다. 샘플을 오염시키지 않고 종이 조각을 제거하고 남은 추출물은 작업일까지 냉동고에 보관했습니다. 연구일에 얻은 결과는 중량/PBS에 따라 비율화되었습니다.

• 생화학적 분석 모든 환자의 혈청 내 TNF-α, IL-10, NO 및 PGE2 수준은 Microplate ELISA Reader(BioTek Epoch 2 Microplate ELISA Reader, USA)에서 ELISA 방법을 사용하여 측정되었습니다. 샘플 양(100 μl)이 부족하여 동일한 ELISA 키트를 사용하여 GCF에서 NO 및 PGE2 수준만 측정했습니다.

혈청 TNF-α, IL-10, NO 및 PGE2 수준은 웰이 항체(인간 TNF-α, IL-10, NO 또는 PGE2)로 사전 코팅된 ELISA 플레이트를 사용하여 분석되었습니다. TNF-α, IL-10, NO 및 PGE2 테스트 키트(중국 Bioassay Technology Laboratory)의 감도는 1.52ng/L, 2.59pg/mL, 1.12μmol/L 및 1.28ng/L이며 측정 범위는 3-900ng입니다. /L, 각각 5-1500 pg/mL, 2-600 µmol/L 및 2-600 ng/L, 분석 내 및 분석 간 모든 테스트에 대한 CV는 < 10%였습니다.