Kostinntak av nitrat hos vegetarianere og altetende (NO3)

ACTIVE_COMPARATOR: Vegetarianere

Sunne vegetarianere (veganere og lakto-ovo vegetarianere) 18 og 50 år dannet denne armen.

Annen: Placebo munnvann

Deltakerne fikk placebo munnvann (ultraprent vann uten smak) som de skyllet munnen med i ett minutt, to ganger om dagen i 7 dager. Hvilestoffskifte og blodtrykk ble målt på dag åtte. I tillegg ble det tatt blod- og spyttprøver fra alle deltakerne. Kostholdsregister på syv dager ble også samlet for å bekrefte maten og porsjonsstørrelsene som ble konsumert, tilberedningsmetoder, oppskrifter og eventuelle merkenavn.

Annen: Klorheksidin munnvann

Etter å ha brukt placebo og fullført alle de fysiologiske målingene, fikk deltakerne en ytterligere én ukes tilførsel av antibakteriell munnvann inneholdende 0,2 % klorheksidin (Corsodyl, GlaxoSmithKline, Storbritannia), oppfordret til å skylle munnen i ett minutt, to ganger daglig i 7 dager til. . De returnerte til laboratoriet etter 7 dager for å gjenta alle målinger i samme rekkefølge.

SHAM_COMPARATOR: Altetende dyr

Sunne altetere med lignende egenskaper hos vegetarianere (alder, kroppsmasseindeks, kjønn og fysisk aktivitetsnivå) dannet denne armen

Annen: Placebo munnvann

Deltakerne fikk placebo munnvann (ultraprent vann uten smak) som de skyllet munnen med i ett minutt, to ganger om dagen i 7 dager. Hvilestoffskifte og blodtrykk ble målt på dag åtte. I tillegg ble det tatt blod- og spyttprøver fra alle deltakerne. Kostholdsregister på syv dager ble også samlet for å bekrefte maten og porsjonsstørrelsene som ble konsumert, tilberedningsmetoder, oppskrifter og eventuelle merkenavn.

Annen: Klorheksidin munnvann

Etter å ha brukt placebo og fullført alle de fysiologiske målingene, fikk deltakerne en ytterligere én ukes tilførsel av antibakteriell munnvann inneholdende 0,2 % klorheksidin (Corsodyl, GlaxoSmithKline, Storbritannia), oppfordret til å skylle munnen i ett minutt, to ganger daglig i 7 dager til. . De returnerte til laboratoriet etter 7 dager for å gjenta alle målinger i samme rekkefølge.

Inntak av nitrat i kosten

Makro- og mikronæringsinntak av syv-dagers matdagbøker ble analysert ved hjelp av et program for ernæringsanalyse (Microdiet, Downlee Systems, Chapel-en-le-Frith, Storbritannia). Nitratinnholdet i grønnsaker ble hovedsakelig hentet fra European Food Safety Authority og tilleggsdata for spinat og salat fra Food Standards Agency. Tallene for nitrat og total polyfenol ble lastet opp til Microdiet-databasen før analyse.

Konsentrasjon av nitrat og nitritt i plasma og spytt

Fullblod ble samlet inn i litium-heparinrør (BD Vacutainer®, Becton Dickinson, Plymouth, UK) og raskt sentrifugert ved 4000 rpm og 4°C i 10 minutter. Plasmaet ble deretter separert, frosset ved -80°C inntil ytterligere analyser av nitrat og nitritt ble utført. Ikke-stimulert spytt (3 milliliter) ble også samlet i et sterilt falkerør og raskt frosset ved -80°C. Deretter ble nitrat og nitritt målt i plasma og spytt ved bruk av ozonbasert kjemiluminescens.

Endring i blodtrykk

Systolisk, diastolisk og gjennomsnittlig arterielt blodtrykk ble målt etter britiske retningslinjer for hypertensjon. Tre påfølgende avlesninger i liggende liggende ble tatt ved bruk av en oscillometrisk enhet (Connex ProBP 3400 Digital Blood Pressure Device, Welch Allyn UK ​​Ltd.) med ett minutts hvile mellom avlesningene. Den andre og tredje avlesningen ble beregnet som gjennomsnitt for å bestemme gjennomsnittlig klinikkblodtrykk.

Endring i oral nitratreduserende kapasitet

Nitratreduserende kapasitet til orale bakterier ble analysert for å sammenligne vegetarianere og altetende og behandlinger (placebo munnvann vs antibakteriell munnvann). Deltakerne ble bedt om å holde 10 milliliter vann som inneholdt natriumnitrat (80 μicromols) i munnen i 5 minutter. Munnskyllingen ble samlet i et Falcon sterilt rør og sentrifugert (4500 rpm, 4°C) i 10 minutter. Supernatanten ble samlet og lagret ved -80°C før måling av absolutt nitrittkonsentrasjon.

Endring i hvileenergiforbruk

Hvileenergiforbruk ble analysert ved hjelp av indirekte kalorimetri etter bruk av placebo munnvann og antibakteriell munnvann

Bytt oral mikrobiom

mengde orale bakterier ble analysert ved bruk av 16S ribosomal ribonukleinsyre (rRNA) etter bruk av placebo munnvann og antibakterielt munnvann.

Spytt-DNA ble ekstrahert ved bruk av et DNA-sett (QIAamp® DNeasy Blood & Tissue Kit). Polymerasekjedereaksjon (PCR) amplifikasjon av 16S rRNA V1-2 regionen ble utført ved bruk av universelle 16S primere 27 F (5'-AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG-3') og 338 R (5'-GCW GCC WCC CGT AGG WGT-3'). Enkeltbånds PCR-produkter ble renset og kvantifisert med Qubit 2.0 Fluorometer (Invitrogen, CA, USA). Sekvensering ble utført på en Ion Torrent Personal Genome Machine.

Endring i blodbiomarkører

Blodmarkører ble analysert for å vurdere forskjeller mellom vegetarianere og altetende for å kontrollere for diabetes og dyslipidemi og for å analysere effekten av antibakteriell munnvann.

Fullblodsukker og laktat ble målt ved hjelp av en biokjemianalysator (YSI 2300 Stat Plus, YSI Life Sciences, USA). Totalt kolesterol, triglyserider, lipoproteiner med høy tetthet (HDL) og lipoproteiner med lav tetthet (LDL) ble analysert med enzymatiske metoder ved bruk av Roche 702 spektrofotometriske modulen til en Cobas 8000-analysator (Roche Diagnostics Ltd, UK)