Ocena skuteczności testu miana reduktazy azotanowej i rezazuryny do wykrywania kompleksu Mycobacterium tuberculosis w plwocinie w środowisku o wysokim stężeniu Tb i Hiv (NRA RETA)

Gruźlica (TB) pozostaje główną przyczyną zgonów w krajach rozwijających się, a jej obciążenie zostało spotęgowane przez współistniejącą epidemię HIV. Pomimo postępu medycyny, diagnoza gruźlicy nadal pozostaje wyzwaniem, zwłaszcza w krajach rozwijających się, gdzie diagnoza opiera się głównie na wykrywaniu kompleksu Mycobacterium tuberculosis (MTBC) za pomocą mikroskopii rozmazowej i/lub hodowli. Mikroskopia rozmazowa jest szybka, prosta i niedroga, ale brakuje jej czułości. Hodowla na podłożu stałym, wykonywana w niektórych dobrze wyposażonych laboratoriach, jest bardziej czuła niż mikroskopia, ale uzyskanie wyniku zajmuje do 8 tygodni.

Metody kolorymetryczne zostały wykorzystane do szybkiego wykrywania wrażliwości na leki u M. tuberculosis z izolatów lub bezpośrednio z plwociny. Metody te opierają się na wykrywaniu żywych bakterii poprzez aktywność enzymatyczną (redukcja azotanów) lub ich zdolność do zmniejszania wskaźnika utleniania-redukcji, zarówno w podłożu stałym, jak i ciekłym. Są szybkie, proste i oferują duży potencjał, który należy ocenić pod kątem rozpoznania gruźlicy.

Celem tego badania jest ocena wydajności testów kolorymetrycznych do wykrywania kompleksu M. tuberculosis w próbkach plwociny dorosłych podejrzanych o gruźlicę płuc w warunkach wysokiego rozpowszechnienia gruźlicy i HIV, przy użyciu probówki Löwenstein Jensen (LJ) i wskaźnika wzrostu Mycobacterium ( MGIT) kultura jako złoty standard. Ocenianymi tutaj metodami kolorymetrycznymi będą test reduktazy azotanowej na podłożu stałym, jak opisano (NRA) lub z dodatkowym etapem z użyciem kwasu para-nitrobenzoesowego (PNB) do różnicowania MTBC i NTM (NRA-p) oraz zmodyfikowany test mikropłytkowy z resazuryną , również z wykorzystaniem PNB do różnicowania MTBC i NTM (REMA-p).

. Jeśli okaże się, że którykolwiek z testów kolorymetrycznych jest dokładny, znacznie szybszy niż konwencjonalne metody hodowli i łatwy do wykonania, można go wdrożyć w laboratorium hodowli gruźlicy. Dzięki skróceniu czasu do wykrycia w porównaniu z kulturą konwencjonalną i kosztom w porównaniu z najnowszymi metodami komercyjnymi, testy te stanowią dobrą alternatywę dla metod konwencjonalnych i mogą przyczynić się do poprawy diagnostyki gruźlicy w krajach rozwijających się.