Badanie kliniczne i biomarkerowe skuteczności fotoferezy pozaustrojowej w chorobie przeszczep przeciw gospodarzowi (BIOECP_GVHD)

Tytuł: Badanie eksploracyjne biomarkerów związanych z odpowiedzią kliniczną na fotoferezę pozaustrojową w leczeniu ostrej i przewlekłej choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi po allogenicznym przeszczepieniu hematopoetycznych komórek macierzystych

Cele:

1. Ocena skuteczności klinicznej zastosowania pozaustrojowej fotoferezy w leczeniu ostrej lub przewlekłej choroby przeszczep przeciw gospodarzowi w standardowych wskazaniach klinicznych, określonych przez ośrodki uczestników (Hiszpańska Grupa ds. Transplantacji Układu Krwiotwórczego).
2. Zbadanie i identyfikacja biomarkerów odpowiedzi klinicznej na pozaustrojową fotoferezę za pomocą kompleksowej analizy różnych populacji immunologicznych, w tym komórek T, B i NK, przed i w trakcie epizodów klinicznej choroby przeszczep przeciw gospodarzowi oraz profilu kinetycznego osocza cytokin (interferon-gamma, czynnik aktywujący limfocyty B, czynnik martwicy nowotworów-alfa i interleukina-6) w związku z chorobą przeszczep przeciw gospodarzowi.

Metody:

50 pacjentów z ostrą lub przewlekłą chorobą przeszczep przeciw gospodarzowi po allogenicznym przeszczepieniu hematopoetycznych komórek macierzystych niezależnie od pochodzenia komórek (krew, szpik kostny lub krew pępowinowa), zdiagnozowanych i leczonych w jednym z uczestniczących ośrodków z zamkniętą pozaustrojową fotoferezą we wskazaniach wyszczególnionych poniżej, zostaną przeanalizowane w celu zidentyfikowania potencjalnych biomarkerów odpowiedzi na chorobę przeszczep przeciwko gospodarzowi. Analizy populacji T, B i naturalnych zabójców zostaną przeprowadzone za pomocą wewnątrzkomórkowego barwienia cytokin i cytometrii przepływowej. Pomiar cytokin w osoczu zostanie przeprowadzony metodą Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay. Ośrodki uczestników:

• Klinika Szpitalna. Walencja. Hiszpania
• Klinika Szpitalna. Salamanka. Hiszpania
• Szpital Ramon y Cajal. Madryt. Hiszpania.
• Szpital Murcja. Hiszpania
• Hospital de Navarra w Pampelunie. Hiszpania

Każdy ośrodek uzyska zgodę na badanie od Lokalnej Komisji Etycznej, a pacjenci podpiszą świadomą zgodę. Nie oczekuje się żadnego ryzyka związanego z udziałem pacjentów w tym eksploracyjnym badaniu analitycznym.

Częstotliwość leczenia Częstość leczenia będzie zależała od rodzaju choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi (ostra lub przewlekła) i będzie modyfikowana w zależności od odpowiedzi klinicznej. Wszystkie próbki będą pobierane w tym samym czasie co inne standardowe próbki krwi.

Ostra choroba przeszczep przeciwko gospodarzowi: leczenie rozpocznie się od 3 sesji na tydzień, w 1. tygodniu. Zwykle odpowiedź zostanie ustalona w ciągu 3-4 tygodni. W przypadku wyraźnej progresji po 2 tygodniach leczenia lub braku odpowiedzi po 6-8 tygodniach leczenie zostanie wstrzymane, a dodatkowe leczenie będzie zależało od decyzji badacza. W przypadku odpowiedzi częstotliwość leczenia zostanie zmniejszona zgodnie z następującym schematem:

• 2 zabiegi co tydzień od 2 do 12 tygodnia
• 1 zabieg co 2 tygodnie od 13 tygodnia do całkowitego zaprzestania leczenia kortykosteroidami.

Ocena odpowiedzi:

1. Całkowita remisja: ustąpienie wszystkich objawów choroby przeszczep przeciw gospodarzowi
2. Częściowa remisja: poprawa o co najmniej 1 stopień.
3. Brak odpowiedzi

Przewlekła choroba przeszczep przeciwko gospodarzowi: leczenie zostanie rozpoczęte od 3 sesji w tygodniu 1, 2 sesji co 2 tygodnie w tygodniach od 2 do 12. Jeśli nie ma progresji, pierwsza ocena zostanie przeprowadzona po 3 miesiącach (tydzień 12). W przypadku braku odpowiedzi, fotofereza pozaustrojowa zostanie wstrzymana, z wyjątkiem choroby twardzinopodobnej przeszczep przeciwko gospodarzowi, w której ocena zostanie przeprowadzona po 6 miesiącach. W przypadku odpowiedzi w 12. tygodniu: 2 sesje co miesiąc przez dodatkowe 3 miesiące, po zaprzestaniu leczenia kortykosteroidami. Zastosowanie kryteriów odpowiedzi NIH Consensus Group (2006)

Badanie biomarkerów: Próbki: 2 x 10 ml pełnej krwi w etylenodiaminotetraoctanie. zostanie uzyskana w każdej analizie punktu czasowego: fotofereza przedustrojowa oraz w dniach +7, +14, +21, +30 fotofereza pozaustrojowa w ostrej GVHD i fotoferezie przedustrojowej oraz w dniach +15, +30, +45 , +60, +75, +90 pozaustrojowa fotofereza w przewlekłej chorobie przeszczep przeciwko gospodarzowi. Próbki będą przetwarzane w każdym ośrodku uczestnika w celu uzyskania komórek jednojądrzastych zgodnie z załączonym protokołem i przechowywane w stanie zamrożonym do czasu transportu do Centralnego Laboratorium przetwarzania w Hospital Clinico, Walencja, Hiszpania i przesłania informacji klinicznych zawartych w załączonej bazie danych Excel.

1. Analizy populacji T, B i NK, w tym komórek Treg i komórek dendrytycznych, zostaną przeprowadzone za pomocą wewnątrzkomórkowego barwienia cytokin i cytometrii przepływowej (BD i Bioscience).

   Monitorowane populacje komórek i punkt czasowy: fotofereza przedustrojowa oraz w dniach +7, +14, +21, +30 fotofereza pozaustrojowa w ostrej chorobie przeszczep przeciwko gospodarzowi i fotofereza przedustrojowa oraz w dniach +15, +30, +45, +60, +75, +90 pozaustrojowa fotofereza w przewlekłej chorobie przeszczep przeciwko gospodarzowi.

2. Pomiar cytokin w osoczu (interferon-gamma, czynnik martwicy nowotworów-alfa, interleukina-10, czynnik aktywujący limfocyty B i interleukina-6)