Klinická a biomarkerová studie účinnosti mimotělní fotoferézy u onemocnění štěpu proti hostiteli (BIOECP_GVHD)

Název: Průzkumná studie biomarkerů spojených s klinickou odpovědí na mimotělní fotoforézu při léčbě akutního a chronického onemocnění štěpu proti hostiteli po alogenní transplantaci krvetvorných buněk

Cíle:

1. Vyhodnotit klinickou účinnost použití mimotělní fotoforézy při léčbě akutního nebo chronického onemocnění štěpu proti hostiteli za standardních klinických indikací předem definovaných účastnickými centry (Španělská skupina pro transplantace krvetvorby).
2. Prozkoumat a identifikovat biomarkery klinické odpovědi na mimotělní fotoforézu pomocí komplexní analýzy různých imunitních populací včetně T, B a přirozených zabíječských buněk, před a v rámci epizod klinické reakce štěpu proti hostiteli a kinetického profilu plazmy cytokiny (interferon-gama, B buněčný aktivační faktor, tumor nekrotizující faktor-alfa a interleukin-6) ve vztahu k reakci štěpu proti hostiteli.

Metody:

50 pacientů s akutním nebo chronickým onemocněním štěpu proti hostiteli po alogenní transplantaci krvetvorných buněk bez ohledu na zdroj buněk (krev, kostní dřeň nebo pupečníková krev), diagnostikovaných a léčených v jednom z účastnických center uzavřenou mimotělní fotoforézou v podrobných indikacích níže, budou analyzovány za účelem identifikace potenciálních biomarkerů reakce štěpu versus hostitele. Analýzy populací T, B a přirozených zabíječů budou prováděny intracelulárním cytokinovým barvením a průtokovou cytometrií. Měření cytokinů v plazmě bude provedeno pomocí Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay. Účastnická centra:

• Nemocniční klinika. Valencie. Španělsko
• Nemocniční klinika. Salamanca. Španělsko
• Nemocnice Ramon y Cajal. Madrid. Španělsko.
• Nemocnice Murcia. Španělsko
• Hospital de Navarra, Pamplona. Španělsko

Každé centrum získá souhlas se studií místní etickou komisí a pacienti budou zpívat informativní souhlas. Z účasti pacientů v této průzkumné analytické studii se neočekávají žádná rizika.

Frekvence léčby Frekvence léčby bude záviset na typu reakce štěpu proti hostiteli (akutní nebo chronické) a bude upravena v závislosti na klinické odpovědi. Všechny vzorky budou odebrány ve stejnou dobu jako jiné standardní vzorky krve.

Akutní reakce štěpu proti hostiteli: léčba bude zahájena pomocí 3 sezení/týden, 1. týden. Obvykle bude odpověď stanovena za 3-4 týdny. Pokud je jasná progrese po 2 týdnech léčby nebo žádná odpověď po 6-8 týdnech, léčba bude pozastavena a další léčba bude záviset na rozhodnutí zkoušejícího. V případě odpovědi bude frekvence léčby snížena podle následujícího schématu:

• 2 ošetření každý týden od 2. do 12. týdne
• 1 léčba každé 2 týdny od 13. týdne až do úplného potlačení léčby kortikosteroidy.

Hodnocení odpovědi:

1. Kompletní remise: vymizení všech známek reakce štěpu proti hostiteli
2. Částečná remise: zlepšení alespoň o 1 stupeň.
3. Absence odezvy

Chronická reakce štěpu proti hostiteli: léčba bude zahájena pomocí 3 sezení během 1. týdne, 2 sezení každé 2 týdny během 2. až 12. týdne. Pokud nedojde k progresi, první hodnocení bude provedeno za 3 měsíce (12. týden). Pokud nedojde k odpovědi, bude mimotělní fotoforéza pozastavena, s výjimkou onemocnění sklerodermiformního štěpu proti hostiteli, u kterého bude hodnocení provedeno po 6 měsících. Pokud odpověď v týdnu 12: 2 sezení každý měsíc po dobu dalších 3 měsíců, po potlačení léčby kortikosteroidy. Použití kritérií odpovědi NIH Consensus Group (2006)

Studie biomarkerů: Vzorky: 2 x 10 ml plné krve v ethylendiamintetraacetátu. budou získány v každém časovém bodě analýzy: pre-mimotělní fotoforéza a ve dnech +7, +14, +21, +30 po-mimotělní fotoforéza u akutní GVHD a premimotělní fotoforézy a ve dnech +15, +30, +45 , +60, +75, +90 post-mimotělní fotoforéza u chronické reakce štěpu proti hostiteli. Vzorky budou zpracovány v každém účastnickém centru za účelem získání mononukleárních buněk podle přiloženého protokolu a uloženy zmražené až do přepravy do centralizované zpracovatelské laboratoře v Hospital Clinico, Valencia, Španělsko a odeslání klinických informací obsažených v přiložené databázi Excel.

1. Analýzy populací T, B a přirozených zabíječů včetně buněk Treg a dendritických buněk budou provedeny pomocí intracelulárního cytokinového barvení a průtokové cytometrie (BD and Bioscience).

   Populace buněk a časový bod, který je třeba sledovat: pre-mimotělní fotoforéza a ve dnech +7, +14, +21, +30 po-mimotělní fotoforéza u akutní reakce štěpu proti hostiteli a pre-extratělní fotoforézy a ve dnech +15, +30, +45, +60, +75, +90 post-extrakorporální fotoforéza u chronické reakce štěpu proti hostiteli.

2. Měření cytokinů v plazmě (Interferon-gama, Tumor Necrosis Factor-alfa, Interleukin-10, B buněčný aktivační faktor a Interleukin-6)