Étude clinique et biomarqueur de l'efficacité de la photophérèse extracorporelle dans la maladie du greffon contre l'hôte (BIOECP_GVHD)

Titre : Étude exploratoire de biomarqueurs associés à la réponse clinique à la photophérèse extracorporelle dans le traitement de la réaction aiguë et chronique du greffon contre l'hôte après allogreffe de cellules souches hématopoïétiques

Objectifs:

1. Évaluer l'efficacité clinique de l'utilisation de la photophérèse extracorporelle dans le traitement de la réaction aiguë ou chronique du greffon contre l'hôte selon les indications cliniques standard telles que prédéfinies par les centres participants (Groupe espagnol pour la transplantation hématopoïétique).
2. Explorer et identifier les biomarqueurs de la réponse clinique à la photophérèse extracorporelle au moyen d'une analyse complète de différentes populations immunitaires, y compris les cellules T, B et Natural Killer, avant et pendant les épisodes de maladie clinique du greffon contre l'hôte et le profil cinétique du plasma cytokines (interféron-gamma, facteur d'activation des cellules B, facteur de nécrose tumorale alpha et interleukine-6) en relation avec la maladie du greffon contre l'hôte .

Méthodes :

50 patients atteints d'une maladie aiguë ou chronique du greffon contre l'hôte après greffe allogénique de cellules souches hématopoïétiques quelle que soit la source cellulaire (sang, moelle osseuse ou sang de cordon), diagnostiqués et traités dans l'un des centres participants avec photophérèse extracorporelle fermée dans les indications détaillées ci-dessous, seront analysés afin d'identifier les biomarqueurs potentiels de la réponse à la maladie du greffon contre l'hôte. Les analyses des populations T, B et Natural Killer seront effectuées par coloration intracellulaire des cytokines et cytométrie en flux. La mesure des cytokines dans le plasma sera effectuée par dosage immuno-sorbant lié à une enzyme. Centres participants :

• Hospital Clinico. Valence. Espagne
• Hospital Clinico. Salamanque. Espagne
• Hôpital Ramón y Cajal. Madrid. Espagne.
• Hôpital Murcie. Espagne
• Hôpital de Navarre, Pampelune. Espagne

Chaque centre obtiendra l'approbation de l'étude par le comité d'éthique local et les patients signeront leur consentement éclairé. Aucun risque n'est attendu de la participation des patients à cette étude analytique exploratoire.

Fréquence du traitement La fréquence du traitement dépendra du type de réaction du greffon contre l'hôte (aiguë ou chronique) et sera modifiée en fonction de la réponse clinique. Tous les échantillons seront obtenus en même temps que les autres échantillons sanguins standards.

Réaction aiguë du greffon contre l'hôte : le traitement sera initié à raison de 3 séances/semaine, la 1ère semaine. Habituellement, la réponse sera déterminée dans 3-4 semaines. En cas de progression claire après 2 semaines de traitement ou d'absence de réponse après 6 à 8 semaines, le traitement sera suspendu et un traitement supplémentaire dépendra de la décision de l'investigateur. En cas de réponse, la fréquence du traitement sera réduite selon le schéma suivant :

• 2 traitements par semaine de la semaine 2 à la semaine 12
• 1 traitement toutes les 2 semaines à partir de la semaine 13, jusqu'à suppression totale de la corticothérapie.

Évaluation de la réponse :

1. Rémission complète : résolution de tous les signes de maladie du greffon contre l'hôte
2. Rémission partielle : amélioration d'au moins 1 grade.
3. Absence de réponse

Réaction chronique du greffon contre l'hôte : le traitement sera initié en 3 séances pendant la semaine 1, 2 séances toutes les 2 semaines pendant les semaines 2 à 12. S'il n'y a pas de progression, une première évaluation se fera à 3 mois (semaine 12). En l'absence de réponse, la photophérèse extracorporelle sera suspendue, sauf pour la maladie du greffon sclérodermiforme contre l'hôte dans laquelle l'évaluation sera effectuée à 6 mois. Si réponse à la semaine 12 : 2 séances tous les mois pendant 3 mois supplémentaires, après suppression de la corticothérapie. Utilisation des critères de réponse du NIH Consensus Group (2006)

Etude des biomarqueurs : Echantillons : 2 x 10 ml de sang total en éthylènediaminetétraacétate. seront obtenues à chaque analyse ponctuelle : photophérèse pré-extracorporelle et aux jours +7, +14, +21, +30 photophérèse post-extracorporelle dans la GVHD aiguë et photophérèse pré-extracorporelle et aux jours +15, +30, +45 , +60, +75, +90 photophérèse post-extracorporelle dans la maladie chronique du greffon contre l'hôte. Les échantillons seront traités dans chaque centre participant afin d'obtenir des cellules mononucléaires en suivant le protocole ci-joint et conservés congelés jusqu'au transport au laboratoire de traitement centralisé de l'Hospital Clinico, Valence, Espagne et en envoyant les informations cliniques incluses dans la base de données Excel ci-jointe.

1. Les analyses des populations T, B et Natural Killer, y compris les cellules Treg et les cellules dendritiques, seront effectuées par coloration intracellulaire des cytokines et cytométrie en flux (BD et Bioscience).

   Populations cellulaires et temps à surveiller : photophérèse pré-extracorporelle et aux jours +7, +14, +21, +30 photophérèse post-extracorporelle dans la réaction aiguë du greffon contre l'hôte et photophérèse pré-extracorporelle et aux jours +15, +30, +45, +60, +75, +90 photophérèse post-extracorporelle dans la maladie chronique du greffon contre l'hôte.

2. Mesure des cytokines dans le plasma (interféron-gamma, Tumor Necrosis Factor-alfa, interleukine-10, facteur d'activation des cellules B et interleukine-6)