Klinikai és biomarker vizsgálat az extrakorporális fotoferézis hatékonyságáról graft-versus-host betegségben (BIOECP_GVHD)

Cím: Az extrakorporális fotoferézisre adott klinikai válaszhoz kapcsolódó biomarkerek feltáró vizsgálata allogén hematopoietikus őssejt-transzplantáció utáni akut és krónikus graft versus-host betegség kezelésében

Célok:

1. Az extracorporalis fotoferézis klinikai hatékonyságának értékelése akut vagy krónikus graft-versus-host betegség kezelésében a résztvevő központok (Spanish Group for Hematopoietic Transplantation) által előre meghatározott standard klinikai indikációk mellett.
2. Az extrakorporális fotoferézisre adott klinikai válasz biomarkereinek feltárása és azonosítása különböző immunpopulációk, köztük T, B és Natural Killer sejtek átfogó elemzésével, a klinikai graft versus-host betegség epizódjai előtt és azokon belül, valamint a plazma kinetikai profilja citokinek (Interferon-gamma, B-sejt aktiváló faktor, Tumor Necrosis Factor-alfa és Interleukin-6) a graft-versus-host betegséggel kapcsolatban.

Mód:

50 akut vagy krónikus graft-versus-host betegségben szenvedő, allogén hematopoietikus őssejt-transzplantációt követően, függetlenül a sejtforrástól (vér, csontvelő vagy köldökzsinórvér), diagnosztizáltak és kezeltek valamelyik résztvevő központban zárt extracorporalis fotoferézissel a részletezett indikációk szerint. alább elemezzük, hogy azonosítsuk a graft versus gazda betegségre adott lehetséges biomarkereket. A T, B és Natural Killer populációk elemzését intracelluláris citokinfestéssel és áramlási citometriával végezzük. A plazmában a citokin mérését Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay segítségével végzik el. Résztvevő központok:

• Hospital Clinico. Valencia. Spanyolország
• Hospital Clinico. Salamanca. Spanyolország
• Ramon y Cajal kórház. Madrid. Spanyolország.
• Murcia kórház. Spanyolország
• Kórház de Navarra, Pamplona. Spanyolország

Mindegyik központ megszerzi a vizsgálat jóváhagyását a Helyi Etikai Bizottságtól, és a betegek eléneklik a hozzájárulásukat. Nem várható kockázat a betegek részvételével ebben a feltáró analitikai vizsgálatban.

A kezelés gyakorisága A kezelés gyakorisága a graft-versus-host betegség típusától függ (akut vagy krónikus), és a klinikai válasz függvényében módosul. Minden mintát a többi standard vérmintával egy időben veszik.

Akut graft versus host betegség: a kezelést heti 3 kezeléssel kezdik, az 1. héten. A választ általában 3-4 héten belül határozzák meg. Ha egyértelmű progresszió 2 hetes kezelés után vagy nincs válasz 6-8 hét után, a kezelést felfüggesztik, és a további kezelés a vizsgáló döntésétől függ. Ha reagál, a kezelés gyakorisága a következő ütemezés szerint csökken:

• Hetente 2 kezelés a 2. héttől a 12. hétig
• 1 kezelés 2 hetente a 13. héttől a kortikoszteroid kezelés teljes elnyomásáig.

Válasz értékelése:

1. Teljes remisszió: a graft-versus-host betegség minden jelének megszűnése
2. Részleges remisszió: javulás legalább 1 fokozatban.
3. Válasz hiánya

Krónikus graft-versus-host betegség: a kezelést az 1. héten 3 alkalommal, a 2-12. héten 2 hetente 2 kezeléssel kezdik. Ha nincs progresszió, az első értékelésre 3 hónapos korban kerül sor (a 12. hét). Ha nincs válasz, az extrakorporális fotoferézist visszatartják, kivéve a sclerodermiform graft versus host betegséget, amelyben az értékelést 6 hónapos korban végzik el. Ha a válasz a 12. héten: 2 kezelés havonta további 3 hónapig, a kortikoszteroid kezelés elnyomása után. A NIH Consensus Group válaszkritériumainak használata (2006)

Biomarker vizsgálat: Minták: 2 x 10 ml teljes vér etilén-diamin-tetraacetátban. minden időpont-elemzésben megkapjuk: testen kívüli fotoferézis és +7, +14, +21, +30 napokon post-extrakorporális fotoferézis akut GVHD és pre-extrakorporális fotoferézis esetén, valamint +15, +30, +45 napon , +60, +75, +90 post-extrakorporális fotoferézis krónikus graft versus host betegségben. A mintákat minden résztvevő Központban feldolgozzák a mononukleáris sejtek előállítása érdekében a mellékelt protokoll szerint, és lefagyasztva tárolják a Hospital Clinico (Valencia, Spanyolország) Központi Feldolgozó Laboratóriumába történő szállításig, és elküldik a mellékelt Excel adatbázisban szereplő klinikai információkat.

1. A T, B és Natural Killer populációk, beleértve a Treg sejteket és a dendritikus sejteket, elemzését intracelluláris citokinfestéssel és áramlási citometriával (BD és Bioscience) végzik.

   Sejtpopulációk és monitorozandó időpontok: pre-extrakorporális fotoferézis és +7, +14, +21, +30 napon post-extracorporalis fotoferézis akut graft versus host betegségben és pre-extracorporalis fotoferézis és +15 napon, +30, +45, +60, +75, +90 post-extrakorporális fotoferézis krónikus graft versus host betegségben.

2. Citokin mérés a plazmában (Interferon-gamma, Tumor Necrosis Factor-alfa, Interleukin-10, B-sejt aktiváló faktor és Interleukin-6)