Wpływ kurkuminy na rozwój insulinooporności wątroby wywołanej prednizolonem (CURPRED)

CELE BADANIA Celem pracy jest zbadanie, czy przyjmowanie kurkuminy zapobiega wątrobowej oporności na insulinę (ocenianej za pomocą homeostatycznego modelu oceny insulinooporności (HOMA-IR)) wywołanej krótkotrwałym doustnym podawaniem glukokortykoidu (prednizolonu) u osób z nadwagą i otyłością Uczestnicy.

WPROWADZENIE Rosnąca zachorowalność i rozpowszechnienie otyłości i jej chorób współistniejących wymaga badań nad zapobieganiem tym chorobom. Postęp insulinooporności i podwyższonego poziomu cukru we krwi (tj. stan przedcukrzycowy) i ostatecznie uważa się, że cukrzyca typu 2 (T2D) w otyłości jest spowodowana różnymi czynnikami, z których zapalenie o niskim stopniu złośliwości w tkance tłuszczowej i tkance mięśni szkieletowych wydaje się powodować oporność na insulinę, inicjując pogorszenie metabolizmu w kierunku fenotypu cukrzycy typu 2. Wykazano, że kurkumina, związek polifenolowy, który można ekstrahować z korzenia kurkumy, wywiera właściwości przeciwzapalne zarówno w badaniach in vitro, jak i na zwierzętach. Ponadto badania na zwierzętach wskazują, że kurkumina jest modulatorem składu mikroflory jelitowej w korzystnym metabolicznie kierunku. Badania wykazały pozytywne wyniki w zakresie obniżania oporności wątroby na insulinę za pomocą kurkuminy u gryzoni i ludzi (mierzone za pomocą HOMA-IR), a inne badanie kliniczne wykazało, że kurkumina może zapobiegać pogorszeniu HOMA-IR i rozwojowi T2D w populacji ze stanem przedcukrzycowym.

Glikokortykosteroidy to grupa często stosowanych związków, przepisywanych w szerokim zakresie chorób i powodujących poważne metaboliczne skutki uboczne, takie jak oporność na insulinę, T2D i niealkoholowe stłuszczenie wątroby. Co ciekawe, w badaniach na gryzoniach wykazano, że kurkumina, związek fenolowy ekstrahowany z korzenia kurkumy, oraz analogi kurkuminy poprawiają „dysmetabolizm” wywołany przez glukokortykoidy, ale nie ma danych na temat ludzi. Ponadto wyniki zarówno badań in vitro, jak i in vivo z kurkuminą wykazały obiecujące efekty w zapobieganiu rozwojowi NAFLD, ale brakuje solidnych danych dotyczących ludzi. Ze względu na tymczasowy wpływ na metabolizm glukozy, krótkotrwałe leczenie glikokortykosteroidami może służyć jako model badawczy tych zmian metabolicznych. We wcześniejszych badaniach jednostki badawczej przeprowadzającej obecne badanie wykorzystano tę konfigurację do zbadania zmian w homeostazie glukozy, hormonach inkretynowych i oporności na insulinę. Dwa różne badania na myszach wskazują, że kurkumina może być korzystna pod względem zapobiegania zmianom metabolicznym związanym z ogólnoustrojowym leczeniem glikokortykosteroidami, ale żadne badania na ludziach nie badały, czy kurkumina może zapobiegać wzrostowi HOMA-IR wywołanemu przez glukokortykoidy.

Celem badania jest zbadanie wpływu kurkuminy na zmiany metaboliczne wywołane krótkotrwałym układowym prednizolonem w podwójnie ślepej próbie kontrolowanej placebo u osób z nadwagą i otyłością.

PROJEKT BADANIA

Uczestnicy 27 osób z nadwagą i otyłością bez cukrzycy

METODY

W tym randomizowanym, podwójnie zaślepionym, kontrolowanym placebo badaniu, kwalifikujący się uczestnicy zostaną poddani podstawowym ocenom, zanim zostaną losowo przydzieleni do jednej z następujących interwencji: 1) Dwie tabletki kurkuminy (każda tabletka zawiera 100 mg kurkuminy) dwa razy dziennie przez 11 dni i 50 mg prednizolonu raz dziennie przez 10 dni (kapsułka); 2) dwie tabletki placebo-kurkuminy dwa razy dziennie przez 11 dni i 50 mg prednizolonu raz dziennie przez 10 dni (kapsułka); 3) dwie tabletki placebo-kurkuminy dwa razy dziennie przez 11 dni i jedna kapsułka placebo-prednizolonu raz dziennie przez 10 dni. Na koniec 11-dniowego okresu interwencji zostaną przeprowadzone oceny końcowe (podobne do ocen wyjściowych). W razie potrzeby zostanie przeprowadzona wizyta kontrolna.

Spotkanie informacyjne i screening Przed przystąpieniem do jakichkolwiek procedur protokołowych zorganizowane zostanie spotkanie informacyjne, na którym uczestnicy zostaną poinformowani o możliwości przyprowadzenia na wizytę wybranej przez siebie osoby. Spotkanie informacyjne odbywa się w niezakłóconym i poufnym otoczeniu. Sala jest w tym celu zarezerwowana i nikt nie będzie ingerował w przebieg spotkania. Inni pracownicy działu nie mają możliwości zaglądania do pokoju. Podczas tego spotkania członek grupy badawczej wyjaśni cel, procedury i możliwe zagrożenia związane z badaniem. Członek grupy badawczej będzie posiadał odpowiednie kwalifikacje w zakresie wiedzy medycznej, rozeznania w konkretnym projekcie oraz umiejętności komunikacyjne. Na wstępie należy zaznaczyć, że projekt jest badaniem biomedycznym. Następnie na podstawie informacji pisemnej udzielana jest ustna informacja o projekcie. Odpowiedzi na pytania będą możliwie wyczerpujące. Uczestnik zostanie poinformowany, że można mieć minimum 48 godzin na ocenę udziału z ustnych informacji. Jeśli nie chce mieć czasu na ocenę udziału, może uzyskać świadomą zgodę. Jeśli chce mieć czas na ocenę uczestnictwa, zostanie zorganizowane nowe spotkanie w terminie minimum 48 godzin od spotkania informacyjnego. Po uzyskaniu świadomej zgody badanie przesiewowe można przeprowadzić tego samego lub innego dnia, ale maksymalnie cztery tygodnie po uzyskaniu świadomej zgody. Uczestnik zostanie poinformowany o możliwości wycofania pisemnej zgody w dowolnym momencie przed rozpoczęciem badania lub w jego trakcie. W przypadku ujawnienia istotnych informacji o stanie zdrowia uczestnika podczas badania, uczestnik będzie mógł odmówić udostępnienia tych informacji. Informacja o tym wyborze jest potwierdzona w formularzu świadomej zgody.

Jeśli uczestnik chce wiedzieć o wynikach badania i możliwych konsekwencjach dla uczestnika, będzie miał prawo uzyskać te informacje po zakończeniu badania. Podczas badania przesiewowego zostanie zmierzony wzrost i masa ciała, leki i historia choroby zostanie zarejestrowana, zostanie pobrana krew w celu oceny stężeń hormonu tyreotropowego, kreatyniny, kinazy kreatynowej, elektrolitów, aminotransferazy asparaginianowej (ASAT), aminotransferazy alaninowej (ALAT), dehydrogenazy mleczanowej, fosfatazy alkalicznej, albuminy, bilirubiny, zostanie zmierzona gamma-glutamylotransferaza, markery wirusowego zapalenia wątroby, liczba płytek krwi, ferrytyna i hemoglobina oraz stosunek albuminy do kreatyniny w moczu. Zostanie przeprowadzone badanie fizykalne, w tym ocena ciśnienia krwi i częstości tętna. Nawyki alkoholowe zostaną ocenione na podstawie kwestionariusza Testu Identyfikacji Zaburzeń Używania Alkoholu (AUDIT) i kwantyfikacji tygodniowej ilości alkoholu. Zostanie wypełniona lista kontrolna bezpieczeństwa MR i zostanie wręczony arkusz informacyjny MR. Jeśli wszystkie kryteria włączenia i żadne z kryteriów wykluczenia nie są spełnione, terminy oceny wyjściowej i wizyty randomizacyjnej zostaną zaplanowane w ciągu 6 tygodni od wizyty przesiewowej. Uczestnik zostanie poinstruowany, aby nie spożywał codziennie żywności zawierającej kurkuminę od badania przesiewowego do końca badania.

Oceny wyjściowe i wizyta z randomizacją

W przypadku objęcia uczestnika podczas pandemii COVID19, dzień przed wizytą odbywa się telefon z zapytaniem o aktualne objawy infekcji, kontakty z osobami z objawami COVID19 lub osobami z dodatnim wynikiem testu na obecność COVID19.

Osoby objęte badaniem zostaną poddane MRS wątroby (zaplanowane jak najbliżej wizyty randomizacyjnej). Przed rozpoczęciem interwencji zostanie przeprowadzona zarówno wizyta randomizacyjna, jak i MRS. W przypadku MRS uczestnicy są umieszczani w pozycji poziomej. Podczas MRS zostanie oceniona spektroskopia wątroby oraz dokonana zostanie ocena trzewnej tkanki tłuszczowej i podskórnej tkanki tłuszczowej.

W ostatnim tygodniu przed randomizacją pacjent pobierze próbkę kału w celu określenia liczby i podtypu bakterii jelitowych. Próbki kału zostaną pobrane przez uczestnika w domu. Przed wypróżnieniem w toalecie zostanie umieszczony jednorazowy kolektor, z którego kał zostanie przeniesiony do probówki, która natychmiast zostanie przeniesiona do pojemnika transportowego i umieszczona w zamrażarce pacjenta w temperaturze -20°C. Przed transportem do szpitala Gentofte pojemnik transportowy umieszcza się w torbie chłodzącej, a po przybyciu do szpitala Gentofte pojemnik transportowy (wraz z probówką) jest natychmiast przechowywany w temperaturze -80°C do późniejszej analizy. Obejmuje to ekstrakcję DNA, przygotowanie biblioteki, sekwencjonowanie MiSeq 16S rRNA i analizę mikroflory (względna liczebność, różnorodność alfa/beta, związek z interesującym fenotypem).

Na wizycie randomizacyjnej uczestnik spotka się w laboratorium około godziny 8 rano po 10 godzinach postu (w tym wszelkich leków) i powstrzymania się od używania tytoniu lub suplementów nikotynowych. Uczestnik może pić wodę do 8 godzin przed spotkaniem w dziale. Ponadto uczestnik zostanie poproszony o unikanie spożywania dużych ilości alkoholu (powyżej 5 jednostek alkoholu dziennie) i forsownych ćwiczeń na dwa dni przed wizytą oraz poinstruowany o korzystaniu z nieuciążliwych środków transportu do ośrodka badawczego. Przeprowadzone zostaną następujące postępowania:

Jeśli dzień testu przypada na pandemię COVID19, uczestnik jest badany na Sars-Cov2 za pomocą wymazu z jamy ustnej i gardła w celu natychmiastowej analizy PCR.

1. Zostanie pobrana próbka moczu na czczo, a uczestnik zostanie poproszony o całkowite opróżnienie pęcherza moczowego
2. Zostaną pobrane próbki krwi na czczo (markery kostne, surowicze markery rozpadu mięśni, biomarkery NASH i włóknienia, czynniki wzrostu fibroblastów, trójglicerydy, cholesterole, parametry wątroby, HbA1c, markery stanu zapalnego, adipokiny, kreatynina, hemoglobina) w ilości 25 ml.
3. FibroScan: Uczestnik leży w pozycji leżącej przez około 10 minut, podczas których sonda za pomocą fal ścinających i ultradźwięków jest przykładana w prawą stronę ciała pod żebrami.
4. Pomiar ciśnienia krwi, tętna, masy ciała oraz obwodu bioder i pasa.
5. Kwestionariusz dotyczący spożycia kalorii i aktywności fizycznej jest rozdawany dzień przed randomizacją
6. IOP mierzy się za pomocą tonometru icare ic100.
7. Jedna kaniula zostanie wprowadzona do żyły łokciowej w celu pobrania próbek krwi. Przedramię, z którego pobierane są próbki krwi, będzie przez cały czas trwania eksperymentu owinięte kocem grzewczym (42°C) (w celu arterializacji krwi żylnej).
8. Próbki krwi (do analizy aminokwasów ogółem, hormonów jelitowych, glukozy, glukagonu, insuliny, peptydu C, mocznika, WKT) będą mierzone podczas OGTT (patrz Tabela 1).
9. W czasie 0 min uczestnik spożywa 75 g bezwodnej glukozy rozpuszczonej w 300 ml wody w ciągu 5 minut.
10. W czasie 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 i po posiłku ad libitum głód, sytość, sytość i przewidywane spożycie żywności będą mierzone za pomocą VAS
11. W ciągu ostatniej godziny (czas 180 min - 240 min) będzie mierzony REE w pozycji leżącej metodą kalorymetrii pośredniej w celu określenia zużycia tlenu (V02) i produkcji dwutlenku węgla (VC02). Zastosowany zostanie przepływowy analizator gazu z baldachimem, jak opisano wcześniej.
12. W czasie 240 minut pacjent zostanie poproszony o dostarczenie nowej próbki moczu do pomiaru stężenia mocznika. Uczestnik zostanie poproszony o całkowite opróżnienie pęcherza moczowego. Zostanie zmierzona objętość moczu.
13. W czasie ~250 min uczestnik spożywa wystandaryzowany posiłek ad libitum składający się z mięsa mielonego, makaronu, kukurydzy, marchwi, papryki, śmietany, soli i pieprzu (50% energii (E) węglowodanów, 37% tłuszczu, 13% E białko). Uczestnik zostanie poinstruowany, aby jadł jak najwięcej, aż poczuje się komfortowo nasycony. Posiłek powinien zostać spożyty w ciągu maksymalnie 30 minut, a pod koniec posiłku zostanie odnotowany czas spędzony na jedzeniu, waga posiłku oraz całkowita ilość zużytej energii.
14. Na ramieniu uczestnika zostanie założony ciągły glukometr. Czujnik jest zaślepiony, co oznacza, że ​​uczestnik nie widzi skoków poziomu glukozy we krwi podczas 14-dniowego okresu pomiarów.

Na koniec wizyty randomizacyjnej uczestnik zostanie losowo przydzielony do jednej z trzech interwencji (1:1:1):

1. Dwie tabletki kurkuminy (co odpowiada 200 mg) dwa razy dziennie od dnia 1 do dnia 11 i kapsułka prednizolonu 50 mg (doustnie) raz dziennie od dnia 2 do dnia 11
2. Dwie tabletki placebo-kurkuminy dwa razy dziennie od dnia 1 do dnia 11 i kapsułka prednizolonu 50 mg raz dziennie od dnia 2 do dnia 11 lub
3. Dwie tabletki placebo-kurkuminy dwa razy dziennie od dnia 1 do dnia 11 i placebo-prednizolon w kapsułce raz dziennie od dnia 2 do dnia 11 Tabletki z kurkuminą i placebo-kurkuminą będą wyglądać identycznie, a kapsułki z prednizolonem lub placebo-prednizolonem będą wyglądać identycznie identyczny.

Dostawca kurkuminy będzie również produkował tabletki placebo-kurkumina (Indena Aps, Mediolan, Włochy). Apteka Regionu H będzie odpowiedzialna za produkcję i dostawę prednizolonu i placebo-prednizolonu. Niezaślepieni pracownicy ośrodka będą odpowiedzialni za etykietowanie i zaślepianie tabletek kurkuminy i placebo-kurkuminy oraz kapsułek prednizolonu i placebo-prednizolonu przed rozpoczęciem okresu interwencji. Osoba nie zaangażowana w inny sposób w badanie wygeneruje kod randomizacji za pomocą generatora list losowych. Lista randomizacji z numerami randomizacji i odpowiednim leczeniem zostanie sporządzona przez personel ośrodka, który nie został zaślepiony. Lista z numerem randomizacji i odpowiednie pakiety z numerami zostaną sporządzone przez personel ośrodka bez zaślepienia, tak aby personel ośrodka z zaślepieniem przydzielał numer randomizacji tylko w dniu randomizacji. Lista z informacją o numerze randomizacji i odpowiednim leczeniu będzie przechowywana w Centrum Klinicznych Badań Metabolicznych w szpitalu Gentofte. Jeśli u uczestnika wystąpią zdarzenia niepożądane (AE), które wymagają znajomości treści interwencji, lista pokaże, czy pacjent przyjmuje jakiekolwiek składniki aktywne. Jeśli uczestnik zostanie wykluczony z badania przed wizytą kończącą interwencję, nowy uczestnik zostanie włączony do tego samego ramienia leczenia poprzez przejęcie numeru randomizacji.

Okres interwencji Jeśli uczestnik został przebadany pod kątem zakażenia Sars-Cov2 podczas wizyty randomizacyjnej, wynik testu musi być negatywny przed rozpoczęciem interwencji. W przypadku objęcia uczestnika podczas pandemii COVID19, na dzień przed rozpoczęciem interwencji przeprowadzany jest telefon w celu upewnienia się, że przestrzegane są następujące wytyczne: Jeżeli u uczestnika wystąpiły objawy COVID19 w ciągu ostatnich 7 dni przed rozpoczęciem interwencji lub miał bliski kontakt z COVID19-pacjenci, interwencja nie zostanie rozpoczęta.

Interwencja rozpocznie się wkrótce po wyjściowej MRS i wizycie z randomizacją. W okresie interwencji każdy uczestnik wypełni listę mleczarską, aby śledzić wszelkie nowe leki towarzyszące, przestrzeganie zaleceń i możliwe zdarzenia niepożądane. Uczestnik zostanie poproszony o zachowanie nawyków związanych z alkoholem i paleniem, które mógł mieć przed badaniem przesiewowym, a tym samym o niespożywanie więcej niż 21 jednostek alkoholu tygodniowo. Ponadto zostaną poproszeni o spożycie nie więcej niż 5 jednostek w ciągu jednej nocy. Uczestnik zostanie poproszony o utrzymanie poziomu aktywności fizycznej sprzed interwencji w okresie interwencji. Uczestnik zostanie poinformowany, że jeśli poczuje się bardziej głodny niż zwykle, może zjeść więcej. W 5, 6 lub 7 dniu okresu interwencji uczestnik otrzyma telefon od badacza lub innego oddelegowanego personelu ośrodka, aby sprawdzić zdarzenia niepożądane, jednocześnie stosowane leki i zgodność oraz odpowiedzieć na wszelkie pytania uczestnika. Ponadto uczestnicy są poinstruowani, aby w przypadku jakichkolwiek pytań lub nie do zniesienia skutków ubocznych kontaktowali się z badaczem lub innym oddelegowanym personelem ośrodka.

Tabletki i kapsułki najlepiej przyjmować z posiłkiem i popijać małą szklanką wody. Jeśli uczestnik zapomni przyjąć dawkę kurkuminy/placebo kurkuminy, może ją przyjąć do 6 godzin przed kolejną zaplanowaną dawką. W przypadku pominięcia dawki, a następna planowana jest w ciągu 6 godzin, dawkę należy podać, a zdarzenie należy odnotować w dzienniczku. Jeśli uczestnik zapomni przyjąć dawkę prednizolonu/placebo-prednizolonu, może ją przyjąć do 12 godzin przed następną dawką. Jeśli pominięto dawkę, a następna jest zaplanowana w ciągu najbliższych 12 godzin, dawka powinna minąć, a zdarzenie należy odnotować w dzienniczku.

Jeśli uczestnik zostanie włączony podczas pandemii COVID19: Uczestnik jest poinstruowany, aby przestrzegał dystansu społecznego i był świadomy objawów COVID19 oraz wezwał personel obiektu w każdym przypadku wystąpienia objawów podczas okresu interwencji lub jeśli miał bliski kontakt z osobą, która miał pozytywny wynik testu Sars-Cov2 i natychmiast przerwać przyjmowanie interwencji i w tym przypadku poddać się samoizolacji.

Ocena i wizyta na koniec interwencji Wizyta na koniec interwencji zostanie zaplanowana 12 dnia po rozpoczęciu interwencji. W przypadku objęcia uczestnika podczas pandemii COVID19, dzień przed wizytą przeprowadzany jest telefon z zapytaniem o aktualne objawy COVID19, niedawny kontakt z osobami z objawami COVID19 lub osobami z pozytywnym wynikiem testu na obecność COVID19.

Pobieranie próbek kału i MRS zostaną przeprowadzone w okresie wokół wizyty kończącej interwencję i zostaną przeprowadzone w sposób opisany powyżej w punkcie „Oceny wyjściowe i wizyta randomizacyjna”. Procedury podczas wizyty kończącej interwencję są podobne do opisanych powyżej w części „Oceny wyjściowe i wizyta z randomizacją”. Również w tym dniu, aby sprawdzić efekty interwencji kurkuminy, lekarz z zespołu badawczego przeprowadzi badanie fizykalne i pobierze dodatkowe próbki krwi (identyczne z próbkami podczas wizyty przesiewowej, z wyjątkiem markerów wirusowego zapalenia wątroby) ( co dodaje kolejne 5 ml próbek krwi w porównaniu z wizytą randomizacyjną) i zmierzony zostanie stosunek albuminy do kreatyniny w moczu. Czujnik ciągłego monitorowania glukozy jest usuwany z ramienia uczestnika, a dane z czujnika są przesyłane do odpowiedniego oprogramowania. Ponownie kwestionariusz dotyczący spożycia kalorii i aktywności fizycznej jest rozdawany w dniu poprzedzającym dzień zakończenia interwencji. Zgodność zostanie oceniona (jeśli przestrzeganie jest niewystarczające (pominięto więcej niż ¼ planowanych dawek), uczestnik nie przejdzie oceny końcowej). Jeśli uczestnik zostanie włączony podczas pandemii COVID19, zostanie poinstruowany, aby kontynuował dystans społeczny przez trzy dni po zakończeniu wizyty interwencyjnej.

Kontrolna rozmowa telefoniczna i wizyta Między dwoma a czterema dniami po ostatnim dniu leczenia uczestnik otrzyma telefon, podczas którego zostanie zapytany o objawy odstawienne i objawy COVID19. W związku z COVID-19 dodatkowy telefon jest wykonywany w dniach 5-8 po zakończeniu wizyty interwencyjnej.

Jeśli uczestnik odczuwa jakiekolwiek objawy odstawienia (zmęczenie, osłabienie, ból brzucha, anoreksję, nudności lub wymioty) lub miał jakiekolwiek objawy trwającej infekcji po zakończeniu interwencji, tworzony jest plan działania. Oceniając na podstawie badania przedmiotowego, badań krwi, wyników ciągłego monitorowania glikemii, MRS i FibroScan podczas wizyty pod koniec interwencji, zostanie wyznaczona wizyta kontrolna, jeśli – w ocenie badacza – będzie konieczna. Podczas tej wizyty kontrolnej (3-4 tygodnie po zakończeniu interwencji) badacz może wykonać dowolne lub wszystkie z poniższych badań; badanie przedmiotowe, FibroScan, pomiar IOC, standardowe OGTT oraz badania krwi, w zależności od tego, które uznamy za konieczne do zbadania ewentualnych późnych skutków interwencji, aw razie potrzeby kolejna wizyta kontrolna po kolejnych 1-3 miesiącach. Jeśli uczestnik miał stłuszczenie w obu MRS, otrzyma skierowanie do Oddziału Gastroenterologii w celu dalszej oceny i leczenia.

BIOBANK Biobank badawczy zostanie utworzony w Centrum Klinicznych Badań Metabolicznych w szpitalu Gentofte, DK-2900 Hellerup, Dania, na czas eksperymentów w celu przechowywania badań krwi do czasu analizy. Wszyscy uczestnicy otrzymują numer próbny i na kartach danych i probówkach będą pojawiać się tylko z numerem próbnym. Imię i nazwisko, numer ubezpieczenia społecznego i numer próbny będą przechowywane oddzielnie. Po zakończeniu projektu biobank zostanie zlikwidowany. Nadmiar osocza będzie przechowywany w innym biobanku do 10 lat po zakończeniu badania, na wypadek konieczności powtórnych analiz lub konieczności dalszych analiz. W tym drugim przypadku wymagana jest nowa zgoda Regionalnej Komisji ds. Etyki Badań Zdrowotnych. Biobanki zostaną zarejestrowane w Datatilsynet.

OBLICZENIA I STATYSTYKI Dane będą przetwarzane i prezentowane z wykorzystaniem standardowych statystyk opisowych. Powierzchnie pod krzywymi (AUC) oblicza się stosując regułę trapezów. Porównanie danych o rozkładzie normalnym przeprowadza się za pomocą analizy wariancji z powtarzanymi pomiarami przy użyciu liniowego modelowania mieszanego z „indywidualnym” czynnikiem losowym. Do analizy danych o rozkładzie innym niż normalny zostanie wykorzystany test Freidmana. Wartości p ≤0,05 są akceptowane jako statystycznie istotne (poziom istotności, α = 5%). Moc badania (1-β) przyjęto na poziomie 80%, gdzie β (20%) to ryzyko przyjęcia hipotezy, która jest fałszywa.

Obliczanie mocy: Hansen i in. zbadali grupę zdrowych osób leczonych prednizolonem i stwierdzili wzrost HOMA-IR o 1,6 (1,3 ± 0,1 vs. 2,9 ± 0,3). Różnica to 1,6±SD, ale wartości tego SD niestety nie posiadamy. Najlepiej zgadnąć, że wynosi (maksymalnie) 0,5. Przypuszcza się, że grupa interwencyjna otrzymująca dwa różne rodzaje placebo jest porównywalna z wartościami wyjściowymi w badaniu KB Hansens, zarówno przed, jak i po interwencji, ponieważ oczekuje się, że placebo nie zmieni HOMA-IR. Postawiono hipotezę, że grupa leczona prednizolonem jest porównywalna z kohortą KB Hansens po leczeniu prednizolonem. Życzeniem jest osiągnięcie zmniejszenia wzrostu HOMA-IR o 50% podczas przyjmowania kurkuminy, co daje minimalną istotną różnicę wynoszącą 0,8.

Wartości P ≤ 0,05 są akceptowane jako statystycznie istotne (α = 5%), a moc jest ustawiona na 80%. Daje to wielkość próby 7 w każdej z trzech grup leczenia. . Na tej podstawie włączymy 9 do każdej z trzech grup terapeutycznych, ponieważ możemy mieć nieco większą zmienność w HOMA-IR w naszej populacji w porównaniu z uczestnikami KH Hansena. W przypadku rezygnacji, będziemy uwzględniać nowych uczestników, dopóki w każdej grupie nie będzie 12 osób, które ukończyły.

Ciągłe monitorowanie poziomu glukozy zapewni dane przez maksymalnie 14 dni z pomiarami poziomu glukozy w częstych odstępach czasu przez 24 godziny na dobę. CGM będzie rejestrować przez co najmniej 24 godziny przed rozpoczęciem interwencji prednizolonem. Zapisy CGM uznaje się za udane, jeśli co najmniej 80% danych z czujnika jest dostępnych do analizy. Przed analizą wszystkie dane zostaną sprawdzone pod kątem tłumienia czujnika wywołanego ciśnieniem. Na podstawie tych danych zostaną wykonane następujące obliczenia: 1) Ryzyko hipoglikemii i hiperglikemii zostanie obliczone jako niski wskaźnik glukozy we krwi (LBGI) i wysoki wskaźnik glukozy we krwi (HBGI) przy użyciu skoroszytu EasyGV (www.phc.ox .ac.uk/research/technology-outputs/easygv) 2) współczynnik zmienności (SD/średni poziom glukozy śródtkankowej), 3) SD, 4) procent czasu w zakresie normoglikemii (3,9-7,8 mmol/l ), 5) procent czasu w trzech zakresach hiperglikemii (7,9-10 mmol/l, 10,1-13,9 mmol/l, >13,9 mmol/l) oraz 6) odsetek czasu trwania hipoglikemii (<3,9 mmol/l).

DZIAŁANIA NIEPOŻĄDANE, RYZYKA I NIEKORZYŚCI DLA UCZESTNIKÓW Kurkumina jest związkiem polifenolowym ekstrahowanym z korzenia kurkumy o bardzo niskiej biodostępności. Wysokie dawki Merivy® były dobrze tolerowane w badaniach na ludziach. Jednak większość badań przeprowadzono z niesformułowaną tradycyjną kurkuminą o niższej biodostępności. Niemniej jednak wysokie dawki niespreparowanej kurkuminy nie były związane z poważnymi skutkami ubocznymi i są ogólnie bardzo dobrze tolerowane w badaniach klinicznych. Panahi i wsp. przeprowadzili badanie z udziałem pacjentów z NAFLD, w którym około 50 pacjentów otrzymywało Meriva® 1000 mg dziennie przez 8 tygodni (co odpowiada 200 mg kurkuminy). Nie było doniesień o skutkach ubocznych, ale 7 wycofało się z powodu postrzegania braku efektów. Antiga i in. glin. przeprowadzili badanie z Meriva® w dawce 2000 mg dziennie przez 12 tygodni, tylko u jednego uczestnika wystąpiło jedno zdarzenie niepożądane (biegunka), ale prawdopodobnie nie spowodowane przez Merivę® z powodu innych oznak genezy wirusa67. Mazzolani przeprowadził badanie z udziałem 12 pacjentów otrzymujących 1200 mg Merivy® dziennie przez 1 rok bez doniesień o zdarzeniach niepożądanych. Di Pierro i in. przeprowadził badanie na uczestnikach z nadwagą, z dużą dawką fosfatydyloseryny (produkt bardzo podobny do Meriva®) i nie zgłosił żadnych skutków ubocznych.

Działania niepożądane prednizolonu są bardzo dobrze opisane i najczęściej są to przyrost masy ciała, nieprawidłowości skórne, wzrost poziomu glukozy w surowicy, insulinooporność, obrzęki, zaburzenia elektrolitowe, miopatia, osteoporoza, infekcje, złagodzenie objawów infekcji, nieprawidłowości hematologiczne, choroby psychiczne, zmiany nastroju , zaburzenia snu, hiperlipidemia, nadciśnienie i niewydolność serca. Ale jeśli uczestnicy doświadczą działań niepożądanych, jest mało prawdopodobne, aby nasiliły się one podczas leczenia tylko 50 mg na dobę przez 10 dni, ponieważ są one zależne od dawki i czasu oraz przy zastosowaniu odpowiednich kryteriów włączenia i wyłączenia. Ponadto wszystkie są uważane za w pełni odwracalne po zakończeniu interwencji.

Efekt uboczny leczenia doustnymi kortykosteroidami (np. prednizolon) powoduje podwyższone ciśnienie wewnątrzgałkowe, które w rzadkich przypadkach może powodować stan zagrażający wzrokowi, jaskrę. W większości przypadków podwyższone ciśnienie wewnątrzgałkowe przebiega bezobjawowo, dlatego ważne jest, aby mierzyć je u pacjenta. IOP można łatwo i łatwo zmierzyć za pomocą tonometru icare ic100. Urządzenie opiera się na zasadzie pomiaru odbicia, która nie wymaga upadków, powietrza ani specjalistycznych umiejętności do jego użycia, a zatem nie wiąże się z żadnym ryzykiem ani komplikacjami. IOP mierzy się 3 razy w każdym oku i oblicza średnią. Jeśli jest podwyższony, pacjent zostanie zbadany przez okulistę.

Podczas i zaraz po leczeniu prednizolonem uczestnicy są bardziej podatni na infekcje i prawdopodobnie mają mniej objawów infekcji. W trakcie badania uczestnicy będą kilkakrotnie pytani o samopoczucie i objawy infekcji.

Jeśli uczestnik zostanie włączony w czasie pandemii COVID19, w badaniu stosuje się kilka dodatkowych ograniczeń i ocen, ze względu na możliwe zwiększone ryzyko ciężkiego przebiegu COVID19 w przypadku leczenia prednizolonem. Stosuje się to tylko w celu zachowania nadzwyczajnych środków ostrożności. Informacje na temat tych ograniczeń i ocen znajdują się w odpowiednich częściach niniejszego protokołu. Uczestnicy są dokładnie instruowani o odpowiednich zmianach w dokumentach informacyjnych dla uczestników przed selekcją.

Objawy odstawienne (po leczeniu prednizolonem) to najczęściej zmęczenie, osłabienie, bóle brzucha, jadłowstręt, nudności lub wymioty. Ze względu na krótki czas leczenia i stosunkowo niską dawkę, wystąpienie tych objawów jest bardzo mało prawdopodobne, ale uczestnicy zostaną zapytani o te objawy podczas rozmowy telefonicznej dwa do czterech dni po ostatnim dniu leczenia.

MRS jest bezpieczny i nie wiąże się z dyskomfortem ani bólem. Skaner będzie hałasował podczas skanowania, ale uczestnik będzie nosił odpowiednią ochronę słuchu. Niektórzy uczestnicy mogą odczuwać klaustrofobię podczas skanowania. Jeśli uczestnik ma stłuszczenie w obu MRS, zostanie mu zaproponowane skierowanie do Oddziału Gastroenterologii.

Nakłucia skóry (nakłucie krwi i wprowadzenie cewnika dożylnego oraz wprowadzenie czujnika do ciągłego monitorowania glikemii) wiążą się z niewielkim dyskomfortem i ryzykiem powstania krwiaków. Teoretycznym powikłaniem penetracji skóry jest zapalenie żył powierzchownych. Stan nie jest niebezpieczny i będzie leczony antybiotykami, jeśli pojawią się jakiekolwiek oznaki infekcji. Ryzyko zapalenia żył powierzchownych jest niewielkie i zminimalizowane dzięki przestrzeganiu standardów klinicznych dotyczących wprowadzania cewników wewnątrznaczyniowych, w tym dwukrotnemu przetarciu zakażonej skóry alkoholem dezynfekującym i innym sterylnym procedurom.

Całkowita utrata krwi wyniesie około 365 ml rozłożona na minimum 2 tygodnie, co nie jest w żaden sposób szkodliwe dla uczestnika. W badaniu mogą brać udział tylko uczestnicy z hemoglobiną >7,5 mmol/l, a po badaniu wszystkim uczestnikom proponuje się leczenie żelazem.

INTEGROŚĆ FIZYCZNA I PSYCHICZNA ORAZ PRYWATNOŚĆ UCZESTNIKÓW Informacje dotyczące uczestników projektu będą chronione zgodnie z obowiązującym prawem Danii, w tym prawem dotyczącym przetwarzania danych osobowych. Będziemy dążyć do zatwierdzenia protokołu przez duńską „Datatilsynet” za pośrednictwem Regionu Stołecznego Danii. Proces będzie przebiegał zgodnie z zasadami zawartymi w Ogólnym rozporządzeniu o ochronie danych Unii Europejskiej.

Protokół jest zgodny z Deklaracją Helsińską (7 wersja 2013).

KOSZTY OPERACYJNE I EKONOMIKA Projekt nie jest obecnie wspierany przez żadne firmy medyczne, a lekarz odpowiedzialny za projekt nie ma powiązań ekonomicznych z prywatnymi firmami, fundacjami itp. zainteresowanymi projektem badawczym. Gdy finansowanie projektu zostanie przyznane, zostaną o tym powiadomione komisje ds. etyki badań naukowych.

DOSTĘPNOŚĆ DANYCH DLA UCZESTNIKÓW Wszyscy uczestnicy mają zagwarantowany dostęp do większej ilości informacji o projekcie. Kontakt: Dr Pernille Høgh Hellmann, MD, Centrum Klinicznych Badań Metabolicznych, Szpital Gentofte, DK-2900 Hellerup; e-mail: pernille.hoegh.hellmann@regionh.dk; Telefon: +45 20911792.

ODROCZENIE BADANIA Każdy uczestnik może zostać wycofany z badania w dowolnym momencie, jeśli badacz uzna, że ​​kontynuacja badania jest dla niego niebezpieczna. Ponadto uczestnik może zostać wycofany, jeśli spełnia którekolwiek z kryteriów wykluczenia, jeśli przestrzeganie jest niewystarczające (jeśli uczestnik pominął więcej niż ¼ zaplanowanych dawek, kontrolowanych podczas rozmowy telefonicznej w 5, 6 lub 7 dniu okresu interwencji oraz w wizyty końcowej) ocenianej przez badacza lub w przypadku wystąpienia wyjątkowych okoliczności uniemożliwiających ukończenie badania. Podobnie każde nadzwyczajne zdarzenie, które uniemożliwi dokończenie projektu, spowoduje przerwanie trwających eksperymentów. We wszystkich przypadkach uczestnik zostanie poinformowany o decyzji i jej przyczynie. Uczestnik może w dowolnym momencie trwania badania dobrowolnie zrezygnować z uczestnictwa. W przypadku rezygnacji, będziemy uwzględniać nowych uczestników, dopóki w każdej grupie nie będzie 12 osób, które ukończyły.

GRUPA BADAWCZA dr n. med. Pernille Høgh Hellmann, dr n. med. Jonatan Ising Bagger, dr n. med. Katrine Bagge Hansen, prof. dr n. med. Tina Vilsbøll, prof. dr n. med. Filip Krag Knop

REKRUTACJA UCZESTNIKÓW Rekrutacja uczestników odbywa się za pomocą następujących metod: 1) Ogłoszenie w gazetach lub gazetach lokalnych lub na stronie www.forsøgsperson.dk. 2) Reklama poprzez ulotki i plakaty. 3) Uczestnikom, którzy w przeszłości odbywali studia na Wydziale i wyrazili zgodę na ponowny kontakt w sprawie udziału w nowych studiach na Wydziale.

Uczestnicy, którzy odpowiedzieli na ogłoszenia, otrzymają pisemną informację pocztą elektroniczną lub pocztą tradycyjną, w zależności od preferencji. Wszyscy uczestnicy otrzymają również ulotkę „Forsøgspersonens retigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt” od Komisji Etycznej w Danii, sierpień 2014.

Po co najmniej dwóch dniach z uczestnikiem skontaktujemy się telefonicznie i zapytamy, czy chce wziąć udział w badaniu. Jeśli uczestnik ma jakieś pytania, udzieli na nie wyczerpujących odpowiedzi. W przypadku zainteresowania uczestnika zostanie ustalony termin i miejsce wizyty informacyjnej. W trakcie rozmowy telefonicznej uczestnik jest informowany o możliwości towarzyszenia wybranej przez siebie osobie na wszystkich wizytach w okresie próbnym.