Effekten av curcumin på utviklingen av prednisolonindusert leverinsulinresistens (CURPRED)

MÅL MED STUDIEN Målet med denne studien er å undersøke om inntak av curcumin vil forhindre leverinsulinresistens (vurdert ved homeostatisk modellvurdering av insulinresistens (HOMA-IR)) indusert av kortvarig oral glukokortikoid (prednisolon) administrering hos overvektige og overvektige deltakere.

BAKGRUNN Den økende forekomsten og prevalensen av fedme og dens komorbiditeter krever forskning for å forebygge disse sykdommene. Progresjonen til insulinresistens og økte blodsukkernivåer (dvs. prediabetes) og til slutt type 2-diabetes (T2D) i fedme antas å være forårsaket av ulike faktorer hvor lavgradig betennelse i fettvev og skjelettmuskelvev ser ut til å påføre insulinresistens som starter metabolsk forverring mot type 2-diabetisk fenotype. Curcumin, en polyfenolisk forbindelse som kan utvinnes fra gurkemeieroten, har vist seg å ha antiinflammatoriske egenskaper i både in vitro- og dyrestudier. Videre indikerer dyrestudier at curcumin er en modulator av tarmmikrobiotasammensetning i en metabolsk gunstig retning. Studier har vist positive resultater når det gjelder å senke leverinsulinresistens med curcumin hos gnagere og mennesker (målt med HOMA-IR), og en annen klinisk studie har vist at curcumin kan forhindre forverring av HOMA-IR og utvikling av T2D i en prediabetisk populasjon.

Glukokortikoider er en gruppe ofte brukte forbindelser, foreskrevet for en lang rekke sykdommer og har alvorlige metabolske bivirkninger som insulinresistens, T2D og alkoholfri fettleversykdom. Interessant nok har curcumin, en fenolisk forbindelse ekstrahert fra gurkemeieroten, og curcuminanaloger vist seg å forbedre glukokortikoid-indusert "dysmetabolisme" i gnagerstudier, men ingen menneskelige data eksisterer. Også resultater fra både in vitro og in vivo studier med curcumin har vist lovende effekter for å forhindre utvikling av NAFLD, men solide menneskelige data mangler. På grunn av de midlertidige effektene på glukosemetabolismen, kan korttidsbehandling med glukokortikoider brukes som en undersøkende modell av disse metabolske endringene. Tidligere studier fra forskningsenheten som utførte den nåværende studien, brukte dette oppsettet til å undersøke endringer i glukosehomeostase, inkretinhormoner og insulinresistens. To forskjellige musestudier indikerer at curcumin kan være gunstig når det gjelder å forhindre metabolske forandringer forbundet med systemisk glukokortikoidbehandling, men ingen menneskelige studier har undersøkt om curcumin kan forhindre glukokortikoid-indusert økning i HOMA-IR.

Målet med studien er å undersøke effekten av curcumin av metabolske endringer forårsaket av kortvarig systemisk prednisolon i en dobbeltblindet, placebokontrollert studie hos overvektige og overvektige individer.

STUDERE DESIGN

Deltakerne 27 overvektige og overvektige personer uten diabetes

METODER

I denne randomiserte, dobbeltblindede, placebokontrollerte studien vil kvalifiserte deltakere gjennomgå baseline-vurderinger før de blir randomisert til en av følgende intervensjoner: 1) To tabletter curcumin (hver tablett inneholder 100 mg curcumin) to ganger daglig på 11 dager og 50 mg prednisolon én gang daglig i 10 dager (kapsel); 2) to tabletter placebo-curcumin to ganger daglig på 11 dager og 50 mg prednisolon én gang daglig på 10 dager (kapsel); 3) to tabletter placebo-curcumin to ganger daglig på 11 dager og en kapsel med placebo-prednisolon én gang daglig i løpet av 10 dager. I slutten av den 11-dagers intervensjonsperioden, vil slutt-på-intervensjonsvurderinger (i likhet med baseline-vurderinger) bli utført. Ved behov vil det bli gjennomført et oppfølgingsbesøk.

Informasjonsmøte og screening I forkant av eventuelle protokollrelaterte prosedyrer vil det bli arrangert et informasjonsmøte, og deltakerne vil bli informert om muligheten for å ta med en selvvalgt person på besøket. Informasjonsmøtet gjennomføres i uforstyrrede og konfidensielle omgivelser. Rommet er reservert for dette formålet, og ingen vil blande seg inn under møtet. Det er ikke mulig for andre ansatte i avdelingen å se inn i lokalet. I løpet av dette møtet vil et medlem av forskningsgruppen forklare formålet, prosedyrene og mulige risikoer ved studien. Medlemmet av forskergruppen vil ha riktige kvalifikasjoner når det gjelder medisinsk kunnskap, innsikt i det konkrete prosjektet og kommunikasjonsevner. Det vises for det første til at prosjektet er et biomedisinsk forsøk. Etter dette gis en muntlig informasjon om prosjektet basert på den skriftlige informasjonen. Spørsmål vil bli besvart så grundig som mulig. Deltakeren vil bli informert om at det er mulig å ha minimum 48 timer til å vurdere deltakelse ut fra muntlig informasjon som gis. Dersom han ikke ønsker tid til å evaluere deltakelsen, kan det informerte samtykke innhentes. Dersom han ønsker tid til å vurdere deltakelse, vil det bli avtalt nytt møte med minimum 48 timer fra informasjonsmøtet. Når informert samtykke er innhentet, kan screening gjøres, enten samme dag eller en annen dag, men med maksimalt fire uker etter innhenting av informert samtykke. Deltakeren vil bli informert om at det er mulig å trekke tilbake det skriftlige samtykket når som helst før eller under studien. I tilfelle det blir funnet vesentlig informasjon om deltakernes helse under forsøket, vil deltakeren kunne avslå å ha denne informasjonen. Informasjon om dette valget bekreftes i skjemaet for informert samtykke.

Dersom deltakeren ønsker å vite om resultatene av forsøket og mulige konsekvenser for deltakeren, vil han ha rett til å få denne informasjonen etter endt studie Ved screening vil høyde og kroppsvekt bli målt, medisinering og sykehistorie. vil bli registrert, blodprøver tas for vurdering av plasma/serumkonsentrasjoner av thyreoideastimulerende hormon, kreatinin, kreatinkinase, elektrolytter, aspartataminotransferase (ASAT), alaninaminotransferase (ALAT), laktatdehydrogenase, alkalisk fosfatase, albumin, bilirubin, gamma-glutamyltransferase, virale hepatittmarkører, antall blodplater, ferritin og hemoglobin, og albumin-kreatinin-forhold i urinen vil bli målt. En fysisk undersøkelse vil bli foretatt inkludert evaluering av blodtrykk og puls. Alkoholvaner vil bli evaluert basert på spørreskjemaet The Alcohol Use Disorder Identification Test (AUDIT) og kvantifisering av den ukentlige mengden alkohol. En MR-sikkerhetssjekkliste vil bli utfylt, og et MR-informasjonsark vil bli gitt. Hvis alle inklusjonskriteriene og ingen av eksklusjonskriteriene er oppfylt, vil datoer for baselinevurderinger og randomiseringsbesøk planlegges innen 6 uker fra screeningbesøket. Deltakeren vil bli instruert om ikke å innta curcuminholdig mat på daglig basis fra screening til utprøving.

Baselinevurderinger og randomiseringsbesøk

Hvis deltakeren er inkludert under COVID19-pandemien, ringes det dagen før besøket for å spørre om nylige symptomer på infeksjon, kontakter til personer med COVID19-symptomer eller personer med positiv test for COVID19.

Inkluderte individer vil gjennomgå en MRS av leveren (planlagt så nært randomiseringsbesøket som mulig). Før intervensjonsstart vil det bli utført både randomiseringsbesøk og MRS. For MRS plasseres deltakerne i horisontal posisjon. Under MRS vil en spektroskopi av leveren bli vurdert, og en estimering av visceralt fettvev og subkutant fettvev vil bli gjort.

I løpet av den siste uken før randomisering vil forsøkspersonen samle en avføringsprøve for å bestemme antall tarmbakterier og undertype. Avføringsprøver vil bli samlet inn av deltakeren hjemme. Før avføring vil en engangsoppsamler plasseres i toalettet hvorfra avføring overføres til en tube som umiddelbart overføres til en transportbeholder og plasseres ved -20°C i pasientens fryser. Før transport til Gentofte sykehus overføres transportbeholderen til kjølebagen og ved ankomst til Gentofte sykehus oppbevares transportbeholderen (med prøverøret) umiddelbart ved -80°C for senere analyse. Dette innebærer DNA-ekstraksjon, bibliotekpreperasjon, MiSeq 16S rRNA-sekvensering og mikrobiotaanalyse (relativ overflod, alfa/beta-diversitet, kobling til fenotype av interesse).

På randomiseringsbesøket vil deltakeren møte i laboratoriet rundt kl. 08.00 etter 10 timers faste (inkludert eventuelle medisiner) og avstå fra bruk av tobakk eller nikotintilskudd. Deltakeren får drikke vann inntil 8 timer før møte på avdeling. Videre vil deltakeren bli bedt om å unngå tungt alkoholinntak (mer enn 5 enheter alkohol per dag) og anstrengende trening to dager før besøket og instruert om å bruke ikke-anstrengende transportmetoder til forskningsanlegget. Følgende prosedyrer vil bli utført:

Hvis testdagen er under COVID19-pandemi, testes deltakeren for Sars-Cov2 med en vattpinneprosedyre i orofarynx, for umiddelbar PCR-analyse.

1. En fastende urinprøve vil bli tatt, og deltakeren blir bedt om å tømme urinblæren helt
2. Fastende blodprøver vil bli samlet inn (beinmarkører, serummarkører for muskelnedbrytning, biomarkører for NASH og fibrose, fibroblastvekstfaktorer, triglyserider, kolesteroler, leverparametere, HbA1c, inflammatoriske markører, adipokiner, kreatinin, hemoglobin) på 25 ml.
3. FibroScan: Deltakeren vil ligge i liggende stilling i ca. 10 minutter, hvor en sonde ved hjelp av skjærbølger og ultralyd påføres på høyre side av kroppen under ribbeina.
4. Måling av blodtrykk, hjertefrekvens, kroppsvekt og hofte- og midjeomkrets.
5. Det deles ut et spørreskjema om kaloriinntak og fysisk aktivitet dagen før randomisering
6. IOP måles med icare ic100 tonometer.
7. En kanyle vil bli satt inn i cubitalvenen for innsamling av blodprøver. Underarmen som blodprøver tas fra vil bli pakket inn i et varmeteppe (42°C) gjennom hele forsøket (for arterialisering av venøst ​​blod).
8. Blodprøver (for analyse av totale aminosyrer, tarmhormoner, glukose, glukagon, insulin, C-peptid, urea, FFA) vil bli målt gjennom OGTT (se tabell 1).
9. Ved tidspunkt 0 min vil deltakeren innta 75 g vannfri glukose oppløst i 300 ml vann over en periode på 5 minutter.
10. Ved tidspunkt 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 og etter ad libitum-måltidet vil sult, metthet, metthet og potensielt matforbruk bli målt med VAS-er
11. I løpet av den siste timen (tid 180 min - 240 min) vil REE bli målt i ryggleie ved indirekte kalorimetri for å bestemme oksygenforbruk (V02) og karbondioksidproduksjon (VC02). En gassanalysator for gjennomstrømning av baldakin vil bli brukt, som tidligere beskrevet.
12. Ved tidspunkt 240 min vil forsøkspersonen bli bedt om å gi en ny urinprøve for måling av ureakonsentrasjon. Deltakeren vil bli bedt om å tømme urinblæren helt. Urinvolum vil bli målt.
13. Ved tid ~250 min vil deltakeren innta et standardisert ad libitum måltid bestående av kjøttdeig, pasta, mais, gulrøtter, paprika, fløte, salt og pepper (50 energi (E)% karbohydrat, 37 E% fett, 13 E% protein). Deltakeren vil bli bedt om å spise så mye som mulig til han føler seg komfortabel mett. Måltidet bør inntas innen maksimalt 30 minutter, og ved slutten av måltidet vil tidsbruken til spising, vekten på måltidet og den totale mengden energi som forbrukes bli notert.
14. En kontinuerlig glukosemonitor vil bli brukt på overarmen til deltakeren. Sensoren er blindet, noe som betyr at deltakeren ikke kan se sine blodsukkerekskursjoner i løpet av den 14 dager lange måleperioden.

På slutten av randomiseringsbesøket vil deltakeren bli tilfeldig tildelt en av tre intervensjoner (1:1:1):

1. To tabletter curcumin (tilsvarende 200 mg) to ganger daglig fra dag 1 til dag 11 og prednisolonkapsel 50 mg (oral) en gang daglig fra dag 2 til dag 11
2. To tabletter placebo-curcumin to ganger daglig fra dag 1 til dag 11 og prednisolonkapsel 50 mg én gang daglig fra dag 2 til dag 11, eller
3. To tabletter med placebo-curcumin to ganger daglig fra dag 1 til dag 11 og placebo-prednisolon kapsel én gang daglig fra dag 2 til dag 11 Tablettene med curcumin og placebo-curcumin vil se identiske ut, og kapslene med prednisolon eller placebo-prednisolon vil vises identisk.

Leverandøren av curcumin vil også produsere placebo-curcumin-tabletter (Indena Aps, Milano, Italia). Apoteket i Region H vil være ansvarlig for produksjon og levering av prednisolon og placebo-prednisolon. Ublindet personale vil være ansvarlig for merking og blinding av curcumin og placebo-curcumin tabletter og prednisolon og placebo-prednisolon kapsler før begynnelsen av intervensjonsperioden. En person som ikke ellers er involvert i studien vil generere en randomiseringskode ved hjelp av en tilfeldig listegenerator. En randomiseringsliste med randomiseringstall og tilsvarende behandling vil bli laget av den ublindede anleggspersonalet. En liste med randomiseringsnummer og tilsvarende pakker med tall vil bli laget av ublindede anleggspersonale, slik at blindet anleggspersonale kun tildeler et randomiseringsnummer på randomiseringsdagen. Listen med informasjon om randomiseringsnummer og tilsvarende behandling vil oppbevares ved Senter for klinisk stoffskifteforskning ved Gentofte sykehus. Dersom en deltaker utvikler uønskede hendelser (AE) som krever kunnskap om innholdet i intervensjonen, vil listen vise om pasienten har noen aktive ingredienser. Hvis en deltaker ekskluderes fra forsøket før avsluttet intervensjonsbesøk, vil et nytt forsøksperson bli inkludert i samme behandlingsarm ved å overta randomiseringsnummeret.

Intervensjonsperioden Dersom deltakeren ble testet for Sars-Cov2-infeksjon ved randomiseringsbesøk, må denne testen være negativ før intervensjon starter. Dersom deltakeren er inkludert under COVID19-pandemien, ringes det dagen før intervensjonsstart for å sikre at følgende retningslinjer følges: Dersom deltakeren har opplevd symptomer på COVID19 i løpet av de siste syv dagene før intervensjonsstart eller hatt nær kontakt med COVID19-pasienter, intervensjon vil ikke bli startet.

Intervensjon vil starte like etter baseline MRS og randomiseringsbesøk. I løpet av intervensjonsperioden vil hver deltaker fylle ut et meieri for å holde oversikt over eventuelle nye samtidige medisiner, etterlevelse og mulige bivirkninger. Deltakeren vil bli bedt om å beholde alkohol- og røykevanene de kunne ha hatt før screening, og dermed ikke innta mer enn 21 enheter alkohol per uke. Videre vil de bli bedt om å konsumere ikke mer enn 5 enheter på en natt. Deltakeren vil bli bedt om å opprettholde nivået av fysisk aktivitet fra før intervensjon i intervensjonsperioden. Deltakeren får beskjed om at dersom han føler seg mer sulten enn vanlig, får han spise ekstra. På dag 5, 6 eller 7 i intervensjonsperioden vil deltakeren motta en telefon fra etterforskeren eller annet delegert stedsansatte, som sjekker AE, samtidig medisinering og etterlevelse, og for å svare på eventuelle spørsmål fra deltakeren. Videre instrueres deltakerne om å kontakte etterforsker eller annet delegert stedsansatte i tilfelle spørsmål eller uutholdelige bivirkninger.

Tablettene og kapslene inntas fortrinnsvis sammen med et måltid og et lite glass vann. Skulle deltakeren glemme å ta en dose curcumin/placebo curcumin, kan den inntas inntil 6 timer før neste planlagte dose. Hvis en dosering uteblir, og neste er planlagt innen 6 timer, bør doseringen passeres, og hendelsen må noteres i dagboken. Skulle deltakeren glemme å ta en dose prednisolon/placebo-prednisolon, kan den inntas inntil 12 timer før neste dose. Hvis en dosering uteblir, og den neste er planlagt innen de neste 12 timene, bør doseringen medføres, og hendelsen må noteres i dagboken.

Dersom deltakeren er inkludert under COVID19-pandemien: Deltakeren instrueres om å forholde seg til sosial distansering og å være oppmerksom på COVID19-symptomer, og tilkalle personalet ved eventuelle symptomer i intervensjonsperioden eller hvis han har hatt nær kontakt med en person som hadde en positiv Sars-Cov2-test, og å umiddelbart stoppe inntak av intervensjon og selvisolere i dette tilfellet.

Avslutningsvurderinger og besøk Sluttbesøket vil planlegges dag 12 etter start av intervensjon. Hvis deltakeren er inkludert under COVID19-pandemien, ringes det dagen før besøket for å spørre om nylige symptomer på COVID19, nylige kontakter med personer med COVID19-symptomer eller personer med positiv test for COVID19.

Avføringsprøvetaking og MRS vil bli utført i perioden rundt avsluttet intervensjonsbesøk, og vil bli utført som beskrevet ovenfor under "grunnlinjevurderinger og randomiseringsbesøk". Prosedyrene under avsluttet intervensjonsbesøk er lik de som er beskrevet ovenfor under "Utgangsvurderinger og randomiseringsbesøk". I løpet av denne dagen, for å se etter effekten av curcumin-intervensjon, vil fysisk undersøkelse bli utført av en lege fra forskningsteamet og ytterligere blodprøver (identiske med prøvene ved screeningbesøket, bortsett fra virale hepatittmarkører) vil bli samlet inn ( som tilfører ytterligere 5 ml blodprøver sammenlignet med randomiseringsbesøk) og albumin-kreatininforhold i urinen vil bli målt. Den kontinuerlige glukosemonitorsensoren fjernes fra overarmen til deltakeren, og dataene fra sensoren overføres til et passende program. Igjen deles spørreskjemaet ut om kaloriinntak og fysisk aktivitet dagen før Slutt-tiltaksdagen. Samsvaret vil bli evaluert (hvis etterlevelsen er utilstrekkelig (glipp av mer enn ¼ av de planlagte dosene), vil ikke deltakeren gå gjennom sluttvurderinger). Hvis deltakeren er inkludert under COVID19-pandemien, blir han bedt om å fortsette sosial distansering i tre dager etter avsluttet intervensjonsbesøk.

Oppfølgingstelefon og besøk Mellom to og fire dager etter siste behandlingsdag vil deltakeren motta en telefon, hvor deltakeren blir spurt om abstinenssymptomer og symptomer på COVID19. På grunn av COVID19 blir det tatt en ekstra telefon på dag 5-8 etter avsluttet intervensjonsbesøk.

Hvis deltakeren føler noen form for abstinenssymptomer (tretthet, svakhet, magesmerter, anoreksi, kvalme eller oppkast), eller har hatt symptomer på en pågående infeksjon etter avsluttet intervensjon, lages en handlingsplan. Bedømt ut fra den fysiske undersøkelsen, blodprøver, resultater fra kontinuerlig glukosemåling, MRS og FibroScan ved sluttbesøk, vil det bli arrangert et oppfølgingsbesøk, dersom det - vurdert av utreder - er nødvendig. Ved dette oppfølgingsbesøket (3-4 uker etter avsluttet intervensjon) kan utrederen gjøre noen av eller alle de følgende testene; fysisk undersøkelse, FibroScan, måling av IOC, standard OGTT og blodprøver, alt etter hva som vurderes å være nødvendig for å se på eventuelle seneffekter av intervensjonen, og om nødvendig et nytt oppfølgingsbesøk etter ytterligere 1-3 måneder. Dersom deltakeren hadde steatose på begge MRS, vil deltakeren bli tilbudt en henvisning til Gastroenterologisk avdeling for videre utredning og behandling.

BIOBANK En forskningsbiobank vil bli etablert ved Center for Clinical Metabolic Research ved Gentofte Hospital, DK-2900 Hellerup, Danmark, under forsøkene for å lagre blodprøvene frem til analyser. Alle deltakere får tildelt prøvenummer og vil på datablad og rør kun vises med prøvenummer. Fullt navn, personnummer og prøvenummer vil bli lagret separat. Etter at prosjektet er fullført vil biobanken bli avsluttet. Overskuddsplasma vil bli lagret i annen biobank i inntil 10 år etter avsluttet studie, ved behov for re-analyser eller behov for ytterligere analyser. I sistnevnte tilfelle kreves det ny godkjenning fra Regional helseforskningsetisk komité. Biobankene vil bli registrert hos Datatilsynet.

BEREGNINGER OG STATISTIKK Data vil bli behandlet og presentert ved bruk av standard beskrivende statistikk. Arealer under kurvene (AUCs) beregnes ved bruk av trapesregelen. Sammenligning av normalfordelte data utføres ved hjelp av gjentatte målinger variansanalyse ved bruk av lineær blandet modellering med «individ» som tilfeldig faktor. Freidmans test vil bli brukt til analyse av ikke-normalfordelte data. P-verdier ≤0,05 er akseptert som statistisk signifikante (signifikansnivå, α = 5%). Studiens styrke (1-β) er satt til 80 %, der β (20 %) er risikoen for å akseptere en hypotese som er falsk.

Effektberegning: Hansen et al. studerte en prednisolonbehandlet gruppe av friske individer, og fant en økning i HOMA-IR på 1,6 (1,3±0,1 vs. 2,9±0,3). Forskjellen er 1,6±SD, men verdien på denne SD har vi dessverre ikke. Beste gjetning er at det er (maksimalt) 0,5. Det antas at intervensjonsgruppen som får to forskjellige typer placebo er sammenlignbare med baseline-verdiene i KB Hansens studie, både før og etter intervensjon, da placebo forventet ikke vil endre HOMA-IR. Og det antas at den prednisolonbehandlede gruppen er sammenlignbar med KB Hansens kohort etter behandling med prednisolon. Ønsket er å oppnå en reduksjon i økningen i HOMA-IR på 50 % ved inntak av curcumin, noe som gir en minimal relevant forskjell på 0,8.

P-verdier ≤ 0,05 aksepteres som statistisk signifikante (α = 5%) og effekten er satt til 80%. Dette resulterer i en prøvestørrelse på 7 i hver av de tre behandlingsgruppene. . Basert på dette vil vi inkludere 9 i hver av de tre behandlingsgruppene, da vi kan ha litt større varians i HOMA-IR i vår populasjon sammenlignet med KH Hansens deltakere. Ved frafall vil vi inkludere nye deltakere inntil vi har 12 fullførere i hver gruppe.

Den kontinuerlige glukoseovervåkingen vil gi data i opptil 14 dager med glukosemål med hyppige intervaller 24 timer i døgnet. CGM vil ta opp i minst 24 timer før intervensjon med prednisolon starter. CGM-opptak anses som vellykket hvis minst 80 % av sensordataene er tilgjengelige for analyse. Før analyse vil alle data bli gjennomgått for trykkinduserte sensordempninger. Fra disse dataene vil følgende beregninger bli gjort: 1) Risikoen for hypoglykemi og hyperglykemi vil bli beregnet som lav blodsukkerindeks (LBGI) og høy blodsukkerindeks (HBGI) ved hjelp av EasyGV-arbeidsboken (www.phc.ox) .ac.uk/research/technology-outputs/easygv) 2) variasjonskoeffisient (SD/gjennomsnittlig interstitielt glukosenivå), 3) SD, 4) prosentandel av tiden i normoglykemisk område (3,9-7,8 mmol/l) ), 5) prosentandel av tiden i tre hyperglykemiske områder (7,9-10 mmol/l, 10,1-13,9 mmol/l, >13,9 mmol/l) og 6) prosentandel av tiden ved hypoglykemi (<3,9 mmol/l).

BIVIRKNINGER, RISIKO OG ULEMPER FOR DELTAKERE Curcumin er en polyfenolisk forbindelse ekstrahert fra gurkemeieroten med svært lav biotilgjengelighet. Høye doser Meriva® har blitt godt tolerert i forsøk på mennesker. Imidlertid er de fleste studier utført med ikke-formulert tradisjonell curcumin med lavere biotilgjengelighet. Høye doser av ikke-formulert curcumin har likevel ikke vært assosiert med alvorlige bivirkninger, og tolereres generelt godt i kliniske studier. Panahi et al gjorde en studie med NAFLD-pasienter, med ~50 pasienter som fikk Meriva® 1000 mg daglig i 8 uker (tilsvarende 200 mg curcumin). Det var ingen rapporter om bivirkninger, men 7 trakk seg på grunn av oppfatningen om manglende effekter. Antiga et. al. gjorde en studie med Meriva® 2000 mg daglig i 12 uker, med bare én deltaker som hadde én bivirkning (diaré), men antagelig ikke forårsaket av Meriva® på grunn av andre tegn på viral genese67. Mazzolani utførte en studie med 12 pasienter som fikk 1200 mg Meriva® per dag i 1 år uten rapporter om bivirkninger. Di Pierro et al. gjorde en studie på overvektige deltakere, med en høy dose fosfatidylserin (et produkt som ligner veldig på Meriva®) uten rapporter om bivirkninger.

Bivirkninger av prednisolon er svært godt beskrevet, og oftest er vektøkning, hudavvik, økte serumglukosenivåer, insulinresistens, ødem, elektrolyttforstyrrelser, myopati, osteoporose, infeksjoner, reduserte symptomer på infeksjoner, hematologiske abnormiteter, psykiatriske sykdommer, humørsvingninger , søvnforstyrrelser, hyperlipidemi, hypertensjon og hjertesvikt. Men hvis deltakerne vil oppleve bivirkninger, er det lite sannsynlig at de blir alvorlige, når de kun behandles med 50 mg daglig i 10 dager, da de er dose- og tidsavhengige, og med relevante inklusjons- og eksklusjonskriterier. Videre anses de alle som fullt reversible etter avsluttet intervensjon.

En bivirkning fra behandling med orale kortikosteroider (f. Prednisolon) er forhøyet IOP som i sjeldne tilfeller kan forårsake den synstruende tilstanden glaukom. I de fleste tilfeller er forhøyet IOP asymptomatisk, og derfor er det viktig å måle hos pasienten. IOP kan enkelt og enkelt måles med et icare ic100 tonometer. Enheten er basert på et rebound-måleprinsipp som ikke krever dråper, luft eller spesialiserte ferdigheter for bruk, og derfor ikke er forbundet med noen risiko eller komplikasjoner. IOP måles 3 ganger i hvert øye og gjennomsnittet beregnes. Hvis dette er forhøyet vil pasienten bli sett av en øyelege.

Under og rett etter prednisolonbehandling er deltakerne mer utsatt for infeksjoner og har sannsynligvis færre symptomer på infeksjoner. Deltakerne vil bli spurt om deres velvære og symptomer på infeksjon flere ganger i løpet av forsøket.

Dersom deltakeren inkluderes under COVID19-pandemien, er det lagt på flere ekstra restriksjoner og vurderinger i studien, på grunn av mulig økt risiko for et alvorlig forløp av COVID19 ved prednisolonbehandling. Dette brukes kun for å ta ekstraordinære forholdsregler. Informasjon om disse restriksjonene og vurderingene finnes i de relevante delene av denne protokollen. Deltakerne blir grundig instruert i relevante endringer i deltakerinformasjonsdokumentene før screening.

Abstinenssymptomer (etter prednisolonbehandling) er oftest tretthet, svakhet, magesmerter, anoreksi, kvalme eller oppkast. På grunn av kort behandlingsperiode og relativt lav dose er det svært lite sannsynlig at disse symptomene vil oppstå, men deltakerne vil bli spurt om disse symptomene på telefon to til fire dager etter siste behandlingsdag.

MRS er trygt og ikke kombinert med ubehag eller smerte. Skanneren vil lage høy lyd under skanning, men deltakeren vil bruke skikkelig hørselvern. Noen deltakere kan oppleve klaustrofobi under skanningen. Dersom deltakeren har steatose på begge MRS, vil han bli tilbudt en henvisning til Gastroenterologisk avdeling.

Penetrasjoner av hud (blodpunktur og intravenøs kateterinnsetting og innsetting av sensor for kontinuerlig glukoseovervåking) er assosiert med mildt ubehag og risiko for hematomer. En teoretisk komplikasjon til hudpenetrering er overfladisk flebitt. Tilstanden er ikke farlig og vil bli behandlet med antibiotika dersom det skulle være tegn på infeksjon. Risikoen for overfladisk flebitt er liten og minimeres ved å følge kliniske standarder for innsetting av intravaskulære katetre, inkludert dobbelttørking av den involverte huden med desinfiserende alkohol og andre sterile prosedyrer.

Det totale blodtapet vil utgjøre ca. 365 ml fordelt over minimum 2 uker, noe som ikke på noen måte er skadelig for deltakeren. Kun deltakere med hemoglobin >7,5 mmol/l kan delta, og alle deltakere tilbys jernbehandling etter forsøket.

DELTAKERS FYSISK OG MENTAL INTEGRITET OG PERSONVERN Informasjon om deltakere i prosjektet vil bli beskyttet i samsvar med gjeldende lover i Danmark, inkludert loven om behandling av personopplysninger. Vi vil søke godkjenning av protokollen av det danske "Datatilsynet" via Region Hovedstaden i Danmark. Rettssaken vil følge reglene i EUs generelle databeskyttelsesforordning.

Protokollen er i samsvar med Helsingfors-erklæringen (syvende revisjon 2013).

DRIFTSKOSTNADER OG ØKONOMI Prosjektet er foreløpig ikke støttet av noen medisinske selskaper og ansvarlig lege for prosjektet har ingen økonomisk tilknytning til private selskaper, stiftelser eller lignende med interesser i forskningsprosjektet. Når finansiering av prosjektet er på plass vil forskningsetiske komiteer bli varslet.

TILGJENGELIGHET AV DATA FOR DELTAKERE Alle deltakere er garantert tilgang til mer informasjon om prosjektet. Kontakt: Dr. Pernille Høgh Hellmann, MD, Senter for klinisk metabolsk forskning, Gentofte sykehus, DK-2900 Hellerup; e-post: pernille.hoegh.hellmann@regionh.dk; Telefon: +45 20911792.

UTSETTING AV PRØVING Enhver deltaker kan trekkes fra rettssaken når som helst, i tilfelle etterforskeren finner det utrygt for deltakeren å fortsette. Deltakeren kan også trekkes tilbake hvis deltakeren oppfyller noen av eksklusjonskriteriene, hvis etterlevelsen er utilstrekkelig (hvis deltakeren har gått glipp av mer enn ¼ av planlagte doser, kontrollert ved telefonsamtale på dag 5, 6 eller 7 i intervensjonsperioden og kl. slutten av intervensjonsbesøket) evaluert av etterforsker, eller i tilfelle eksepsjonelle omstendigheter gjør det umulig å fullføre studien. På samme måte vil enhver ekstraordinær hendelse som gjør det umulig å fullføre prosjektet resultere i avslutning av pågående eksperimenter. I alle tilfeller vil deltakeren bli informert om vedtaket og begrunnelsen. Deltakeren kan, når som helst under prøven, frivillig avbryte deltakelsen. Ved frafall vil vi inkludere nye deltakere inntil vi har 12 fullførere i hver gruppe.

FORSKNINGSGRUPPEN Pernille Høgh Hellmann MD, Jonatan Ising Bagger PhD MD, Katrine Bagge Hansen PhD MD, Professor Tina Vilsbøll DMSc MD, Professor Filip Krag Knop PhD, MD

REKRUTTERING AV DELTAKER Deltakerne rekrutteres gjennom følgende metoder: 1) Annonsering i aviser eller lokalaviser eller på www.forsøgsperson.dk. 2) Annonse gjennom flyers og plakater. 3) Deltakere som tidligere har deltatt i studier ved avdelingen og gitt samtykke til at de ønsker å bli kontaktet på nytt ved deltagelse i nye studier ved avdelingen.

Deltakere som har svart på annonser vil motta skriftlig informasjon på e-post eller vanlig post, det som foretrekkes. Alle deltakere vil også motta brosjyren "Forsøgspersonens rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt" fra Den etiske komité i Danmark, august 2014.

Etter minst to dager vil deltakeren bli kontaktet på telefon og spurt om han ønsker å delta i studien. Dersom deltakeren har spørsmål vil disse bli besvart så utfyllende som mulig. Dersom deltakeren er interessert i å delta, vil tid og sted for informasjonsbesøket bli avtalt. Under telefonsamtalen blir deltakeren informert om muligheten for å bli ledsaget av en selvvalgt person til alle besøkene under utprøvingen.