mtDNA como novo biomarcador para infecção intra-amniótica (mtDNA)

Antecedentes: Infecção intra-amniótica (IAI) ou corioamnionite é uma condição comum observada em obstetrícia levando a anormalidades do trabalho de parto, como atonia uterina, sangramento pós-parto e trabalho de parto prematuro (Schrag et al., 2006). Outros efeitos adversos, como morte perinatal, asfixia, sepse, pneumonia, dificuldade respiratória e especialmente atraso no neurodesenvolvimento e paralisia cerebral, estão associados à IIA (Buhimschi et al., 2009; Holzman, Lin, Senagore e Chung, 2007). O diagnóstico de IAI pode ser desafiador devido aos seus sinais clínicos muito heterogêneos, que muitas vezes são muito insensíveis para essa condição. Achados clínicos como febre, taquicardia e leucocitose materna abrem espaço para múltiplos diagnósticos diferenciais. Durante a apoptose (devido à hipóxia, dano celular ou infecção), a integridade da membrana celular é perturbada, liberando o citoplasma na circulação sanguínea. O DNA mitocondrial livre de células circulantes atua como um padrão molecular associado ao dano (DAMP), ativando o sistema imunológico inato, levando à inflamação (Matzinger, 1994). Esses DAMPs são conservados evolutivamente e possuem similaridade estrutural com seu ancestral bacteriano (Zhang et al., 2010). Portanto, as mitocôndrias livres de células podem atuar como um agente potente desencadeando o sistema imunológico de maneira autoimune, bem como um biomarcador para danos celulares devido à infecção.

Objetivo: Encontrar um biomarcador preditivo para IAI pode melhorar o resultado clínico para a mãe e o recém-nascido. O objetivo deste estudo é quantificar o número de cópias de DNA mitocondrial livre de células circulantes no soro materno e na placenta em comparação com controles. Os investigadores levantam a hipótese de que os níveis circulantes de DNA mitocondrial livre de células podem ajudar a prever a probabilidade de inflamação precoce na IAI. Além disso, o DNA mitocondrial pode ser um promotor desencadeando a patogênese da inflamação sistêmica.

Métodos: Para este estudo, os investigadores planejaram 2 grupos cada um com 30 pacientes. O grupo controle são gestantes sem IAI. O grupo de intervenção será composto por mulheres com ruptura prematura de membranas (pProm), portadoras de IAI (atendendo aos critérios diagnósticos para IAI sugeridos pelo National Institute of Child Health and Human Development Workshop). Serão colhidos 12ml de sangue venoso de uma linha venosa periférica, além dos exames de sangue de rotina, quando a paciente chegar à enfermaria (2 semanas antes do parto). Mais 12ml de sangue venoso serão retirados da linha venosa periférica, durante o parto (durante o parto). Além disso, 12ml de sangue venoso serão retirados da placenta pós-parto. No total, serão colhidos 36 ml de sangue de cada paciente. O DNA mitocondrial livre de células circulante será quantificado no soro materno e placentário por PCR quantitativo em tempo real e a análise estatística será realizada por testes não paramétricos.

Desenho: Estudo piloto observacional, prospectivo, de centro único.