mtDNA jako nowy biomarker zakażenia wewnątrzowodniowego (mtDNA)

Tło: Infekcja wewnątrzowodniowa (IAI) lub zapalenie błon płodowych jest częstym stanem obserwowanym w położnictwie, prowadzącym do nieprawidłowości porodu, takich jak atonia macicy, krwawienie poporodowe i poród przedwczesny (Schrag i in., 2006). Dalsze działania niepożądane, takie jak śmierć okołoporodowa, uduszenie, posocznica, zapalenie płuc, niewydolność oddechowa, a zwłaszcza opóźnienie rozwoju neurologicznego i porażenie mózgowe, są związane z IAI (Buhimschi i in., 2009; Holzman, Lin, Senagore i Chung, 2007). Diagnozowanie IAI może być trudne ze względu na bardzo niejednorodne objawy kliniczne, które często są bardzo niewrażliwe na ten stan. Objawy kliniczne, takie jak gorączka, tachykardia i leukocytoza matki, pozostawiają miejsce na wiele różnicowych rozpoznań. Podczas apoptozy (na skutek niedotlenienia, uszkodzenia komórki lub infekcji) zostaje naruszona integralność błony komórkowej, uwalniając cytoplazmę do krwioobiegu. Krążący bezkomórkowy mitochondrialny DNA działa jako wzorzec molekularny związany z uszkodzeniem (DAMP) poprzez aktywację wrodzonego układu odpornościowego prowadzącego do stanu zapalnego (Matzinger, 1994). Te DAMP są konserwowane ewolucyjnie i mają strukturalne podobieństwo do ich bakteryjnego przodka (Zhang i in., 2010). Dlatego mitochondria bezkomórkowe mogą działać jako silny czynnik wyzwalający układ odpornościowy w sposób autoimmunologiczny, a także biomarker uszkodzenia komórek w wyniku infekcji.

Cel: Znalezienie predykcyjnego biomarkera dla IAI mogłoby poprawić wyniki kliniczne dla matki i noworodka. Celem tego badania jest ilościowe określenie liczby kopii krążącego bezkomórkowego mitochondrialnego DNA w surowicy matki i łożysku w porównaniu z grupą kontrolną. Badacze wysuwają hipotezę, że poziomy krążącego mitochondrialnego DNA bez komórek mogą pomóc przewidzieć prawdopodobieństwo wczesnego zapalenia w IAI. Ponadto mitochondrialne DNA może być promotorem wyzwalającym patogenezę zapalenia ogólnoustrojowego.

Metody: Do tego badania badacze zaplanowali 2 grupy po 30 pacjentów każda. Grupę kontrolną stanowiły ciężarne bez IAI. Grupą interwencyjną będą kobiety z przedwczesnym pęknięciem błon płodowych (pProm), chorujące na IAI (spełniające kryteria diagnostyczne IAI sugerowane przez Pracownię Narodowego Instytutu Zdrowia Dziecka i Rozwoju Człowieka). 12 ml krwi żylnej zostanie pobrane z cewnika obwodowego oprócz rutynowych badań krwi, gdy pacjentka trafi na oddział (2 tygodnie przed porodem). Kolejne 12 ml krwi żylnej zostanie pobrane z obwodowej linii żylnej podczas porodu (podczas porodu). Ponadto z łożyska po porodzie zostanie pobrane 12 ml krwi żylnej. Łącznie od każdego pacjenta zostanie pobrane 36 ml krwi. Krążące bezkomórkowe mitochondrialne DNA zostanie oznaczone ilościowo w surowicy matki i łożyska za pomocą ilościowego PCR w czasie rzeczywistym, a analiza statystyczna zostanie przeprowadzona za pomocą testów nieparametrycznych.

Projekt: Jednoośrodkowe, prospektywne, obserwacyjne badanie pilotażowe.