Fase 1 Novo estudo de vacina oral viva atenuada de sorotipo 2 contra a poliomielite em adultos preparados com vacina inativada contra a poliomielite (IPV) (nOPV2M4a)

Experimental: Novela OPV2 Candidato 1

Os participantes receberam uma vacinação com o novo candidato OPV2 1 no dia 0 do estudo, administrado por via oral em seis gotas (0,3 mL no total; aproximadamente 10⁶ 50% de unidades de dose infecciosa de cultura de células [CCID50]).

Biológico: Novo candidato OPV2 1

Poliovírus vivo atenuado do sorotipo 2 derivado de um clone de cDNA infeccioso Sabin tipo 2 modificado e propagado em células Vero; candidato 1 (S2/cre5/S15domV/rec1/hifi3).

As modificações incluíram o seguinte:

• Alterações na sequência de nucleotídeos virais em parte da região 5' não traduzida para melhorar a estabilidade genética deste principal determinante atenuante de Sabin tipo-2 para evitar a reversão por alterações de um único nucleotídeo.
• Duas modificações na polimerase 3D para melhorar ainda mais a estabilidade da atenuação e reduzir a frequência de eventos de recombinação
• Realocação de um elemento chave de replicação da região de codificação 2C para a região 5' não traduzida, para inibir a recombinação.

Experimental: Novela OPV2 Candidato 2

Os participantes receberam uma vacinação com o novo candidato OPV2 2 no dia 0 do estudo, administrado por via oral na forma de seis gotas (0,3 mL no total; aproximadamente 10⁶ CCID50).

Biológico: Novo candidato OPV2 2

Poliovírus vivo atenuado do sorotipo 2 derivado de um clone de cDNA infeccioso Sabin tipo 2 modificado e propagado em células Vero; candidato 2 (S2/S15domV/CpG40).

As modificações incluíram o seguinte:

• Alterações na sequência de nucleotídeos virais em parte da região 5' não traduzida para melhorar a estabilidade genética deste principal determinante atenuante de Sabin tipo-2 para evitar a reversão por alterações de um único nucleotídeo.
• modificações não codificantes silenciosas projetadas dentro do capsídeo (VP1-4) projetadas para reduzir a aptidão replicativa e, potencialmente, melhorar a estabilidade do fenótipo atenuado ao mesmo tempo em que reduz a transmissão.

Número de participantes com eventos adversos graves e eventos adversos graves ao longo do estudo

Eventos adversos graves são eventos médicos que resultaram em morte, ameaçaram a vida, exigiram internação hospitalar ou resultaram em incapacidade notável do indivíduo. Os eventos adversos também foram classificados de leves a graves; Eventos adversos graves são eventos médicos que impedem as atividades diárias normais ou febre > 39°C; esta categoria não inclui eventos adversos graves.

Eventos adversos graves e eventos adversos graves incluem eventos solicitados e não solicitados. Os eventos solicitados consistiam em sinais e sintomas relatados pelo participante por meio de uma lista de verificação predefinida em um cartão diário, ou febre, conforme determinado pela medição da temperatura corporal do participante, por até 7 dias após a vacinação. Os eventos não solicitados compreenderam outros sinais e sintomas registrados até o final do estudo.

Os eventos adversos foram avaliados pelo investigador quanto à causalidade como não relacionados, improváveis, possivelmente ou provavelmente relacionados à vacinação.

Porcentagem de participantes com eliminação viral

Os participantes forneceram amostras de fezes para avaliação da eliminação viral, definida como a presença de ácido ribonucléico (RNA) específico do poliovírus tipo 2 nas fezes. As amostras foram analisadas pelos Centros de Controle e Prevenção de Doenças dos EUA (CDC; Atlanta, GA, EUA) para a presença do genoma do poliovírus tipo 2 usando um ensaio Sabin multiplex em tempo real da reação em cadeia da polimerase da transcriptase reversa (RT-PCR) total ácido nucleico extraído de suspensões de fezes (50% peso/volume em meio de cultura celular).

Dose infecciosa de cultura celular de vírus eliminado em amostras de fezes positivas para vírus

Em amostras de fezes positivas para poliovírus tipo 2 detectado por RT-PCR, o vírus infeccioso foi medido como 50% da dose infecciosa de cultura de células (CCID₅₀) por grama de fezes usando uma modificação da sensibilidade celular da Organização Mundial da Saúde (OMS). ensaio.

Tempo para derramar cessação

O tempo até a cessação da excreção foi definido como o intervalo de tempo entre a administração da vacina e a data da primeira amostra negativa para excreção do poliovírus tipo 2 (avaliada por RT-PCR), após a qual as duas amostras consecutivas seguintes também foram negativas.

O tempo até a cessação da excreção viral foi avaliado usando métodos de Kaplan-Meier; os participantes foram censurados à direita se não tivessem atingido esse ponto final com a última amostra de fezes coletada.

Índice de Derramamento

Um índice combinado de prevalência, duração e quantidade de excreção viral em todos os participantes.

O índice de eliminação viral foi calculado para cada participante como a média de log₁₀(CCID₅₀/g) das amostras coletadas 7, 14, 21 e 28 dias após a administração da vacina, com o limite inferior de quantificação (2,75 log₁₀) como valor observado, e todos os títulos em amostras de fezes com resultados de excreção negativos (valores negativos de RT-PCR em tempo real) contribuindo com 0 para a média.

Número de participantes com eventos adversos solicitados

Os eventos adversos foram solicitados aos participantes pela equipe médica durante os 7 dias após a vacinação. Os eventos solicitados compreendiam sinais e sintomas relatados com uma lista de verificação predefinida em um cartão diário, incluindo cefaléia, fadiga, mialgia, artralgia, parestesia, anestesia, paralisia, náusea, vômito, diarreia e dor abdominal ou febre definida como temperatura de 37,5 ºC ou superior.

Os eventos adversos foram classificados como leves (facilmente tolerados), moderados (suficientemente desconfortáveis ​​para interferir nas atividades diárias normais) ou graves (impedindo as atividades diárias normais ou temperaturas superiores a 39,0°C).

Os eventos adversos foram avaliados pelo investigador quanto à causalidade como não relacionados, improváveis, possivelmente ou provavelmente relacionados à vacinação.

Número de participantes com eventos adversos não solicitados

Eventos não solicitados compreendiam outros sinais e sintomas que os participantes relataram até o final do estudo. Cada EA não solicitado foi classificado em uma escala de 3 pontos de intensidade crescente:

• Grau 1: Leve; um EA facilmente tolerado pelo sujeito, causando desconforto mínimo e não interferindo nas atividades cotidianas.
• Grau 2: Moderado; um EA suficientemente desconfortável para interferir nas atividades cotidianas normais.
• Grau 3: Grave; um EA que impediu as atividades diárias normais.

Cada evento adverso foi avaliado pelo investigador quanto à causalidade como não relacionado, improvável, possivelmente ou provavelmente relacionado à vacinação.

Número de participantes com desvios clinicamente relevantes das avaliações laboratoriais normais

Os valores dos testes laboratoriais clínicos foram avaliados de acordo com o Common Terminology Criteria for Adverse Events (CTCAE) versão 4.03 (graus de toxicidade) ou de acordo com os intervalos normais do laboratório clínico (abaixo, dentro ou acima do intervalo normal) para parâmetros para os quais nenhuma toxicidade graus foram definidos.

As avaliações químicas clínicas incluíram bilirrubina total, glicose, nitrogênio ureico no sangue (BUN), creatinina, cálcio, fosfato inorgânico, potássio, sódio, alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase e proteína C reativa (PCR). As avaliações hematológicas incluíram hemoglobina, hematócrito, glóbulos vermelhos e glóbulos brancos com diferencial.

Títulos de anticorpos neutralizantes antipoliovírus tipo 2

Os anticorpos neutralizantes contra o poliovírus tipo 2 foram determinados usando o ensaio de microneutralização padrão da OMS (OMS EPI GEN 93.9).

Taxa de soroproteção

A taxa de soroproteção foi definida como a porcentagem de participantes em cada grupo com títulos de anticorpos neutralizantes anti-poliovírus específicos do tipo 2 ≥ 1:8.

Taxa de soroconversão

A taxa de soroconversão é definida como a porcentagem de participantes em cada grupo com uma mudança de soronegativo para soropositivo (títulos de anticorpos neutralizantes específicos do poliovírus tipo 2 ≥ 1:8) ou, em participantes soropositivos na linha de base, um aumento no título de anticorpos neutralizantes de pelo menos pelo menos quatro vezes a partir da linha de base.

Neurovirulência avaliada pela porcentagem média de paralisia em camundongos inoculados

A neurovirulência do vírus eliminado foi medida usando um teste modificado de neurovirulência de camundongo transgênico receptor de poliovírus da OMS (mTgmNVT). A última amostra de fezes fornecida por cada participante que tinha concentrações adequadas de vírus para o ensaio de neurovirulência (≥ 4 log₁₀[CCID₅₀/g]) foi usada no teste. Para cada amostra de fezes, trinta camundongos Tg-PVR21 foram administrados com inoculações intraespinais de 4 log₁₀(CCID₅₀) vírus amplificado. Após 14 dias, os camundongos inoculados foram avaliados como paralisados ​​ou não paralisados. Para cada participante/amostra, foi calculada a porcentagem de camundongos paralisados. A porcentagem geral de paralisia é a porcentagem média de camundongos paralisados ​​sobre todos os participantes em cada grupo.