Teste de triagem de manchas de sangue seco para pacientes com colestase neonatal (DBS-SCReNC)

Mira:

1. Desenvolveu um teste de triagem para colestase neonatal usando mancha de sangue seco
2. Melhorar a sobrevida do paciente por meio do diagnóstico precoce da doença colestase neonatal tratável, como atresia biliar e erro inato do metabolismo dos ácidos biliares.

Fase I - Validação de método para quantificação de marcadores de doenças em gota de sangue seco.

Crianças pediátricas com diagnóstico de colestase no National Taiwan University Hospital durante a internação ou ambulatório serão coletadas para o estudo de Fase I. 5ml de sangue venoso serão coletados para medição de marcadores de doença durante o acompanhamento de rotina no ambulatório do National Taiwan University Hospital. Amostras de sangue seco (DBS) são coletadas de pacientes pela aplicação de um sangue total, colhido por lanceta do dedo, calcanhar ou dedo do pé, um papel de filtro fornecido. Para avaliar a estabilidade dos marcadores de doença em DBS, um total de 10 manchas de sangue (cada bico de sangue contém 50 - 75 microL de sangue) serão aplicadas no papel de filtro no dia 0. As amostras de manchas de sangue coletadas de um único paciente no dia 0 serão avaliados no dia da coleta de DBS e seguidos no dia 3, dia 7, 6 meses e 1 ano após a coleta da amostra. O objetivo da medição repetida de uma única amostra de paciente em diferentes momentos é avaliar o possível efeito do efeito do tempo na precisão dos dados. 5 manchas de sangue são separadas e protegidas da luz com um envelope de bloqueio de luz para comparar o efeito da luz na degradação dos marcadores de doenças (Tabela 1). Os marcadores séricos de doenças medidos com o método convencional servirão de referência e serão comparados com amostras de DBS em diferentes momentos. 30 pacientes serão coletados para validar a correlação entre o soro e o nível de marcadores de doença DBS.

Fase II - Estudo piloto No estudo piloto, pretendemos desenvolver o método de gota de sangue seco para triagem de colestase neonatal. Crianças com colestase neonatal previamente diagnosticadas no Departamento de Pediatria do Hospital Infantil da Universidade Nacional de Taiwan em 2007 ou crianças recém-diagnosticadas serão recrutadas retrospectivamente a partir da revisão de prontuários. Pacientes com hiperbilirrubinemia do tipo indireto e recém-nascidos saudáveis ​​serão incluídos como controle. Analisaremos a colestase neonatal e o teste de triagem de sangue seco de pacientes controle após o nascimento para quantificar o nível de marcadores da doença. A análise da curva ROC será realizada na quantidade de bilirrubina para encontrar o melhor ponto de corte para triagem de colestase neonatal. O tamanho da amostra do estudo de caso e controle é de 20 casos e 20 controles.