Trockenblut-Spot-Screening-Test für neonatale Cholestase-Patienten (DBS-SCReNC)

Ziele:

1. Entwickelte einen Screening-Test für neonatale Cholestase mit trockenem Blutfleck
2. Verbessern Sie das Überleben der Patienten durch frühzeitige Diagnose einer behandelbaren neonatalen Cholestaseerkrankung wie Gallengangsatresie und angeborener Störung des Gallensäurestoffwechsels.

Phase I – Validierung der Methode zur Quantifizierung von Krankheitsmarkern auf trockenem Blutfleck.

Pädiatrische Kinder mit Cholestase-Diagnose im National Taiwan University Hospital während der Aufnahme oder in der Ambulanz werden für die Phase-I-Studie gesammelt. 5 ml venöses Blut werden zur Messung von Krankheitsmarkern während der routinemäßigen Nachsorge in der Ambulanz des National Taiwan University Hospital entnommen. Getrocknete Blutproben (DBS) werden von Patienten entnommen, indem Vollblut, das mit einer Lanzette aus dem Finger, der Ferse oder dem Zeh entnommen wird, auf ein mitgeliefertes Filterpapier aufgetragen wird. Um die Stabilität von Krankheitsmarkern auf DBS zu bewerten, werden am Tag 0 insgesamt 10 Blutflecken (jede Bluttülle enthält 50 - 75 Mikroliter Blut) auf das Filterpapier aufgetragen. Die gesammelten Blutfleckproben eines einzelnen Patienten am Tag 0 werden am Tag der DBS-Entnahme ausgewertet, gefolgt von Tag 3, Tag 7, 6 Monate und 1 Jahr nach der Probenentnahme. Der Zweck der wiederholten Messung einer einzelnen Patientenprobe zu unterschiedlichen Zeitpunkten besteht darin, die mögliche Auswirkung des Zeiteffekts auf die Genauigkeit der Daten zu bewerten. 5 Blutflecken werden getrennt und mit einer lichtblockierenden Hülle vor Licht geschützt, um die Lichtwirkung auf den Abbau von Krankheitsmarkern zu vergleichen (Tabelle 1). Mit herkömmlichen Methoden gemessene Krankheitsmarker im Serum werden als Referenz dienen und zu verschiedenen Zeitpunkten mit DBS-Proben verglichen. 30 Patienten werden gesammelt, um die Korrelation zwischen dem Serumspiegel und dem Grad der DBS-Krankheitsmarker zu validieren.

Phase II – Pilotstudie In der Pilotstudie zielen wir darauf ab, ein Trockenbluttestverfahren für das Screening auf neonatale Cholestase zu entwickeln. Kinder mit neonataler Cholestase, die zuvor in der Abteilung für Pädiatrie des Kinderkrankenhauses der National Taiwan University aus dem Jahr 2007 diagnostiziert wurden, oder neu diagnostizierte Kinder werden rückwirkend aus der Aktenüberprüfung rekrutiert. Patienten mit Hyperbilirubinämie vom indirekten Typ und gesunde Neugeborene werden als Kontrollgruppe aufgenommen. Wir werden die neonatale Cholestase analysieren und Patienten nach der Geburt mit einem Trockenblut-Screening-Test untersuchen, um den Grad der Krankheitsmarker zu quantifizieren. Die ROC-Kurvenanalyse wird anhand der Bilirubinmenge durchgeführt, um den besten Grenzwert für das Screening auf neonatale Cholestase zu finden. Die Stichprobengröße der Fall- und Kontrollstudie beträgt 20 Fälle und 20 Kontrollen.