Test de dépistage des taches de sang sec pour les patients atteints de cholestase néonatale (DBS-SCReNC)

Objectifs :

1. Développement d'un test de dépistage de la cholestase néonatale à l'aide d'une goutte de sang séché
2. Améliorez la survie des patients grâce à un diagnostic précoce de la maladie de cholestase néonatale traitable telle que l'atrésie des voies biliaires et l'erreur innée du métabolisme des acides biliaires.

Phase I - Validation de la méthode de quantification des marqueurs de maladies sur tache de sang séché.

Les enfants pédiatriques atteints de cholestase diagnostiqués à l'hôpital universitaire national de Taiwan lors de leur admission ou en clinique externe seront collectés pour l'étude de phase I. 5 ml de sang veineux seront prélevés pour mesurer les marqueurs de la maladie lors du suivi de routine à la clinique externe de l'hôpital universitaire national de Taiwan. Des échantillons de gouttes de sang séché (DBS) sont prélevés sur des patients en appliquant un sang total, prélevé par lancette du doigt, du talon ou de l'orteil, sur un papier filtre fourni. Pour évaluer la stabilité des marqueurs de la maladie sur DBS, un total de 10 taches de sang (chaque bec de sang contient 50 à 75 microL de sang) seront appliqués sur le papier filtre au jour 0. Les échantillons de taches de sang prélevés d'un seul patient au jour 0 seront évalués le jour de la collecte DBS et suivis des jours 3, 7, 6 mois et 1 an après la collecte de l'échantillon. Le but de la mesure répétée d'un échantillon de patient unique à différents moments est d'évaluer l'effet possible de l'effet du temps sur l'exactitude des données. 5 taches de sang sont séparées et protégées de la lumière avec une enveloppe bloquant la lumière pour comparer l'effet de la lumière sur la dégradation des marqueurs de la maladie (tableau 1). Les marqueurs de maladies sériques mesurés avec la méthode conventionnelle serviront de référence et seront comparés avec des échantillons de DBS à différents moments. 30 patients seront collectés pour valider la corrélation entre le sérum et le niveau des marqueurs de la maladie DBS.

Phase II - Étude pilote Dans l'étude pilote, nous visons à développer la méthode des gouttes de sang séché pour le dépistage de la cholestase néonatale. Les enfants atteints de cholestase néonatale précédemment diagnostiqués au Département de pédiatrie de l'Hôpital pour enfants de l'Université nationale de Taiwan à partir de 2007 ou les enfants nouvellement diagnostiqués seront recrutés rétrospectivement à partir de l'examen des dossiers. Les patients atteints d'hyperbilirubinémie de type indirect et les nouveau-nés en bonne santé seront recrutés comme témoins. Nous analyserons la cholestase néonatale et contrôlerons le test de dépistage des taches de sang sec après la naissance pour quantifier le niveau des marqueurs de la maladie. Une analyse de la courbe ROC sera effectuée sur la quantité de bilirubine pour trouver le meilleur seuil pour dépister la cholestase néonatale. La taille de l'échantillon de l'étude de cas et de contrôle est de 20 cas et 20 témoins.