Comparação do Teste de Estimulação de ACTH Intramuscular e Intravenoso em Voluntários Normais

Os investigadores conduzirão um estudo observando indivíduos saudáveis ​​para estabelecer a faixa esperada de pico dos níveis de cortisol estimulados por cosintropina em indivíduos saudáveis ​​normais com duas modalidades diferentes de administração de cosintropina. O objetivo deste estudo é comparar a administração intravenosa (IV) e intramuscular (IM) e gerar uma faixa normal de medição de cortisol sérico pós-cosintropina com o novo ensaio.

Os dois objetivos do estudo são: (1) Comparar os valores de cortisol na linha de base, 30 minutos e 60 minutos após o teste de estimulação de cosintropina IV e IM nos mesmos indivíduos. (2) Estudar os valores obtidos usando o novo ensaio Roche Cortisol II e estabelecer um novo intervalo de referência para níveis de cortisol estimulados por cosintropina em indivíduos saudáveis ​​para ambas as modalidades de administração de cosintropina.

O antigo e amplamente utilizado Elecsys® Cortisol Immunoassay da Roche Diagnostics (Cortisol I) está sendo substituído em todo o mundo por um novo Elecsys® Cortisol Assay da Roche Diagnostics (Cortisol II). O novo ensaio de Cortisol II também é um imunoensaio competitivo, mas emprega um anticorpo monoclonal em oposição a um anticorpo de captura policlonal, que foi usado no antigo ensaio de Cortisol I. Isso resulta em maior especificidade para o cortisol com menos interferência de outros glicocorticóides endógenos ou exógenos. O novo ensaio de Cortisol II mostrou ter forte correlação com os níveis de cortisol medidos por cromatografia líquida-espectrometria de massa em tandem (LC-MS/MS), que é considerado o padrão ouro para medição de cortisol. Foi demonstrado em estudos anteriores que o ensaio de Cortisol II gera valores de cortisol que são aproximadamente 20-30% mais baixos do que o imunoensaio de Cortisol I mais antigo com novo corte de cortisol proposto para o diagnóstico de insuficiência adrenal entre 350-375 nmol/L (12,7-13,6 µg/dL).

Este é um estudo prospectivo em indivíduos saudáveis. Os investigadores realizarão dois testes de estimulação de cosintropina nos participantes em duas visitas separadas, uma usando intravenosa e outra usando cosintropina intramuscular (250 µg). Os investigadores permitirão um mínimo de uma semana e um máximo de 2 meses entre os dois testes.

Amostras de sangue para cada um dos dois testes serão coletadas na linha de base, antes da administração de cosintropina, depois 30 minutos e 60 minutos após a administração de cosintropina a partir do cateter interno. Um máximo de 5 ml de sangue será coletado em cada ponto de tempo. Os soros serão separados e as amostras armazenadas a - 80o C após a coleta até serem analisadas.

Todas as amostras de sangue serão testadas para medir os níveis de cortisol usando o novo ensaio Roche Cortisol II. Os kits de análise de cortisol serão fornecidos pela Roche Diagnostics.

A duração total do estudo será de 18 meses. Haverá duas visitas de estudo. Os investigadores permitirão um mínimo de uma semana e um máximo de 2 meses entre as duas visitas.

O estudo incluirá 40 indivíduos saudáveis ​​com idades entre 18 e 65 anos. Os investigadores excluirão indivíduos com eixo hipotálamo-hipófise adrenal conhecido ou outra doença endócrina, uso de glicocorticóide (crônico, atual ou dentro de 3 meses), gravidez ou uso de estrogênio oral. As mulheres serão estudadas durante a mesma fase do ciclo menstrual para cada um dos 2 testes. Os participantes serão recrutados de boca em boca e adicionados colocados dentro do campus da escola de medicina. Os participantes fornecerão consentimento informado por escrito.

Estatísticas do estudo

1. Variável de resultado primário.

   1. Comparação entre os níveis máximos de cortisol estimulado por cosintropina medidos usando administração IV e IM de cosintropina nos mesmos indivíduos
   2. Estabelecendo um novo intervalo de referência para os níveis esperados de pico de cortisol estimulado por cosintropina usando o novo ensaio de Cortisol II para ambas as modalidades de administração de cosintropina.
2. Variáveis ​​de resultados secundários.
3. Plano estatístico incluindo justificação do tamanho da amostra e análise interina dos dados.

Para testar a hipótese de que os níveis de cortisol após a administração IM de cosintropina são ligeiramente inferiores aos da administração IV, o investigador assume que 1) variabilidade analítica proporcional (CV constante) para ambos os métodos; 2) uma diferença > 50% da variabilidade analítica é clinicamente significativa (ou seja, um tamanho de efeito de 0,5). Um tamanho de amostra de 30 indivíduos fornecerá poder de 85% a um nível de significância de 5% usando o teste t pareado unilateral. Quando os dois dados de ponto de tempo são analisados ​​juntos, a potência será maior.

Para estimativa de correlação, o tamanho da amostra de 30 produz um intervalo de confiança bilateral de 95% com uma largura < 0,153, assumindo que a correlação da amostra é > 0,900.

Com os 40 indivíduos saudáveis ​​propostos, a distância do intervalo de referência (definido como percentil 95 da população de referência) do limite superior do intervalo de confiança estimado de 95% será < 22%.