Análise de RNAs não codificantes de subtipos de eosinófilos na asma
A inflamação crônica das vias aéreas rica em eosinófilos é uma característica importante observada na asma. A eosinofilia das vias aéreas e do sangue está associada a taxas aumentadas de exacerbações de asma e tratamento mais intenso.
Recentemente, foi revelada a existência de dois subtipos distintos de eosinófilos - eosinófilos residentes no pulmão (rEOS), que maturam independentemente para interleucina (IL) 5, com a função primária de manter a homeostase tecidual, e eosinófilos inflamatórios (iEOS), que maturam em IL -5-dependentes e estão envolvidos principalmente em respostas imunes. O efeito dos eosinófilos na remodelação das vias aéreas na asma depende não só da atividade, mas também do seu número viável nos pulmões. Os iEOS sanguíneos infiltram-se nas vias aéreas principalmente após o estímulo ambiental como alérgeno e deixam as vias aéreas com secreções brônquicas. No entanto, os rEOS residem no tecido pulmonar durante toda a sua vida, regulando a imunidade local. A proporção de rEOS e iEOS no sangue se altera na asma, em comparação com controles saudáveis. Sabe-se que o subtipo de eosinófilos predominante na asma alérgica são os iEOS, enquanto os rEOS são subtipos básicos em pacientes com asma eosinofílica grave, além disso, diferem nas propriedades adesivas e na capacidade de sobrevivência. Propriedades biológicas distintas permitem especular sobre suas diferentes funções na asma, porém, ainda há poucas informações. Dados sobre perfis de microRNA (miRNA) expressos de forma diferente em eosinófilos na asma sugerem que os subtipos de eosinófilos podem ser distintos em RNA não codificante (ncRNA) - microRNA (miRNA), RNA de interação com piwi (piRNA) e RNA longo não codificante (IncRNA) ) que poderiam descrever seu papel na patogênese da asma e atuar como biomarcadores para discernir os fenótipos da asma.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Descrição detalhada
A asma não tem cura e apenas um tratamento bem equilibrado pode controlar o curso e a gravidade da doença. A maioria dos sintomas clínicos surge da inflamação crônica aberrante das vias aéreas, principalmente eosinofílica. Os eosinófilos são granulócitos terminalmente diferenciados que contribuem ativamente para as cascatas inflamatórias inatas e adaptativas por meio da produção e liberação de diversas quimiocinas, citocinas, mediadores lipídicos e outros fatores de crescimento. A IL-5 desempenha um papel fundamental na maturação dos eosinófilos na medula óssea, seu recrutamento e ativação nos locais de inflamação.
Historicamente, os eosinófilos foram descritos como um elemento crítico na defesa do hospedeiro, incluindo parasitas, vírus, fungos ou bactérias, dando-lhes um rótulo de células inflamatórias destrutivas. No entanto, ficou claro que os eosinófilos em estado estacionário também podem contribuir para a imunorregulação e homeostase tecidual. Estudos revelaram que existem subtipos distintos de eosinófilos - eosinófilos imunorreguladores residentes no pulmão (rEOS) e eosinófilos inflamatórios (iEOS), envolvidos em respostas imunes. Subtipos distintos de eosinófilos com diferentes funções determinam o tratamento separado. Ainda existem poucos estudos descrevendo subtipos distintos de eosinófilos nos pulmões ou no sangue. É o início de uma nova área de pesquisa promissora para um melhor tratamento individualizado da asma eosinofílica, além de outras doenças eosinofílicas.
Os estudos de eosinófilos no sangue periférico são suficientemente relevantes para os estudos de eosinófilos nos tecidos, uma vez que os eosinófilos no sangue são liberados na corrente sanguínea em uma forma totalmente maturada. Além disso, o estudo do sangue periférico poderia fornecer informações adicionais com possibilidades de prevenir os efeitos dos eosinófilos no estágio inicial, antes da migração para as vias aéreas. Além disso, a existência de eosinófilos residentes no tecido no sangue periférico é confirmada e a pesquisa primária para marcadores de superfície de subtipos de eosinófilos foi feita de acordo com os dados de eosinófilos do sangue humano.
Dados sobre perfis de microRNA (miRNA) expressos de forma diferente em eosinófilos na asma sugerem que os subtipos de eosinófilos podem ser distintos em RNA não codificante (ncRNA) - microRNA (miRNA), RNA de interação com piwi (piRNA) e RNA longo não codificante ( IncRNA) que poderiam descrever seu papel na patogênese da asma e atuar como biomarcadores para discernir os fenótipos da asma.
Os pesquisadores planejam expandir a pesquisa analisando os perfis de RNA não codificante (ncRNA) - miRNA, piRNA e lncRNA de rEOS e iEOS, bem como assinaturas de ncRNA selecionadas no plasma sanguíneo, estimando seu valor diagnóstico. Além disso, a investigação adicional de ncRNA em exossomos derivados de eosinófilos fornecerá dados importantes sobre o possível efeito dos subtipos de eosinófilos na remodelação das vias aéreas via ncRNA secretado. ncRNAs são reguladores chave para a transcrição de genes. No entanto, há evidências sobre sua desregulação em eosinófilos durante a asma. Ele fornecerá informações importantes sobre as vias de sinalização molecular que regulam a atividade de distintos subtipos de eosinófilos durante a saúde e a asma, e fornecerá as informações essenciais sobre possíveis novos alvos terapêuticos para seu controle. Além disso, os pesquisadores investigarão as diferenças biológicas entre rEOS e iEOS, incluindo expressão de receptores de integrinas e eosinofilopoietinas de superfície, propriedades adesivas, capacidade de sobrevivência, espécies reativas de oxigênio sintetizadas e apoptose, bem como seu efeito na atividade fisiológica das células estruturais pulmonares como proliferação, apoptose, migração, contratilidade e produção de proteínas, e irá relacioná-la com vias de sinalização molecular, reguladas por distintos ncRNAs expressos. Os ncRNAs podem ser armazenados em exossomos de eosinófilos e expressos no ambiente circundante. Informações sobre ncRNAs em exossomos derivados de eosinófilos demonstrarão sua função afetando outras células, principalmente após a migração para as vias aéreas. Além disso, os ncRNAs são estáveis e resistentes às RNases sanguíneas e diferencialmente expressos em diversas patologias. Os pesquisadores supõem que os níveis sanguíneos alterados de ncRNAs podem atuar como um possível novo biomarcador de diagnóstico na asma.
Tipo de estudo
Inscrição (Antecipado)
Estágio
- Não aplicável
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Kestutis Prof. Dr. Malakauskas
- Número de telefone: +37037326737
- E-mail: kestutis.malakauskas@lsmuni.lt
Estude backup de contato
- Nome: Jolita Palacionyte
- Número de telefone: +37062591727
- E-mail: jolita.palacionyte@lsmuni.lt
Locais de estudo
-
-
-
Kaunas, Lituânia, LT-50009
- Recrutamento
- Lithuanian University of Health Sciences, Pulmonology Department
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Contato:
- Kęstutis Malakauskas, Prof., Dr.
- Número de telefone: +37037326737
- E-mail: kestutis.malakauskas@lsmuni.lt
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Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Gêneros Elegíveis para o Estudo
Descrição
Critério de inclusão:
- Homens e mulheres entre 18 e 70 anos;
- Asma alérgica e sensibilização ao alérgeno dos ácaros da poeira doméstica (D. pteronyssinus), aprovado com: 1) histórico médico e sintomas há mais de um ano; 2) teste cutâneo por picada positivo para D. pteronyssinus (pápulas positivas são aquelas que excedem 3 mm de diâmetro maior que o controle negativo); 3) provocação brônquica positiva com metacolina ou obstrução brônquica reversível documentada;
- Asma eosinofílica grave;
- Mulheres na pré-menopausa se o teste de gravidez for negativo;
- Indivíduos saudáveis sem alergias e outras doenças respiratórias crônicas (grupo controle);
- Participantes que deram o seu consentimento informado por escrito.
Critério de exclusão:
- Exacerbação da asma 1 mês antes do estudo;
- Sintomas de alergia permanente clinicamente significativos (ex. alergia induzida por caspa de gato ou cachorro);
- Contra-indicações para realizar um teste cutâneo alérgico e/ou teste de provocação brônquica: 1) infecção ativa das vias aéreas 1 mês antes do estudo; 2) medicamentos utilizados: ingestão de glicocorticoides inalatórios 1 mês antes do estudo, ingestão de anti-histamínicos 7 dias antes do estudo; 3) β2 agonistas de ação curta 12 horas antes do estudo; 4) β2 agonistas de ação prolongada 2 dias antes do estudo; 5) antagonistas dos receptores de leucotrienos antes de 14 dias;
- Contra-indicações para epinefrina;
- Outras doenças e condições mentais e/ou internas significativas, que poderiam ser critérios de exclusão devido à opinião do pesquisador;
- Abuso de álcool ou narcóticos;
- Gravidez;
- Amamentação.
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Finalidade Principal: Ciência básica
- Alocação: Randomizado
- Modelo Intervencional: Atribuição Paralela
- Mascaramento: Nenhum (rótulo aberto)
Armas e Intervenções
Grupo de Participantes / Braço |
Intervenção / Tratamento |
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Experimental: Pacientes com asma alérgica
Pacientes com asma alérgica e sensibilização ao alérgeno dos ácaros da poeira doméstica (D. pteronyssinus).
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O alérgeno Dermatophagoides pteronyssinus é necessário para realizar o teste de provocação brônquica com alérgeno.
Uma quantidade de sangue de uma pessoa retirada de seu corpo para uso médico.
O desafio brônquico é realizado com o alérgeno D. pteronyssinus.
Medições das diferenças na atividade dos eosinófilos após o desafio com alérgenos.
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Experimental: Pacientes com asma eosinofílica grave
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Uma quantidade de sangue de uma pessoa retirada de seu corpo para uso médico.
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Comparador Ativo: Indivíduos saudáveis como um grupo de controle
Indivíduos saudáveis sem alergias e outras doenças respiratórias crônicas (grupo controle).
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Uma quantidade de sangue de uma pessoa retirada de seu corpo para uso médico.
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Mudanças na expressão de ncRNA entre os subtipos de eosinófilos
Prazo: De 6 a 12 meses
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Expressão de ncRNA validada de rEOS e iEOS em pacientes com asma eosinofílica grave e não grave e indivíduos saudáveis.
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De 6 a 12 meses
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níveis de ncRNA em exossomos derivados de rEOS e iEOS
Prazo: De 12 a 18 meses
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Níveis de ncRNA selecionados qualitativos e quantitativos em exossomos derivados de rEOS e iEOS de todos os grupos investigados.
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De 12 a 18 meses
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Mudanças de dobra de perfis de ncRNA de subtipos distintos de eosinófilos
Prazo: De 6 a 12 meses
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Perfis completos de ncRNA não validados de subtipos distintos de eosinófilos em pacientes com asma eosinofílica grave e não grave e indivíduos saudáveis.
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De 6 a 12 meses
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As mudanças de dobra da expressão de integrinas de superfície rEOS e iEOS
Prazo: De 6 a 12 meses
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A expressão gênica de integrinas de membrana externa selecionadas em subtipos de eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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As mudanças na expressão dos receptores de eosinofilopoietinas rEOS e iEOS
Prazo: De 6 a 12 meses
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A expressão gênica de interleucina (IL)-5, IL-3 e fator estimulante de colônia de granulócitos-macrófagos em subtipos de eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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A eficiência da adesão iEOS e rEOS
Prazo: De 6 a 12 meses
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As diferenças na quantidade estável de iEOS e rEOS aderidos na cultura de células combinadas com células de músculo liso das vias aéreas (ASM) ou fibroblastos pulmonares comparadas entre os grupos investigados.
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De 6 a 12 meses
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Diferenças de sobrevivência iEOS e rEOS
Prazo: De 6 a 12 meses
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Número de iEOS e rEOS viáveis após um período de tempo apropriado em cultura celular combinada com células ASM ou fibroblastos pulmonares.
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De 6 a 12 meses
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Quantidade de espécies reativas de oxigênio sintetizadas por iEOS e rEOS
Prazo: De 6 a 12 meses
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Diferenças relativas entre iEOS e rEOS sintetizaram a quantidade de espécies reativas de oxigênio após um período apropriado de incubação isoladamente ou com células ASM ou fibroblastos pulmonares.
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De 6 a 12 meses
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Número iEOS e rEOS apoptótico
Prazo: De 6 a 12 meses
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O número de iEOS e rEOS apoptóticos após um período de tempo apropriado em cultura celular combinada com células ASM ou fibroblastos pulmonares.
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De 6 a 12 meses
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As concentrações de iEOS e rEOS produziram proteínas nos fluidos corporais dos indivíduos investigados.
Prazo: De 6 a 12 meses
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Concentrações de proteínas iEOS e rEOS selecionadas, medidas em fluidos corporais de sujeitos investigados, expressas como a quantidade de proteína na respectiva quantidade de amostra de fluido.
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De 6 a 12 meses
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Efeito iEOS e rEOS na proliferação de células musculares lisas das vias aéreas ou fibroblastos pulmonares
Prazo: De 6 a 12 meses
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A quantidade de células ASM ou fibroblastos pulmonares após várias repetições de proliferação na presença ou ausência de subtipos de eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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Efeito iEOS e rEOS em células ASM apoptóticas e número de fibroblastos pulmonares
Prazo: De 6 a 12 meses
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O número de células ASM apoptóticas e fibroblastos pulmonares após um período de tempo apropriado em cultura celular combinada com iEOS e rEOS.
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De 6 a 12 meses
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Efeito iEOS e rEOS na migração de células ASM.
Prazo: De 6 a 12 meses
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O número de células ASM migradas após um período de tempo apropriado em cultura celular combinada com iEOS e rEOS
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De 6 a 12 meses
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Efeito iEOS e rEOS na migração de fibroblastos pulmonares
Prazo: De 6 a 12 meses
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O número de fibroblastos pulmonares migrados após um período de tempo apropriado em cultura celular combinada com iEOS e rEOS
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De 6 a 12 meses
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Efeito iEOS e rEOS na contratilidade das células ASM
Prazo: De 6 a 12 meses
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A eficiência relativa da capacidade das células ASM de contrair o gel de colágeno após um período de tempo apropriado em cultura de células combinadas com iEOS e rEOS, expressa como tamanho de gel derramado reduzido em porcentagem, em comparação com células ASM de controle sem incubação com eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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Efeito de iEOS e rEOS na contratilidade de fibroblastos pulmonares
Prazo: De 6 a 12 meses
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A eficiência relativa da capacidade dos fibroblastos pulmonares de contrair o gel de colágeno após um período de tempo apropriado em cultura celular combinada com iEOS e rEOS.
expresso como tamanho reduzido de gel derramado em porcentagem, em comparação com fibroblastos pulmonares de controle, sem incubação com eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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Efeito de iEOS e rEOS na expressão de proteínas de células ASM e fibroblastos pulmonares;
Prazo: De 6 a 12 meses
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Células ASM selecionadas alteradas e expressão de proteínas de fibroblastos pulmonares, após incubação com iEOS e rEOS, expressas como alterações de vezes em comparação com células de controle, sem incubação com eosinófilos
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De 6 a 12 meses
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Efeito de iEOS e rEOS na expressão gênica de células ASM e proteínas de fibroblastos pulmonares;
Prazo: De 6 a 12 meses
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Expressão gênica alterada de células ASM selecionadas e proteínas de fibroblastos pulmonares, após incubação com iEOS e rEOS, expressas como alterações de dobra em comparação com células controle, sem incubação com eosinófilos
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De 6 a 12 meses
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Publicações e links úteis
Publicações Gerais
- Mitchell PS, Parkin RK, Kroh EM, Fritz BR, Wyman SK, Pogosova-Agadjanyan EL, Peterson A, Noteboom J, O'Briant KC, Allen A, Lin DW, Urban N, Drescher CW, Knudsen BS, Stirewalt DL, Gentleman R, Vessella RL, Nelson PS, Martin DB, Tewari M. Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008 Jul 29;105(30):10513-8. doi: 10.1073/pnas.0804549105. Epub 2008 Jul 28.
- Barnig C, Alsaleh G, Jung N, Dembele D, Paul N, Poirot A, Uring-Lambert B, Georgel P, de Blay F, Bahram S. Circulating Human Eosinophils Share a Similar Transcriptional Profile in Asthma and Other Hypereosinophilic Disorders. PLoS One. 2015 Nov 2;10(11):e0141740. doi: 10.1371/journal.pone.0141740. eCollection 2015.
- Mazzeo C, Canas JA, Zafra MP, Rojas Marco A, Fernandez-Nieto M, Sanz V, Mittelbrunn M, Izquierdo M, Baixaulli F, Sastre J, Del Pozo V. Exosome secretion by eosinophils: A possible role in asthma pathogenesis. J Allergy Clin Immunol. 2015 Jun;135(6):1603-13. doi: 10.1016/j.jaci.2014.11.026. Epub 2015 Jan 21.
- Mesnil C, Raulier S, Paulissen G, Xiao X, Birrell MA, Pirottin D, Janss T, Starkl P, Ramery E, Henket M, Schleich FN, Radermecker M, Thielemans K, Gillet L, Thiry M, Belvisi MG, Louis R, Desmet C, Marichal T, Bureau F. Lung-resident eosinophils represent a distinct regulatory eosinophil subset. J Clin Invest. 2016 Sep 1;126(9):3279-95. doi: 10.1172/JCI85664. Epub 2016 Aug 22.
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- Rodrigo-Munoz JM, Canas JA, Sastre B, Rego N, Greif G, Rial M, Minguez P, Mahillo-Fernandez I, Fernandez-Nieto M, Mora I, Barranco P, Quirce S, Sastre J, Del Pozo V. Asthma diagnosis using integrated analysis of eosinophil microRNAs. Allergy. 2019 Mar;74(3):507-517. doi: 10.1111/all.13570. Epub 2018 Oct 11.
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Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Antecipado)
Conclusão Primária (Antecipado)
Conclusão do estudo (Antecipado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Real)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
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Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
- Doenças Respiratórias
- Doenças do sistema imunológico
- Doenças pulmonares
- Hipersensibilidade, Imediata
- Doenças Hematológicas
- Doenças brônquicas
- Doenças Pulmonares Obstrutivas
- Hipersensibilidade Respiratória
- Hipersensibilidade
- Distúrbios leucocitários
- Eosinofilia
- Síndrome Hipereosinofílica
- Asma
- Eosinofilia Pulmonar
Outros números de identificação do estudo
- LAB-1/2020
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
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Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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