Análisis de ARN no codificantes de subtipos de eosinófilos en asma
La inflamación crónica de las vías respiratorias rica en eosinófilos es una característica importante que se observa en el asma. La eosinofilia en las vías respiratorias y la sangre se asocia con mayores tasas de exacerbaciones del asma y un tratamiento más intenso.
Recientemente, se reveló la existencia de dos subtipos distintos de eosinófilos: eosinófilos residentes en los pulmones (rEOS), que maduran de forma independiente a interleucina (IL) 5, con la función principal de mantener la homeostasis tisular, y eosinófilos inflamatorios (iEOS), que maduran en IL. -5 de manera dependiente y están principalmente implicados en las respuestas inmunitarias. El efecto de los eosinófilos sobre la remodelación de las vías respiratorias en el asma depende no solo de la actividad sino también de su número viable en los pulmones. Los iEOS sanguíneos se infiltran en las vías respiratorias principalmente después del estímulo ambiental como alérgenos y dejan las vías respiratorias con secreciones bronquiales. Sin embargo, los rEOS residen en el tejido pulmonar durante toda su vida regulando la inmunidad local. La proporción de rEOS en sangre e iEOS se altera en el asma, en comparación con controles sanos. Se sabe que el subtipo de eosinófilos predominante en el asma alérgica es iEOS, mientras que rEOS es un subtipo básico en pacientes con asma eosinofílica grave, además, son diferentes en propiedades adhesivas y supervivencia también. Las distintas propiedades biológicas permiten especular sobre sus diferentes funciones en el asma, sin embargo, todavía hay poca información. Los datos sobre perfiles de microARN (miARN) expresados de manera diferente en eosinófilos en el asma sugieren que los subtipos de eosinófilos pueden ser distintos en ARN no codificante (ncARN): microARN (miARN), ARN que interactúa con piwi (piARN) y ARN largo no codificante (ARNc). ) perfiles que podrían describir su papel en la patogénesis del asma y actuar como biomarcadores para discernir fenotipos de asma.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Descripción detallada
El asma no se cura y solo un tratamiento bien equilibrado puede controlar el curso y la gravedad de la enfermedad. La mayoría de los síntomas clínicos surgen de una inflamación crónica aberrante de las vías respiratorias, en su mayoría eosinofílica. Los eosinófilos son granulocitos con diferenciación terminal que contribuyen activamente a las cascadas inflamatorias innatas y adaptativas a través de la producción y liberación de diversas quimiocinas, citocinas, mediadores lipídicos y otros factores de crecimiento. La IL-5 juega un papel fundamental en la maduración de los eosinófilos en la médula ósea, su reclutamiento y activación en los sitios de inflamación.
Históricamente, los eosinófilos se describieron como un actor fundamental en la defensa del huésped, incluidos parásitos, virus, hongos o bacterias, lo que les otorga una etiqueta de células inflamatorias destructivas. Sin embargo, quedó claro que los eosinófilos en estado estacionario también pueden contribuir a la inmunorregulación y la homeostasis tisular. Los estudios revelaron que existen distintos subtipos de eosinófilos: eosinófilos inmunorreguladores residentes en los pulmones (rEOS) y eosinófilos inflamatorios (iEOS), involucrados en las respuestas inmunitarias. Los distintos subtipos de eosinófilos con diferentes funciones determinan el tratamiento por separado. Todavía hay solo unos pocos estudios que describen distintos subtipos de eosinófilos en los pulmones o la sangre. Es el comienzo de una nueva área de investigación prometedora para un mejor tratamiento individualizado del asma eosinofílica, además de otras enfermedades eosinofílicas.
Los estudios de eosinófilos en sangre periférica son suficientemente relevantes para los estudios de eosinófilos tisulares, ya que los eosinófilos en sangre se liberan en el torrente sanguíneo en una forma completamente madura. Además, el estudio de sangre periférica podría brindar información adicional con posibilidades de prevenir los efectos de los eosinófilos en la etapa temprana, antes de la migración a las vías respiratorias. Además, se confirma la existencia de eosinófilos residentes en tejidos en sangre periférica y se realizó una investigación primaria para marcadores de superficie de subtipos de eosinófilos de acuerdo con los datos de eosinófilos en sangre humana.
Los datos sobre perfiles de microARN (miARN) expresados de manera diferente en eosinófilos en el asma sugieren que los subtipos de eosinófilos pueden ser distintos en ARN no codificante (ncARN): microARN (miARN), ARN que interactúa con piwi (piARN) y ARN largo no codificante ( IncRNA) que podrían describir su papel en la patogénesis del asma y actuar como biomarcadores para discernir fenotipos de asma.
Los investigadores planean ampliar la investigación mediante el análisis de perfiles de ARN no codificante (ncRNA): miARN, piARN y lncRNA de rEOS e iEOS, así como firmas seleccionadas de ncRNA en plasma sanguíneo para estimar su valor diagnóstico. Además, la investigación adicional de ncRNA en exosomas derivados de eosinófilos proporcionará datos importantes sobre el posible efecto de los subtipos de eosinófilos en la remodelación de las vías respiratorias a través del ncRNA secretado. Los ncRNA son reguladores clave para la transcripción de genes. Sin embargo, existe evidencia sobre su desregulación en los eosinófilos durante el asma. Aportará información importante sobre las vías de señalización molecular que regulan la actividad de los distintos subtipos de eosinófilos durante la salud y el asma, y aportará la información esencial sobre posibles nuevas dianas terapéuticas para su control. Además, los investigadores investigarán las diferencias biológicas entre rEOS e iEOS, incluidas las integrinas de superficie y la expresión de los receptores de eosinofilopoyetina, las propiedades adhesivas, la capacidad de supervivencia, las especies de oxígeno reactivas sintetizadas y la apoptosis, así como su efecto sobre la actividad fisiológica de las células estructurales pulmonares como proliferación, apoptosis, migración, contractilidad y producción de proteínas, y lo relacionará con vías de señalización molecular, reguladas por distintos ncRNAs expresados. Los ncRNA se pueden almacenar en exosomas de eosinófilos y expresarse en el entorno circundante. La información sobre los ncRNA en exosomas derivados de eosinófilos demostrará su función al afectar a otras células, especialmente después de la migración a las vías respiratorias. Además, los ncRNA son estables y resistentes a las RNasas sanguíneas y se expresan diferencialmente en varias patologías. Los investigadores suponen que los niveles sanguíneos alterados de ncRNA podrían actuar como un posible nuevo biomarcador de diagnóstico en el asma.
Tipo de estudio
Inscripción (Anticipado)
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Kestutis Prof. Dr. Malakauskas
- Número de teléfono: +37037326737
- Correo electrónico: kestutis.malakauskas@lsmuni.lt
Copia de seguridad de contactos de estudio
- Nombre: Jolita Palacionyte
- Número de teléfono: +37062591727
- Correo electrónico: jolita.palacionyte@lsmuni.lt
Ubicaciones de estudio
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-
-
Kaunas, Lituania, LT-50009
- Reclutamiento
- Lithuanian University of Health Sciences, Pulmonology Department
-
Contacto:
- Kęstutis Malakauskas, Prof., Dr.
- Número de teléfono: +37037326737
- Correo electrónico: kestutis.malakauskas@lsmuni.lt
-
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Géneros elegibles para el estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- Hombres y mujeres entre las edades de 18-70 años;
- Asma alérgica y sensibilización al alérgeno de los ácaros del polvo doméstico (D. pteronyssinus), aprobado con: 1) historial médico y síntomas de más de un año; 2) prueba cutánea positiva para D. pteronyssinus (las ronchas positivas son aquellas que superan los 3 mm de diámetro más que el control negativo); 3) provocación bronquial positiva con metacolina u obstrucción bronquial reversible documentada;
- Asma eosinofílica severa;
- Mujeres premenopáusicas si la prueba de embarazo es negativa;
- Sujetos sanos sin alergias y otras enfermedades respiratorias crónicas (grupo control);
- Participantes que dieron su consentimiento informado por escrito.
Criterio de exclusión:
- Exacerbación de asma 1 mes antes del estudio;
- Síntomas de alergia permanente clínicamente significativos (ej. alergia inducida por caspa de perro o gato);
- Contraindicaciones para realizar una prueba cutánea de alergia y/o prueba de provocación bronquial: 1) infección activa de vías aéreas 1 mes antes del estudio; 2) medicamentos utilizados: ingesta de glucocorticoides inhalados 1 mes antes del estudio, ingesta de antihistamínicos 7 días antes del estudio; 3) agonistas β2 de acción corta 12 horas antes del estudio; 4) agonistas β2 de acción prolongada 2 días antes del estudio; 5) antagonistas de los receptores de leucotrienos 14 días antes;
- Contraindicaciones para la epinefrina;
- Otras enfermedades y condiciones mentales y/o internas significativas, que pudieran ser criterios de exclusión debido a la opinión del investigador;
- Abuso de alcohol o narcóticos;
- El embarazo;
- Amamantamiento.
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Ciencia básica
- Asignación: Aleatorizado
- Modelo Intervencionista: Asignación paralela
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
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Experimental: Pacientes con asma alérgica
Pacientes con asma alérgica y sensibilización al alérgeno de los ácaros del polvo doméstico (D. pteronyssinus).
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Se requiere el alérgeno Dermatophagoides pteronyssinus para realizar la prueba de provocación bronquial con alérgenos.
Una cantidad de sangre de una persona extraída de su cuerpo para uso médico.
La provocación bronquial se realiza con alérgeno de D. pteronyssinus.
Mediciones de las diferencias en la actividad de los eosinófilos después del desafío con alérgenos.
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Experimental: Pacientes con asma eosinofílica severa
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Una cantidad de sangre de una persona extraída de su cuerpo para uso médico.
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Comparador activo: Sujetos sanos como grupo de control
Sujetos sanos sin alergias y otras enfermedades respiratorias crónicas (grupo control).
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Una cantidad de sangre de una persona extraída de su cuerpo para uso médico.
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Doble cambios de expresión de ncRNA entre subtipos de eosinófilos
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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Expresión validada de ncRNA de rEOS e iEOS en pacientes con asma eosinofílica grave y no grave y sujetos sanos.
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De 6 a 12 meses
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Niveles de ncRNA en exosomas derivados de rEOS e iEOS
Periodo de tiempo: De 12 a 18 meses
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Niveles de ncRNA seleccionados cualitativos y cuantitativos en exosomas derivados de rEOS e iEOS de todos los grupos investigados.
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De 12 a 18 meses
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Cambios en los pliegues de los perfiles de ncRNA de distintos subtipos de eosinófilos
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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Perfiles completos de ncRNA no validados de distintos subtipos de eosinófilos en pacientes con asma eosinofílica grave y no grave y sujetos sanos.
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De 6 a 12 meses
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Los cambios de pliegue de la expresión de integrinas de superficie rEOS e iEOS
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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La expresión génica de integrinas de membrana externa seleccionadas en subtipos de eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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Los cambios en el pliegue de la expresión de los receptores de eosinofilopoyetinas rEOS e iEOS
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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La expresión génica de interleucina (IL)-5, IL-3 y factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos en subtipos de eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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La eficiencia de la adhesión iEOS y rEOS
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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Las diferencias en la cantidad de iEOS y rEOS adheridos estables en el cultivo celular combinado con células de músculo liso de las vías respiratorias (ASM) o fibroblastos pulmonares en comparación entre los grupos investigados.
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De 6 a 12 meses
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Diferencias de supervivencia de iEOS y rEOS
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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Número de iEOS y rEOS viables después de un período de tiempo apropiado en cultivo celular combinado con células ASM o fibroblastos pulmonares.
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De 6 a 12 meses
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Cantidad de especies de oxígeno reactivo sintetizadas iEOS y rEOS
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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Las diferencias relativas entre iEOS y rEOS sintetizaron la cantidad de especies de oxígeno reactivo después de un período apropiado de incubación solo o con células ASM o fibroblastos pulmonares.
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De 6 a 12 meses
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Número apoptótico de iEOS y rEOS
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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El número de iEOS y rEOS apoptóticos después de un período de tiempo apropiado en cultivo celular combinado con células ASM o fibroblastos pulmonares.
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De 6 a 12 meses
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Las concentraciones de iEOS y rEOS produjeron proteínas en los fluidos corporales de los sujetos investigados.
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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Concentraciones de proteínas iEOS y rEOS seleccionadas, medidas en los fluidos corporales de los sujetos investigados, expresadas como la cantidad de proteína en la cantidad respectiva de muestra de fluido.
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De 6 a 12 meses
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Efecto iEOS y rEOS sobre las células del músculo liso de las vías respiratorias o la proliferación de fibroblastos pulmonares
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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La cantidad de células ASM o fibroblastos pulmonares después de varias repeticiones de proliferación en presencia o ausencia de subtipos de eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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Efecto iEOS y rEOS sobre las células ASM apoptóticas y el número de fibroblastos pulmonares
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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El número de células ASM apoptóticas y fibroblastos pulmonares después de un período de tiempo apropiado en cultivo celular combinado con iEOS y rEOS.
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De 6 a 12 meses
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Efecto de iEOS y rEOS en la migración de células ASM.
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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El número de células ASM migradas después de un período de tiempo apropiado en cultivo celular combinado con iEOS y rEOS
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De 6 a 12 meses
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Efecto de iEOS y rEOS en la migración de fibroblastos pulmonares
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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El número de fibroblastos pulmonares migrados después de un período de tiempo apropiado en cultivo celular combinado con iEOS y rEOS
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De 6 a 12 meses
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Efecto de iEOS y rEOS en la contractilidad de las células ASM
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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La eficiencia relativa de la capacidad de las células ASM para contraer gel de colágeno después de un período de tiempo adecuado en cultivo celular combinado con iEOS y rEOS, expresada como porcentaje de tamaño de gel vertido reducido, en comparación con las células ASM de control sin incubación con eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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Efecto iEOS y rEOS sobre la contractilidad de los fibroblastos pulmonares
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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La eficiencia relativa de la capacidad de los fibroblastos pulmonares para contraer gel de colágeno después de un período de tiempo apropiado en cultivo celular combinado con iEOS y rEOS.
expresado como tamaño de gel vertido reducido en porcentaje, en comparación con los fibroblastos pulmonares de control, sin incubación con eosinófilos.
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De 6 a 12 meses
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efecto de iEOS y rEOS en los cambios de pliegue de las células ASM y la expresión de proteínas de fibroblastos pulmonares;
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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Expresión alterada de proteínas de fibroblastos pulmonares y células ASM seleccionadas, después de la incubación con iEOS y rEOS, expresada como cambios en el pliegue en comparación con las células de control, sin incubación con eosinófilos
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De 6 a 12 meses
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efecto de iEOS y rEOS en los cambios de pliegue de las células ASM y la expresión génica de proteínas de fibroblastos pulmonares;
Periodo de tiempo: De 6 a 12 meses
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Expresión génica de proteínas de fibroblastos pulmonares y células ASM seleccionadas alteradas, después de la incubación con iEOS y rEOS, expresada como cambios en el pliegue en comparación con las células de control, sin incubación con eosinófilos
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De 6 a 12 meses
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Colaboradores e Investigadores
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Publicaciones y enlaces útiles
Publicaciones Generales
- Mitchell PS, Parkin RK, Kroh EM, Fritz BR, Wyman SK, Pogosova-Agadjanyan EL, Peterson A, Noteboom J, O'Briant KC, Allen A, Lin DW, Urban N, Drescher CW, Knudsen BS, Stirewalt DL, Gentleman R, Vessella RL, Nelson PS, Martin DB, Tewari M. Circulating microRNAs as stable blood-based markers for cancer detection. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008 Jul 29;105(30):10513-8. doi: 10.1073/pnas.0804549105. Epub 2008 Jul 28.
- Barnig C, Alsaleh G, Jung N, Dembele D, Paul N, Poirot A, Uring-Lambert B, Georgel P, de Blay F, Bahram S. Circulating Human Eosinophils Share a Similar Transcriptional Profile in Asthma and Other Hypereosinophilic Disorders. PLoS One. 2015 Nov 2;10(11):e0141740. doi: 10.1371/journal.pone.0141740. eCollection 2015.
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- Mesnil C, Raulier S, Paulissen G, Xiao X, Birrell MA, Pirottin D, Janss T, Starkl P, Ramery E, Henket M, Schleich FN, Radermecker M, Thielemans K, Gillet L, Thiry M, Belvisi MG, Louis R, Desmet C, Marichal T, Bureau F. Lung-resident eosinophils represent a distinct regulatory eosinophil subset. J Clin Invest. 2016 Sep 1;126(9):3279-95. doi: 10.1172/JCI85664. Epub 2016 Aug 22.
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Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Anticipado)
Finalización primaria (Anticipado)
Finalización del estudio (Anticipado)
Fechas de registro del estudio
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Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
- Enfermedades de las vías respiratorias
- Enfermedades del sistema inmunológico
- Enfermedades pulmonares
- Hipersensibilidad, Inmediata
- Enfermedades hematológicas
- Enfermedades bronquiales
- Enfermedades Pulmonares Obstructivas
- Hipersensibilidad Respiratoria
- Hipersensibilidad
- Trastornos de los leucocitos
- Eosinofilia
- Síndrome hipereosinofílico
- Asma
- Eosinofilia pulmonar
Otros números de identificación del estudio
- LAB-1/2020
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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