Изучение клеток, собранных при протоковом лаваже у женщин, перенесших операцию по поводу протоковой карциномы in situ или другого рака молочной железы

ЦЕЛИ:

• Определите характер экспрессии регуляторных генов запрограммированной гибели клеток (PCD) bcl-2, bax и bcl-xL в культурах первичной протоковой карциномы in situ (DCIS).
• Определите, вызывает ли подавление путем генетических манипуляций антиапоптотических генов bcl-2 и/или bcl-xL, отдельно или в сочетании с физиологическими профилактическими дозами тамоксифена цитрата, самую высокую индукцию PCD в первичных клеточных культурах DCIS.
• Определите характер экспрессии регуляторных генов PCD bcl-2, bax и bcl-xL в клетках, полученных путем лаважа протоков молочной железы.
• Определите, вызывает ли подавление путем генетических манипуляций антиапоптотических генов bcl-2 и/или bcl-xL, отдельно или в сочетании с физиологическими профилактическими дозами тамоксифена цитрата, самую высокую индукцию PCD в клетках, полученных при лаваже протоков молочной железы.

ПЛАН: Пациентам делают лаваж молочной железы для сбора первичных эпителиальных клеток для цитологического анализа перед запланированной хирургической процедурой. Образцы ткани протоковой карциномы in situ (DCIS), полученные в результате хирургического вмешательства, используются для создания первичных клеточных культур DCIS. Клетки DCIS и первичные эпителиальные клетки, полученные путем лаважа протоков, анализируют на уровни эндогенных белков bcl-2, bax и bcl-xL с использованием вестерн-блоттинга и иммуногистохимического окрашивания для определения подходящей молекулы антисмыслового олигонуклеотида, которая будет использоваться для индукции апоптоза. . Клетки DCIS и первичные эпителиальные клетки, полученные путем лаважа протоков, обрабатывают антисмысловыми олигонуклеотидами и/или физиологической химиопрофилактической дозой тамоксифена цитрата, чтобы определить, какая из них обеспечит наибольшую индукцию гибели клеток. Влияние этих обработок на экспрессию белка анализируют вестерн-блоттингом и иммуногистохимией. Также анализируется влияние этих обработок на маркеры запрограммированной гибели клеток (PCD) (т.е. фрагментация ДНК и активация каспазы). Изменения экспрессии мРНК анализируют с помощью количественного анализа на основе ПЦР.

Результаты анализов молекулярных маркеров пациентам не предоставляются.