Мужское бесплодие, связанное с постинфекционным воспалительным синдромом (SIGMA)

Ход исследований. Поиск таймфрейма

• Продолжительность включений: 30 месяцев
• Длительность наблюдения за пациентом: 7 мес.
• Общая продолжительность исследования: 37 месяцев. В рамках охвата AMP бесплодные пары проходят консультацию у врачей-репродуктологов и одну у биологов. Между этими двумя посещениями проводится оценка баланса спермы (ОБСЛЕДОВАНИЕ № 0), включая посев спермы, спермограмму или тест на миграционную выживаемость (ТМС) и эластазу.

По случаю этого исследования будут систематически браться аликвоты для измерения 8OH-dG, фрагментации ДНК спермы и биохимии семенной жидкости.

В рамках этой стандартной балансовой оценки бесплодия возможно назначение эхографии и МРТ половых путей; в этом случае данные этих обследований будут собраны в форме отчета о болезни. Но специально эти экспертизы для розыска не задают.

При обнаружении лейкоцитоспермии ≥ 0,5*106/мл или повышении эластазы ≥ 500 нг/мл назначаются дозы 8OH-dG, фрагментация и биохимия семенной жидкости.

Затем пациенты будут осмотрены на консультации биолога (КОНСУЛЬТАЦИЯ БИОЛОГИИ № 0 = визит для включения и рандомизации).

• Если у пациентов 8OH-dG > 35 % и их культура спермы отрицательна, им будет предложено включить их в протокол, и рандомизация будет произведена в тот же день; пациенты будут получать или противовоспалительное лечение (преднизолон) является плацебо лечения.
• Если 8OH-dG < 35 %, им будет предложено участие в исследовании наблюдения за спонтанной эволюцией СО и СИ в течение 6 мес.

Первая полная оценка баланса будет проведена через 1 месяц (ОБСЛЕДОВАНИЕ № 1) после начала лечения в исследовании (преднизолон или плацебо), чтобы оценить эволюцию в конце лечения воспалительных и окислительных параметров. оценка баланса не будет проводиться у инклюзивного, но не рандомизированного пациента.

Пациенты, рандомизированные в исследовании, будут проходить лабораторные тесты, включая:

• Анализ спермы (лейкоцитоспермия)
• Мера окислительного стресса (анализ 8OHd гуанозина - анализ карбонила белка - фрагментация ДНК)
• Семенная биохимия (кислота 1-4) альфа-фосфатаза, цитрат, цинк, фруктоза, карнитин и глюкозидаза

Вторая оценка баланса будет запрошена через 6 месяцев (ОБСЛЕДОВАНИЕ № 2) после начала лечения по двум причинам: первая причина заключается в медленном улучшении параметров спермы. Если изменение спермы установилось в течение многих лет, оно не исчезнет за две недели. Фактически это опыт, который у нас есть.

Помимо продолжающегося в течение трех месяцев сперматогенеза, новый цикл продукции сперматозоидов можно оценить только спустя более трех месяцев после лечения. Вторая причина заключается в том, что повторные приступы хронических воспалений репродуктивного органа чрезвычайно часты, и именно для оценки этого показателя повторного приступа будет запрошена отдаленная оценка баланса при лечении или через 6 месяцев.

Этот обзор будет включать все тесты начальной оценки:

• Анализ спермы (лейкоцитоспермия)
• Мера окислительного стресса (анализ 8OHd гуанозина - анализ карбонила белка - фрагментация ДНК)
• Семенная биохимия (кислота 1-4) альфа-фосфатаза, цитрат, цинк, фруктоза, карнитин и глюкозидаза
• УЗИ половых путей и РМИ половых путей без введения какого-либо соединения

Этот визит будет запланирован для всех пациентов, независимо от того, рандомизированы они или нет. Во время этого визита будут проанализированы результаты анализов, проведенных через 1 месяц и 6 месяцев после начала лечения. Исследователь собирает данные о неблагоприятных событиях, произошедших после визита для рандомизации.

Пациентам, у которых при обследовании через 6 месяцев наблюдается очень значительное улучшение параметров спермы, предложат криоконсервацию спермы.

Анализы и анализы спермы Сборы спермы будут проводиться в Лаборатории репродуктивной биологии каждого участвующего исследовательского центра.

Большинство тестов и анализов будут централизованы в больнице Кочин. Измерение эластазы Анализы эластазы будут централизованы в Лаборатории репродуктивной биологии больницы Кочин. Анализы будут проводиться из 150 мкл общей спермы, собранной после разжижения и замороженной при -20°C.

Тест на выживаемость при миграции (MST) Этот тест будет проводиться локально в каждом участвующем центре. Слайд-мазок будет сделан для централизованного анализа морфологии, чтобы избежать каких-либо «центральных» эффектов.

Биохимия спермы Биохимия спермы будет централизована в Лаборатории биохимии больницы Кочин. Этот анализ проводится на общей сперме, собранной после разжижения, включая анализы кислой фосфатазы, цитрата, цинка, фруктозы, карнитина и 1-4.альфа. Глюкозидаза Собирают сперму, центрифугируют при 600 g в течение 5 минут. После центрифугирования 500 мкл супернатанта замораживают при -20°С и используют для биохимического семенного анализа.

Измерение окислительного стресса Степень окислительного стресса будет централизованно оцениваться в больнице Кочин. Этот анализ проводится на общей сперме, собранной после разжижения, включая определение 8OHd-гуанозина, дозы карбонила белка и фрагментации ДНК.

Сперму собирают центрифугированием при 600 г в течение 5 минут. После центрифугирования:

• 250 мкл супернатанта замораживают при -20°С и используют для определения карбонила белка.
• Осадок будет использоваться для анализа 8OHdгуанозина и фрагментации ДНК. Измерение параметров движения сперматозоидов с помощью CASA Измерение параметров движения сперматозоидов с помощью CASA будет проводиться локально в каждом участвующем центре.

УЗИ и МРТ половых путей УЗИ и МРТ половых путей будут проводиться в центральном рентгенологическом отделении больницы Неккер.

Сохранение оставшегося образца спермы Пациентам с очень значительным улучшением параметров спермы во время обследования через 6 месяцев будет предложено самосохранение спермы для любой последующей попытки ВРТ после окончания исследования.

С другой стороны, оставшийся образец спермы, за исключением случаев возражения со стороны пациента, будет храниться после окончания исследования для последующего использования в будущих исследованиях фертильности и воспаления. Эта коллекция будет храниться в больнице CECOS - Cochin Hospital, Bldg. Cassini - 27 rue du FAUBOURG St Jacques, 75014 Paris под руководством профессора Жана-ФИЛИППА Вольфа.

Правила прекращения Пациенты могут прекратить свое участие в исследовании, если они того пожелают, в любое время и по любой причине или по решению исследователя. Однако лечение не следует прекращать внезапно.

Правила прекращения участия лица, ищущего

• Плохое соблюдение протокола
• интеркуррентное заболевание между визитом включения и визитом через 1 месяц, требующим прекращения исследования. За исследованием следует наблюдение.

Процедуры мониторинга выходного теста Все выходные тесты должны быть задокументированы, и исследователь должен указать причину. Для пациентов, признанных потерявшими зрение, формы истории болезни должны быть заполнены до последнего визита. Исследователь приложит все усилия, чтобы связаться с пациентом и узнать причину выхода из исследования и состояние его здоровья.

Последствия Пациенты, прекратившие участие в исследовании, не будут повторно включены в исследование. Их количество не эффективно повторно используется. Эти пациенты по-прежнему будут наблюдаться в нерандомизированной части исследования.