Infertilità maschile correlata alla sindrome infiammatoria post-infezione (SIGMA)

Progresso della ricerca. Ricerca temporale

• Durata delle inclusioni: 30 mesi
• Durata del follow-up del paziente: 7 mesi
• Durata totale dello studio: 37 mesi Nell'ambito della loro copertura in AMP, le coppie sterili hanno un consulto con i medici della riproduzione e uno con i biologi. Tra queste due visite viene effettuata una valutazione dell'equilibrio spermatico (ESAME N°0) comprendente una coltura seminale, uno spermogramma o un test di sopravvivenza alla migrazione (TMS) e un elastasi.

In occasione di tale esame verranno sistematicamente prelevate aliquote per la misura dell'8OH-dG, della frammentazione del DNA spermatico e della biochimica seminale.

Nell'ambito di questa valutazione standard dell'equilibrio dell'infertilità, è possibile che vengano prescritte un'ecografia e una risonanza magnetica delle vie genitali; in caso affermativo, i dati di tali esami saranno raccolti nel modulo case report. Ma questi esami non saranno specificamente richiesti per la ricerca.

Se si riscontra una leucocitospermia ≥ 0,5*106/ml o un aumento dell'elastasi ≥ 500 ng/ml, verranno effettuati i dosaggi di 8OH-dG, la frammentazione e la biochimica seminale.

I pazienti saranno poi visti in consultazione di biologia (CONSULTAZIONE DI BIOLOGIA N°0 = visita di inclusione e randomizzazione).

• Se i pazienti presentano 8OH-dG > 35%, e la loro coltura seminale è negativa, verrà proposto loro di essere inclusi nel protocollo e la randomizzazione verrà effettuata il giorno stesso; i pazienti riceveranno o un trattamento antinfiammatorio (Prednisone) è un trattamento placebo.
• Se 8OH-dG < 35 % verrà proposto loro di partecipare allo studio del follow-up dell'evoluzione spontanea della SO e della SI nell'arco di 6 mesi.

Una prima valutazione completa dell'equilibrio sarà effettuata in 1 mese (ESAME N°1) dopo l'inizio del trattamento nello studio (Prednisone o placebo) in modo da stimare l'evoluzione alla fine del trattamento dei parametri infiammatori e ossidativi Questo la valutazione dell'equilibrio non sarà realizzata presso il paziente inclusivo ma non randomizzato.

I pazienti randomizzati nello studio verranno sottoposti a test di laboratorio tra cui:

• Un'analisi del seme (leucocitospermia)
• Una misura dello stress ossidativo (saggio della guanosina 8OHd - dosaggio del carbonile proteico - frammentazione del DNA)
• A biochimica seminale (acido 1-4) alfa fosfatasi, citrato, zinco, fruttosio, carnitina e glucosidasi

Una seconda valutazione dell'equilibrio verrà richiesta 6 mesi (ESAME N°2) dall'inizio del trattamento per due motivi: il primo motivo è che il miglioramento dei parametri spermatici si sta lentamente facendo. Se un cambiamento spermatico si è stabilizzato nel corso degli anni, non scomparirà entro due settimane. È effettivamente l'esperienza che ne abbiamo.

Oltre alla continuazione della spermatogenesi per tre mesi, un nuovo ciclo di produzione di spermatozoi può essere stimato solo dopo più di tre mesi dal trattamento. Il secondo motivo è che i secondi reati delle infiammazioni croniche dell'organo riproduttivo sono estremamente frequenti ed è per stimare questo tasso di secondo reato che verrà richiesta la valutazione di bilancio a distanza di più dal trattamento o in 6 mesi.

Questa revisione includerà tutti i test di valutazione iniziale:

• Un'analisi del seme (leucocitospermia)
• Una misura dello stress ossidativo (saggio della guanosina 8OHd - dosaggio del carbonile proteico - frammentazione del DNA)
• A biochimica seminale (acido 1-4) alfa fosfatasi, citrato, zinco, fruttosio, carnitina e glucosidasi
• Un'ecografia del tratto genitale e del tratto genitale RMI senza iniezione di alcun composto

Questa visita sarà programmata per tutti i pazienti, randomizzati o meno. Durante questa visita verranno analizzati i risultati dei test effettuati a 1 mese ea 6 mesi dall'inizio del trattamento. Lo sperimentatore raccoglierà gli eventi avversi che si sono verificati dopo la visita di randomizzazione.

I pazienti che durante l'esame in 6 mesi hanno un miglioramento molto significativo dei loro parametri seminali proporranno la crioconservazione del loro sperma.

Saggi e analisi sul seme I prelievi del seme verranno effettuati presso il Laboratorio di Biologia della Riproduzione di ciascun centro di ricerca partecipante.

La maggior parte dei test e delle analisi sarà centralizzata presso il Cochin Hospital. Misurazione dell'elastasi I test dell'elastasi saranno centralizzati nel Laboratorio di Biologia della Riproduzione, Ospedale Cochin. I saggi saranno eseguiti da 150 µl di spermatozoi totali raccolti dopo liquefazione e congelati a -20°C.

Migration Survival Test (MST) Questo test sarà svolto localmente in ogni centro partecipante. Verrà realizzato un vetrino di striscio per un'analisi centralizzata della morfologia, per evitare qualsiasi effetto "centro".

Biochimica seminale Il seminale biochimico sarà centralizzato nel Laboratorio di Biochimica, Ospedale Cochin. Questo saggio, effettuato su spermatozoi totali raccolti dopo la liquefazione, include saggi di fosfatasi acida, citrato, zinco, fruttosio, carnitina e 1-4.alfa Glucosidasi Il seme verrà raccolto, centrifugato a 600g per 5 minuti. Dopo la centrifugazione, 500μl del surnatante saranno congelati a -20°C e utilizzati per seminale biochimico.

Misurazione dello stress ossidativo L'entità dello stress ossidativo sarà valutata centralmente presso l'ospedale di Cochin. Questo saggio, effettuato su spermatozoi totali raccolti dopo la liquefazione, comprende la determinazione della 8OHd-Guanosina, il dosaggio del carbonile proteico e la frammentazione del DNA.

Il seme verrà raccolto centrifugato a 600g per 5 minuti. Dopo la centrifugazione:

• 250μl del supernatante vengono congelati a -20°C e utilizzati per la determinazione del carbonile proteico.
• Il pellet verrà utilizzato per il dosaggio della 8OHdguanosina e per la frammentazione del DNA. Misurazione dei parametri di movimento degli spermatozoi mediante CASA La misurazione dei parametri di movimento degli spermatozoi mediante CASA sarà eseguita localmente in ciascun centro partecipante.

Ultrasuoni e risonanza magnetica del tratto genitale Gli ultrasuoni e la risonanza magnetica saranno eseguiti nel tratto genitale nel reparto di radiologia centrale dell'ospedale Necker.

Conservazione del rimanente campione di seme Per i pazienti con un miglioramento molto significativo dei loro parametri seminali durante l'esame a 6 mesi, verrà offerta l'autoconservazione del seme per ogni successivo tentativo di ART dopo la fine dello studio.

D'altra parte, il restante campione di seme, salvo opposizione del paziente, verrà conservato dopo la fine della ricerca per un successivo utilizzo in future ricerche sulla fertilità e l'infiammazione. Questa collezione sarà conservata presso CECOS - Cochin Hospital, Bldg. Cassini - 27 rue du FAUBOURG St Jacques, 75014 Parigi sotto la supervisione del professor Jean-PHILIPPE Wolf.

Regole di interruzione I pazienti possono interrompere la loro partecipazione alla ricerca se lo desiderano, in qualsiasi momento e per qualsiasi motivo, o su decisione dello sperimentatore. Tuttavia, il trattamento non deve essere interrotto improvvisamente.

Fermare le regole per la partecipazione di una persona che cerca

• Scarsa aderenza al protocollo
• malattia intercorrente tra la visita di inclusione e la visita a 1 mese che richiede la cessazione dello studio. Dopo lo studio c'è quello della sorveglianza.

Procedure per il monitoraggio del test di output Tutti i test di output devono essere documentati e lo sperimentatore deve specificarne il motivo. Per i pazienti considerati non vedenti, i moduli di segnalazione dei casi devono essere compilati fino all'ultima visita. Lo sperimentatore farà ogni sforzo per contattare il paziente e per conoscere il motivo dell'abbandono della sperimentazione e il suo stato di salute.

Conseguenze I pazienti che hanno abbandonato lo studio non saranno inclusi nuovamente nello studio. I loro numeri non vengono effettivamente riutilizzati. Questi pazienti saranno comunque seguiti nella parte non randomizzata dello studio.