Niepłodność męska związana z zespołem zapalenia poinfekcyjnego (SIGMA)

Postęp badań. Wyszukiwanie w ramach czasowych

• Czas trwania inkluzji: 30 miesięcy
• Czas obserwacji pacjenta: 7 miesięcy
• Całkowity czas trwania badania: 37 miesięcy W ramach swojego reportażu w AMP, niepłodne pary mają konsultacje z lekarzami rozrodu i jedną z biologami. Pomiędzy tymi dwiema wizytami wykonywana jest ocena równowagi nasiennej (BADANIE NR 0) obejmująca posiew nasienia, spermogram lub test przeżycia migracji (TMS) oraz elastazę.

Przy okazji tego badania systematycznie pobierane będą próbki do pomiaru 8OH-dG, fragmentacji DNA nasienia i biochemii nasienia.

W ramach tej standardowej bilansowej oceny niepłodności możliwe jest przepisanie echografii i rezonansu magnetycznego narządów płciowych; w takim przypadku dane z tych badań zostaną zebrane w formularzu opisu przypadku. Ale te badania nie będą specjalnie wymagane do wyszukiwania.

W przypadku stwierdzenia leukocytospermii ≥ 0,5*106/ml lub wzrostu elastazy ≥ 500 ng/ml, zostaną wykonane dawki 8OH-dG, fragmentacja i biochemia nasienia.

Następnie pacjenci będą przyjmowani na konsultację biologiczną (KONSULTACJA BIOLOGICZNA NR 0 = wizyta włączenia i randomizacji).

• Jeśli pacjent ma 8OH-dG > 35%, a wynik posiewu nasienia jest ujemny, zasugeruje się włączenie go do protokołu i tego samego dnia zostanie przeprowadzona randomizacja; pacjenci będą otrzymywać lub leczenie przeciwzapalne (prednizon) jest leczeniem placebo.
• Jeśli 8OH-dG < 35% zostanie im zasugerowany udział w badaniu obserwacji spontanicznej ewolucji SO i SI w ciągu 6 miesięcy.

Pierwsza pełna ocena równowagi zostanie przeprowadzona w ciągu 1 miesiąca (BADANIE NR 1) po rozpoczęciu leczenia w ramach badania (prednizon lub placebo), aby oszacować zmiany parametrów zapalnych i oksydacyjnych pod koniec leczenia. ocena równowagi nie zostanie przeprowadzona u pacjentów włączonych, ale nie u pacjentów zrandomizowanych.

Pacjenci zrandomizowani do badania zostaną poddani badaniom laboratoryjnym obejmującym:

• Badanie nasienia (leukocytospermia)
• Miara stresu oksydacyjnego (test guanozyny 8OHd - test karbonylu białka - fragmentacja DNA)
• Seminal biochemia (kwas 1-4) alfa fosfataza, cytrynian, cynk, fruktoza, karnityna i glukozydaza

Druga ocena równowagi zostanie przeprowadzona po 6 miesiącach (BADANIE NR 2) po rozpoczęciu leczenia z dwóch powodów: po pierwsze dlatego, że poprawa parametrów nasienia następuje powoli. Jeśli zmiana nasienia ustabilizuje się przez lata, nie zniknie w ciągu dwóch tygodni. W rzeczywistości jest to doświadczenie, które mamy na ten temat.

Oprócz trwającej ponad trzy miesiące spermatogenezy nowy cykl wytwarzania plemników można oszacować dopiero po upływie trzech miesięcy od zabiegu. Drugim powodem jest to, że drugie przewinienia przewlekłych stanów zapalnych narządu rodnego są niezwykle częste i to właśnie oszacowanie tego wskaźnika drugiego urazu będzie wymagało oceny równowagi zdalnie przez leczenie lub za 6 miesięcy.

Przegląd ten obejmie wszystkie testy wstępnej oceny:

• Badanie nasienia (leukocytospermia)
• Miara stresu oksydacyjnego (test guanozyny 8OHd - test karbonylu białka - fragmentacja DNA)
• Seminal biochemia (kwas 1-4) alfa fosfataza, cytrynian, cynk, fruktoza, karnityna i glukozydaza
• USG dróg rodnych i dróg rodnych RMI bez iniekcji jakiegokolwiek związku

Ta wizyta zostanie zaplanowana dla wszystkich pacjentów, niezależnie od tego, czy są randomizowani, czy nie. Podczas tej wizyty zostaną przeanalizowane wyniki badań przeprowadzonych po 1 miesiącu i 6 miesiącach od rozpoczęcia leczenia. Badacz zbierze zdarzenia niepożądane, które wystąpiły od wizyty z randomizacją.

Pacjenci, u których podczas badania za 6 miesięcy nastąpi bardzo wyraźna poprawa parametrów nasienia, zaproponują kriokonserwację nasienia.

Testy i analizy nasienia Pobrania nasienia będą wykonywane w Laboratorium Biologii Rozrodu każdego uczestniczącego ośrodka badawczego.

Większość testów i analiz będzie scentralizowana w szpitalu Cochin. Pomiar elastazy Testy elastazy będą scentralizowane w Laboratorium Biologii Rozrodu Szpitala Cochin. Testy zostaną przeprowadzone z 150 µl wszystkich plemników pobranych po upłynnieniu i zamrożonych w temperaturze -20°C.

Migration Survival Test (MST) Ten test zostanie przeprowadzony lokalnie w każdym uczestniczącym ośrodku. Zostanie sporządzony rozmaz do scentralizowanej analizy morfologii, aby uniknąć efektu „centrum”.

Biochemia nasienia Biochemia nasienia zostanie scentralizowana w Laboratorium Biochemii Szpitala Cochin. To badanie, przeprowadzane na wszystkich plemnikach zebranych po upłynnieniu, w tym testy kwaśnej fosfatazy, cytrynianu, cynku, fruktozy, karnityny i 1-4.alfa Glukozydaza Nasienie zostanie pobrane, odwirowane przy 600 g przez 5 minut. Po odwirowaniu 500 μl supernatantu zostanie zamrożone w temperaturze -20°C i wykorzystane do biochemicznego nasienia.

Pomiar stresu oksydacyjnego Stopień stresu oksydacyjnego będzie oceniany centralnie w szpitalu w Cochin. Oznaczenie to przeprowadza się na plemnikach ogółem pobranych po upłynnieniu, w tym oznacza się 8OHd-guanozynę, dawkę karbonylku białka oraz fragmentację DNA.

Nasienie zostanie pobrane odwirowane przy 600 g przez 5 minut. Po odwirowaniu:

• 250 μl supernatantu zamrozić w temperaturze - 20°C i użyć do oznaczenia karbonylu białka.
• Osad zostanie użyty do oznaczenia 8OHdguanozyny i fragmentacji DNA. Pomiar parametrów ruchu plemników przez CASA Pomiar parametrów ruchu plemników przez CASA zostanie przeprowadzony lokalnie w każdym uczestniczącym ośrodku.

USG i MRI narządów płciowych USG i MRI dróg rodnych będą wykonywane w centralnym oddziale radiologii szpitala Necker.

Przechowywanie pozostałej próbki nasienia Pacjentom, u których podczas badania po 6 miesiącach nastąpiła bardzo istotna poprawa parametrów nasienia, po zakończeniu badania zostanie zaproponowana samokonserwacja nasienia do ewentualnej kolejnej próby ART.

Z drugiej strony pozostała próbka nasienia, z wyjątkiem przypadku sprzeciwu pacjenta, zostanie zatrzymana po zakończeniu badań do późniejszego wykorzystania w przyszłych badaniach nad płodnością i stanami zapalnymi. Ta kolekcja będzie przechowywana w CECOS - Cochin Hospital, Bldg. Cassini - 27 rue du FAUBOURG St Jacques, 75014 Paryż pod kierunkiem profesora Jean-PHILIPPE Wolfa.

Zasady przerywania badania Pacjenci mogą zrezygnować z udziału w badaniu, jeśli sobie tego życzą, w dowolnym czasie iz dowolnego powodu lub na podstawie decyzji badacza. Nie należy jednak nagle przerywać leczenia.

Zatrzymanie zasad udziału osoby poszukującej

• Słabe przestrzeganie protokołu
• współistniejąca choroba między wizytą włączenia a wizytą w 1 miesiącu, wymagająca przerwania badania. Po badaniu następuje nadzór.

Procedury monitorowania testów wyjściowych Wszystkie testy wyjściowe powinny być udokumentowane, a badacz musi określić przyczynę. W przypadku pacjentów uznanych za niewidomych karty przypadków należy wypełnić do ostatniej wizyty. Badacz dołoży wszelkich starań, aby skontaktować się z pacjentem i poznać przyczynę opuszczenia badania oraz jego stan zdrowia.

Konsekwencje Pacjenci, którzy zrezygnowali z badania, nie zostaną ponownie włączeni do badania. Ich numery nie są skutecznie ponownie wykorzystywane. Ci pacjenci będą nadal obserwowani w nierandomizowanej części badania.