A fertőzés utáni gyulladásos szindrómával összefüggő férfi meddőség (SIGMA)

A kutatás előrehaladása. Időkeret keresése

• A bevonás időtartama: 30 hónap
• A betegkövetés időtartama: 7 hónap
• A vizsgálat teljes időtartama: 37 hónap A meddő párok az AMP-es lefedettség keretein belül a szaporodási orvosokkal és egy biológussal konzultálnak. E két látogatás között spermaegyensúly-értékelést végeznek (0. VIZSGÁLAT), amely spermakultúrát, spermogrammot vagy migrációs túlélési tesztet (TMS) és elasztázt tartalmaz.

E vizsgálat alkalmával szisztematikusan alikvot részeket vesznek a 8OH-dG mérésére, a spermatikus DNS fragmentációjára és a szeminális biokémiára.

A meddőség ezen standard mérlegelése keretében lehetséges, hogy a nemi szervek echográfiáját és MRI-jét írják elő; ha igen, akkor ezeknek a vizsgálatoknak az adatait az esetbejelentő űrlapon gyűjtjük össze. De ezeket a vizsgálatokat nem külön kérik a kereséshez.

Ha leukocytospermia ≥ 0,5*106/ml vagy elasztáz növekedés ≥ 500 ng/ml, akkor a 8OH-dG dózisokat, a fragmentációt és a szeminális biokémiát kell elvégezni.

A betegeket ezután a biológiával való konzultáció során látják meg (0. BIOLÓGIAI KONZULTÁCIÓ = felvételi és randomizációs látogatás).

• Ha a betegeknél a 8OH-dG > 35%, és sperma tenyésztése negatív, javasoljuk, hogy vegyék fel őket a protokollba, és még aznap megtörténik a randomizálás; a betegek kapnak, vagy gyulladáscsökkentő kezelést (prednizont) alkalmaznak, amely placebo.
• Ha a 8OH-dG < 35 %, akkor javasoljuk, hogy vegyenek részt a SO és az SI spontán evolúciójának 6 hónapos követésének vizsgálatában.

Az első teljes egyensúlyi értékelést 1 hónapon belül elvégzik (1. VIZSGÁLAT) a vizsgálati kezelés (prednizon vagy placebo) kezdete után, hogy megbecsüljék a gyulladásos és oxidatív paraméterek kezelés végén bekövetkezett alakulását. Az egyensúlyfelmérés az inkluzív, de nem randomizált betegnél nem valósul meg.

A vizsgálatban véletlenszerűen kiválasztott betegeket laboratóriumi vizsgálatoknak vetik alá, beleértve:

• Ondóelemzés (leukocitospermia)
• Az oxidatív stressz mértéke (8OHd guanozin vizsgálat - fehérje karbonil vizsgálata - DNS fragmentáció)
• A szeminális biokémia (sav 1-4) alfa-foszfatáz, citrát, cink, fruktóz, karnitin és glükozidáz

A kezelés megkezdése után 6 hónappal (2. VIZSGÁLAT) egy második mérlegvizsgálatra két okból kerül sor: az első ok az, hogy a spermatikus paraméterek lassan javulnak. Ha egy spermatikus változás évek alatt rendeződik, nem fog eltűnni két hét alatt. Gyakorlatilag ez a tapasztalatunk, amit ezzel kapcsolatban szereztünk.

A három hónapon át tartó spermatogenezis mellett csak több mint három hónappal a kezelés után becsülhető meg egy új spermiumtermelési ciklus. A második ok, hogy a reproduktív szerv krónikus gyulladásainak másodszori megbetegedései rendkívül gyakoriak, és a második sérelmek arányának becslése alapján távolról, vagy 6 hónap múlva több lesz az egyensúlyfelmérés.

Ez a felülvizsgálat magában foglalja a kezdeti értékelés összes tesztjét:

• Ondóelemzés (leukocitospermia)
• Az oxidatív stressz mértéke (8OHd guanozin vizsgálat - fehérje karbonil vizsgálata - DNS fragmentáció)
• A szeminális biokémia (sav 1-4) alfa-foszfatáz, citrát, cink, fruktóz, karnitin és glükozidáz
• A genitális traktus és a nemi traktus RMI ultrahangja vegyület injekciója nélkül

Ezt a látogatást minden beteg számára ütemezzük, akár véletlenszerűen, akár nem. A látogatás során a kezelés megkezdése után 1 és 6 hónappal végzett vizsgálatok eredményeit elemzik. A vizsgáló összegyűjti a randomizációs látogatás óta előforduló nemkívánatos eseményeket.

Azok a betegek, akiknél a vizsgálat során 6 hónapon belül igen jelentős javulás tapasztalható spermaparamétereikben, sperma mélyhűtését javasolják.

Az ondó vizsgálatai és elemzése A spermagyűjtést minden résztvevő kutatóközpont Reproduktív Biológiai Laboratóriumában végzik.

A legtöbb vizsgálat és elemzés a Cochin Kórházban lesz központosítva. Az elasztáz mérése Az elasztáz teszteket a Cochin Kórház Reprodukciós Biológiai Laboratóriumában fogják központosítani. A vizsgálatokat a cseppfolyósítás után összegyűjtött és -20 °C-on lefagyasztott 150 µl spermiumból végezzük.

Migrációs túlélési teszt (MST) Ezt a tesztet minden résztvevő központban helyben végzik el. A morfológia központosított elemzéséhez kenetlemezt készítenek, hogy elkerüljék a "központi" hatásokat.

Seminal Biochemistry A biokémiai szeminárium a Cochin Kórház Biokémiai Laboratóriumában lesz központosítva. Ezt a vizsgálatot a cseppfolyósítás után gyűjtött összes spermán végezzük, beleértve a savas foszfatáz, citrát, cink, fruktóz, karnitin és 1-4 alfa vizsgálatokat is. Glükozidáz A spermát összegyűjtjük, 600 g-vel centrifugáljuk 5 percig. A centrifugálás után a felülúszóból 500 μl-t -20 °C-on lefagyasztanak, és biokémiai ondóanyaghoz használják fel.

Az oxidatív stressz mérése Az oxidatív stressz mértékét központilag a Cochin Kórházban mérik fel. Ezt a vizsgálatot a cseppfolyósítás után gyűjtött összes spermiumon végezték el, beleértve a 8OHd-guanozin meghatározását, a fehérje karbonil dózisát és a DNS fragmentációt.

A spermát 600 g-vel centrifugáljuk 5 percig. Centrifugálás után:

• A felülúszóból 250 μl-t le kell fagyasztani -20 °C-ra, és felhasználni a fehérje-karbonil meghatározására.
• A pelletet a 8OHdguanozin és a DNS fragmentáció vizsgálatára használjuk fel. A spermiumok mozgási paramétereinek mérése CASA-val A spermiumok mozgási paramétereinek CASA-val történő mérése minden résztvevő központban helyben történik.

A nemi traktus ultrahang- és MR-vizsgálata Ultrahang- és MRI-vizsgálat a nemi traktusban a Necker kórház központi radiológiai osztályán történik.

A fennmaradó spermaminta konzerválása Azon betegek számára, akiknél a spermaparaméterek 6 hónapos vizsgálata során nagyon szignifikáns javulást mutatnak, felajánljuk az ondó önmegőrzését a vizsgálat befejezését követő bármely további ART-kísérlethez.

Másrészt a fennmaradó spermamintát, kivéve, ha a páciens tiltakozik, a kutatás befejezése után megőrzik későbbi termékenységi és gyulladásos kutatások céljára. Ezt a gyűjteményt a CECOS - Cochin Hospital, Bldg. Cassini - 27 rue du FAUBOURG St Jacques, 75014 Párizs, Jean-PHILIPPE Wolf professzor felügyelete alatt.

Leállítási szabályok A betegek a kutatásban való részvételüket, ha akarják, bármikor és bármilyen okból, vagy a vizsgáló döntése alapján megszakíthatják. A kezelést azonban nem szabad hirtelen abbahagyni.

A kereső személy részvételének leállítási szabályai

• A protokoll rossz betartása
• interkurrens betegség a felvételi vizit és az 1 hónapos vizit között, amely a vizsgálat leállítását igényli. A vizsgálatot követően a megfigyelés.

A kimeneti teszt megfigyelésének eljárásai Minden kimeneti tesztet dokumentálni kell, és a vizsgálónak meg kell adnia az okot. A látásvesztettnek tekintett betegek esetében az esetbejelentő űrlapokat az utolsó látogatásig ki kell tölteni. A vizsgáló minden tőle telhetőt megtesz annak érdekében, hogy kapcsolatba lépjen a pácienssel, és megtudja a vizsgálat elhagyásának okát és egészségi állapotát.

Következmények Azokat a betegeket, akik kiléptek a vizsgálatból, nem vonják be újra a vizsgálatba. Számukat nem hasznosítják újra hatékonyan. Ezeket a betegeket továbbra is követni fogják a vizsgálat nem randomizált részében.