Infertilidad Masculina Relacionada Con Síndrome Inflamatorio Post Infección (SIGMA)

Progreso de la investigación. Búsqueda de marco de tiempo

• Duración de las inclusiones: 30 meses
• Duración del seguimiento del paciente: 7 meses
• Duración total del estudio: 37 meses En el marco de su cobertura en AMP, las parejas estériles tienen una consulta con los médicos de la reproducción y otra con los biólogos. Entre estas dos visitas se realiza una evaluación del equilibrio espermático (EXAMEN N°0) que incluye un cultivo de semen, un espermograma o prueba de supervivencia a la migración (TMS) y una elastasa.

Con motivo de este examen se tomarán sistemáticamente alícuotas para la medida de 8OH-dG, fragmentación del ADN espermático y bioquímica seminal.

En el marco de esta evaluación de equilibrio estándar de la infertilidad, es posible que se prescriban una ecografía y una resonancia magnética de las vías genitales; si es el caso, los datos de estos exámenes se recogerán en el formulario de informe de caso. Pero estos exámenes no se pedirán específicamente para la búsqueda.

Si se descubre una leucocitospermia ≥ 0,5*106/ml o un aumento de la elastasa ≥ 500 ng/ml, se realizarán las dosificaciones de 8OH-dG, la fragmentación y la bioquímica seminal.

Los pacientes serán entonces atendidos en consulta de biología (CONSULTA DE BIOLOGÍA N°0 = visita de inclusión y aleatorización).

• Si los pacientes presentan 8OH-dG > 35 %, y que su cultivo de semen es negativo, se les sugerirá incluirlos en el protocolo y la aleatorización se realizará ese mismo día; los pacientes recibirán o un tratamiento antiinflamatorio (Prednisona) es un tratamiento placebo.
• Si 8OH-dG < 35 % se les propondrá participar en el estudio de seguimiento de la evolución espontánea del SO y del SI durante 6 meses.

Se realizará una primera evaluación completa del balance en 1 mes (EXAMEN N°1) después del inicio del tratamiento en estudio (Prednisona o placebo) para estimar la evolución al final del tratamiento de los parámetros inflamatorios y oxidativos. Este la evaluación del equilibrio no se realizará en el paciente inclusivo pero no aleatorizado.

A los pacientes asignados al azar en el estudio se les realizarán pruebas de laboratorio que incluyen:

• Un análisis de semen (leucocitospermia)
• Una medida del estrés oxidativo (ensayo de guanosina 8OHd - ensayo de proteína carbonilo - fragmentación del ADN)
• Una bioquímica seminal (ácido 1-4) alfa fosfatasa, citrato, zinc, fructosa, carnitina y glucosidasa

Se solicitará una segunda evaluación de equilibrio a los 6 meses (EXAMEN N°2) después del inicio del tratamiento por dos motivos: el primero es que la mejoría de los parámetros espermáticos se hace lentamente. Si un cambio espermático se estableciera durante años no va a desaparecer en la quincena. Es efectivamente la experiencia que tenemos de ella.

Además de la continuación de la espermatogénesis durante tres meses, se puede estimar un nuevo ciclo de producción de espermatozoides sólo más de tres meses después del tratamiento. La segunda razón es que las segundas ofensas de las inflamaciones crónicas del órgano reproductivo son sumamente frecuentes y es para estimar esta tasa de segundas ofensas que se pedirá remotamente la valoración del balance más por el tratamiento o en 6 meses.

Esta revisión incluirá todas las pruebas de evaluación inicial:

• Un análisis de semen (leucocitospermia)
• Una medida del estrés oxidativo (ensayo de guanosina 8OHd - ensayo de proteína carbonilo - fragmentación del ADN)
• Una bioquímica seminal (ácido 1-4) alfa fosfatasa, citrato, zinc, fructosa, carnitina y glucosidasa
• Una ecografía del tracto genital y RMI del tracto genital sin inyección de ningún compuesto

Esta visita se programará para todos los pacientes, ya sean aleatorizados o no. Durante esta visita se analizarán los resultados de las pruebas realizadas al mes ya los 6 meses de iniciado el tratamiento. El investigador recopilará los eventos adversos que ocurrieron desde la visita de aleatorización.

Los pacientes que durante el examen en 6 meses tengan una mejoría muy significativa en sus parámetros seminales propondrán criopreservar su esperma.

Ensayos y análisis del semen Las colectas de semen se realizarán en el Laboratorio de Biología de la Reproducción de cada centro de investigación participante.

La mayoría de los ensayos y análisis se centralizarán en el Hospital Cochin. Medición de elastasa Los ensayos de elastasa se centralizarán en el Laboratorio de Biología Reproductiva del Hospital Cochin. Los ensayos se realizarán a partir de 150 µl de espermatozoides totales recogidos tras la licuefacción y congelados a -20°C.

Prueba de Supervivencia a la Migración (MST) Esta prueba se realizará localmente en cada centro participante. Se realizará un frotis para un análisis centralizado de la morfología, para evitar cualquier efecto de "centro".

Bioquímica Seminal La bioquímica seminal estará centralizada en el Laboratorio de Bioquímica del Hospital Cochin. Este ensayo, llevado a cabo en el total de espermatozoides recolectados después de la licuefacción, incluye ensayos de fosfatasa ácida, citrato, zinc, fructosa, carnitina y 1-4.alfa Glucosidasa El semen será recolectado, centrifugado a 600g por 5 minutos. Después de la centrifugación, 500 μl del sobrenadante se congelarán a - 20 ° C y se utilizarán para la bioquímica seminal.

Medición del estrés oxidativo El alcance del estrés oxidativo se evaluará de forma centralizada en el Hospital Cochin. Este ensayo, realizado sobre el total de espermatozoides recogidos tras la licuefacción, incluye la determinación de 8OHd-Guanosina, la dosificación de la proteína carbonilo y la fragmentación del ADN.

El semen se recogerá centrifugado a 600g durante 5 minutos. Después de la centrifugación:

• Se congelan 250μl del sobrenadante a - 20°C y se utilizan para la determinación de carbonilo proteico.
• El sedimento se utilizará para el ensayo de 8OHdguanosina y fragmentación de ADN. Medición de los parámetros de movimiento espermático por CASA La medición de los parámetros de movimiento espermático por CASA se realizará localmente en cada centro participante.

Ultrasonido y resonancia magnética del tracto genital Los ultrasonidos y la resonancia magnética se realizarán en el tracto genital en el departamento central de radiología del hospital Necker.

Conservación de la muestra restante de semen Para los pacientes con una mejoría muy significativa en sus parámetros seminales durante el examen a los 6 meses, se ofrecerá la autoconservación de semen para cualquier intento posterior de TAR después de finalizar el estudio.

Por otra parte, la muestra restante de semen, salvo oposición del paciente, se conservará una vez finalizada la investigación para su uso posterior en futuras investigaciones sobre fertilidad e inflamación. Esta colección se mantendrá en CECOS - Cochin Hospital, Bldg. Cassini - 27 rue du FAUBOURG St Jacques, 75014 París bajo la supervisión del profesor Jean-PHILIPPE Wolf.

Normas de suspensión Los pacientes pueden interrumpir su participación en la investigación si así lo desean, en cualquier momento y por cualquier motivo, o por decisión del investigador. Sin embargo, el tratamiento no debe suspenderse repentinamente.

Reglas de detención para la participación de una persona que busca

• Mala adherencia al protocolo.
• enfermedad intercurrente entre la visita de inclusión y la visita al mes que requirió el cese del estudio. El siguiente al estudio es el de la vigilancia.

Procedimientos para monitorear la prueba de salida Todas las pruebas de salida deben documentarse y el investigador debe especificar el motivo. Para los pacientes considerados con pérdida de la vista, los formularios de informe de casos deben completarse hasta la última visita. El investigador hará todo lo posible por contactar con el paciente y conocer el motivo de su abandono del ensayo y su estado de salud.

Consecuencias Los pacientes que abandonen el ensayo no se volverán a incluir en el estudio. Sus números no se reutilizan efectivamente. Estos pacientes seguirán siendo seguidos en la parte no aleatoria del estudio.