Mužská neplodnost související s postinfekčním zánětlivým syndromem (SIGMA)

Průběh výzkumu. Hledání časového rámce

• Doba trvání inkluzí: 30 měsíců
• Délka sledování pacienta: 7 měsíců
• Celková délka studie: 37 měsíců V rámci pokrytí AMP mají neplodné páry konzultaci s lékaři reprodukce a jednu s biology. Mezi těmito dvěma návštěvami je provedeno hodnocení spermatické rovnováhy (VYŠETŘENÍ č. 0), včetně kultivace spermatu, spermogramu nebo testu migračního přežití (TMS) a elastázy.

U příležitosti tohoto vyšetření budou systematicky odebírány alikvoty pro měření 8OH-dG, fragmentace spermatické DNA a biochemie semene.

V rámci tohoto standardního bilančního hodnocení neplodnosti je možné předepsat echografii a MRI genitálních cest; pokud tomu tak je, budou údaje o těchto vyšetřeních shromážděny ve formuláři kazuistiky. Ale tato vyšetření nebudou konkrétně požadována pro vyhledávání.

Pokud je zjištěna leukocytospermie ≥ 0,5*106/ml nebo zvýšení elastázy ≥ 500 ng/ml, provede se dávkování 8OH-dG, fragmentace a biochemie semenů.

Pacienti budou následně vyšetřeni na biologické konzultaci (KONZULTACE BIOLOGIE č. 0 = návštěva zařazení a randomizace).

• Pokud mají pacienti 8OH-dG > 35 % a jejich kultivace spermatu je negativní, bude jim navrženo zařazení do protokolu a randomizace bude provedena ještě ten den; pacienti dostanou nebo je protizánětlivá léčba (Prednison) léčebným placebem.
• Pokud je 8OH-dG < 35 %, bude jim doporučeno zúčastnit se studie sledování spontánního vývoje SO a SI po dobu 6 měsíců.

První kompletní vyhodnocení rovnováhy bude provedeno za 1 měsíc (VYŠETŘENÍ č. 1) po začátku léčby ve studii (Prednison nebo placebo), aby bylo možné odhadnout vývoj zánětlivých a oxidačních parametrů na konci léčby. hodnocení rovnováhy nebude realizováno u inkluzivního, ale ne randomizovaného pacienta.

Pacienti randomizovaní do studie budou mít laboratorní testy zahrnující:

• Analýza spermatu (leukocytospermie)
• Míra oxidačního stresu (test 8OHd guanosinu - stanovení karbonylu proteinu - fragmentace DNA)
• Klíčová biochemie (kyselina 1-4) alfa fosfatáza, citrát, zinek, fruktóza, karnitin a glukosidáza

Druhé bilanční vyhodnocení bude požádáno 6 měsíců (VYŠETŘENÍ č. 2) po začátku léčby ze dvou důvodů: prvním důvodem je pozvolné zlepšení spermatických parametrů. Pokud se spermie během let ustálí, nezmizí do čtrnácti dnů. Je to vlastně zkušenost, kterou z toho máme.

Kromě toho, že spermatogeneze trvá tři měsíce, lze nový cyklus produkce spermií odhadnout až za více než tři měsíce po léčbě. Druhým důvodem je, že druhé delikty chronických zánětů reprodukčního orgánu jsou extrémně časté a právě odhadem této míry druhých deliktů bude bilanční hodnocení na dálku žádat o další léčbu nebo za 6 měsíců.

Tento přezkum bude zahrnovat všechny testy počátečního hodnocení:

• Analýza spermatu (leukocytospermie)
• Míra oxidačního stresu (test 8OHd guanosinu - stanovení karbonylu proteinu - fragmentace DNA)
• Klíčová biochemie (kyselina 1-4) alfa fosfatáza, citrát, zinek, fruktóza, karnitin a glukosidáza
• Ultrazvuk genitálního traktu a RMI genitálního traktu bez injekce jakékoli sloučeniny

Tato návštěva bude naplánována pro všechny pacienty, ať už jsou randomizované nebo ne. Během této návštěvy budou analyzovány výsledky testů provedených 1 měsíc a 6 měsíců po zahájení léčby. Výzkumník bude shromažďovat nežádoucí příhody, které nastaly od randomizační návštěvy.

Pacienti, u kterých dojde během vyšetření za 6 měsíců k velmi výraznému zlepšení parametrů spermatu, navrhnou kryokonzervaci spermatu.

Testy a analýzy spermatu Odběry spermatu budou prováděny v Laboratoři reprodukční biologie každého zúčastněného centra výzkumu.

Většina testů a analýz bude centralizována v nemocnici Cochin. Měření elastázy Stanovení elastázy bude centralizováno v Laboratoři reprodukční biologie v nemocnici Cochin. Testy budou provedeny ze 150 ul celkových spermií odebraných po zkapalnění a zmrazených při -20 °C.

Test přežití migrace (MST) Tento test bude proveden lokálně v každém zúčastněném centru. Pro centralizovanou analýzu morfologie se vytvoří sklíčko stěru, aby se předešlo jakémukoli "středovému" efektu.

Seminář Biochemie Biochemický seminář bude centralizován v Laboratoři biochemie v nemocnici Cochin. Tento test, prováděný na celkovém množství spermií odebraných po zkapalnění, včetně testů kyselé fosfatázy, citrátu, zinku, fruktózy, karnitinu a 1-4a Glukosidáza Sperma bude odebráno, centrifugováno při 600 g po dobu 5 minut. Po odstředění bude 500 μl supernatantu zmraženo při -20 °C a použito pro biochemický semen.

Měření oxidačního stresu Rozsah oxidačního stresu bude centrálně hodnocen v nemocnici Cochin. Tento test, prováděný na celkových spermatech odebraných po zkapalnění, včetně stanovení 8OHd-guanosinu, dávkování karbonylu proteinu a fragmentace DNA.

Sperma bude odebráno centrifugováno při 600 g po dobu 5 minut. Po odstředění:

• 250 μl supernatantu se zmrazí na -20 °C a použije se pro stanovení karbonylu proteinu.
• Peleta bude použita pro stanovení 8OHdguanosinu a fragmentace DNA. Měření parametrů pohybu spermií pomocí CASA Měření parametrů pohybu spermií pomocí CASA bude prováděno lokálně v každém zúčastněném centru.

Ultrazvuk a MRI genitálního traktu Ultrazvuk a MRI budou prováděny v genitálním traktu na centrálním radiologickém oddělení nemocnice Necker.

Konzervace zbývajícího vzorku spermatu Pacientům s velmi významným zlepšením parametrů spermatu během vyšetření po 6 měsících bude nabídnuta autokonzervace spermatu pro jakýkoli další pokus o ART po ukončení studie.

Na druhou stranu, zbývající vzorek spermatu, s výjimkou odporu od pacienta, bude uchován po skončení výzkumu pro pozdější použití v budoucím výzkumu plodnosti a zánětu. Tato sbírka bude uložena v CECOS - Cochin Hospital, Bldg. Cassini - 27 rue du FAUBOURG St Jacques, 75014 Paříž pod dohledem profesora Jean-PHILIPPE Wolfa.

Pravidla ukončení Pacienti mohou přerušit svou účast ve výzkumu, pokud si to přejí, kdykoli az jakéhokoli důvodu nebo na základě rozhodnutí zkoušejícího. Léčba by však neměla být náhle ukončena.

Zastavovací pravidla pro účast hledajícího

• Špatné dodržování protokolu
• interkurentní onemocnění mezi inkluzní návštěvou a návštěvou po 1 měsíci vyžadující ukončení studie. Po studii následuje sledování.

Postupy pro monitorování výstupního testu Všechny výstupní testy by měly být zdokumentovány a zkoušející musí uvést důvod. U pacientů považovaných za ztraceného zraku by měly být formuláře kazuistiky vyplněny do poslední návštěvy. Vyšetřovatel vynaloží veškeré úsilí, aby se s pacientem spojil a znal důvod opuštění studie a jeho zdravotní stav.

Důsledky Pacienti, kteří opustí studii, nebudou do studie znovu zařazeni. Jejich čísla nejsou efektivně znovu využívána. Tito pacienti budou nadále sledováni v nerandomizované části studie.