器官捐献者的肺 PGD 生物标志物

原发性移植物功能障碍 (PGD) 是肺移植患者早期高死亡率的原因。

基本原理

肺移植的发展可能因原发性移植物功能障碍 (PGD) 而复杂化，PGD 是一种由缺血再灌注相关现象引起的急性呼吸窘迫综合征。 PGD​​ 发生在 15-50% 的病例中，是导致死亡率、辅助通气持续时间和重症监护住院时间显着增加的原因。 它也是急性和长期排斥、闭塞性细支气管炎综合征 (BOS) - 慢性排斥 - 的中期发展的重要风险因素，这会大大降低移植物的存活率。

包含 Clara 细胞分泌蛋白（16-kd Clara 细胞蛋白-CC16）和表面活性蛋白-A（SP-A）、-B（SP-B）和-D（SP-D）的表面活性蛋白被认为是肺泡毛细血管屏障的通透性。

基于这些发现，我们假设在肺移植后发生原发性移植物功能障碍的患者的供体中进行的肺活检与在未进行移植的患者的供体中进行的肺活检相比，CC16、SP-A、-B 和 D 的基因表达发生了改变。这种综合症。

因此，这项研究可以作为移植前客观评估肺质量的补充手段。

目的和目标

1. 描述在器官供体中，器官恢复期间循环血液和肺组织中 Clara 细胞蛋白 (CC16)、表面活性剂相关蛋白（A、B 或 D）、促炎和抗炎细胞因子表达的变化。
2. 描述冷缺血期后的生物学和结构变化。
3. 建立器官供体生物标志物与肺受体急性移植物功能障碍发生率之间的相关性。

材料与方法

纳入标准

所有转诊至我们网络的肺器官供体患者及其接受者将在获得知情同意后纳入。

数据采集

在供体中，我们将记录人口统计数据（年龄、性别）、病史、死因、血气测量、胸部 X 光检查方案、血液生物学参数、脑死亡持续时间（如果合适）和热缺血时间（如果合适）和协议细菌学分析。

在接受者中，我们将记录人口统计数据（年龄、性别）、移植指征、移植前右导管结果、标准术中数据、免疫抑制、血气、胸部 X 光方案、充盈平衡和血液生物学参数在 24、48 和 72 小时。 记录松开时间。

患者会自动接受终生随访。 在第一年进行反复活检以检测可能的急性排斥反应。 数据将包含在我们的研究中。

生物样本

在供体中，在灌注保存液之前，取 18 cc 外周血（干管，9 cc）。 1管-80℃保存，1管离心（15分钟，10000/min，20℃），血清-80℃保存。

肺恢复后，立即在下叶进行肺活检 (6 cm2)。

将一个片段立即置于液氮中并储存在-80°C。第二个片段在福尔马林中储存24小时，然后储存在石蜡块中。

在植入前，在保存期结束时，在下叶进行新的肺活检。

生物分析

组织学检查和分级

固定在福尔马林中的肺组织用苏木精-伊红染色以分级肺部病变[（1）中性粒细胞浸润，（2）气道上皮细胞损伤，（3）间质水肿，（4）透明膜和（5）出血]。

炎症、细胞凋亡和表面活性蛋白

O 组织 mRNA 测量：实时定量 PCR (RTQ-PCR)

O 组织肽测量：Western Blot - ELISA - MILLIPLEX

O 血样处理和分析：ELISA - MILLIPLEX

蛋白质炎性细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1、IL33）（IL-10）、细胞间粘附分子（ICAM-1、VCAM-1）、细胞凋亡（Bax、Bcl2、Caspases）

细胞凋亡的评估：TUNEL - 免疫组织化学