BCG 疫苗可降低 COVID-19 热点地区老年人的发病率和死亡率

招聘地区：在Lockdown 2.0下，该国被分为三个重点区域——红色、橙色和绿色（26个）。 这些区域将支持政府宣布的集群遏制计划，同时开放其余区域。

绿区：根据政府的新计划，迄今为止甚至没有报告过一个 COVID-19 阳性病例的地方将被宣布为绿区。 这意味着印度近 400 多个地区可能有资格被标记为绿区。

橙色区域：橙色区域可能会看到有限的公共交通开放，并且还允许对当前季节的基本服务人员以及农业和收获活动进行豁免。 橙色区域的 COVID-19 病例将少于 15 例。

红区：被宣布为红区的地区或集群将受到严格限制，不允许进行零活动或不允许活动。 典型的理解是，任何 COVID-19 阳性病例超过 15 例的地方都可以被宣布为红色区域。 调查人员将包括德里、中央邦、马哈拉施特拉邦、古吉拉特邦、泰米尔纳德邦、拉贾斯坦邦和其他对这项研究感兴趣的邦的红色和橙色区域。

招募方法：将通过 (i) 在社区组织、医院、学院和其他机构向公众公开的信息招募参与者。 (ii) 根据热点地区的人口普查数据，根据 60 岁以上的成年人编制的行列表。 (iii) 还将通过使用经伦理委员会正式批准并分发或张贴在

1. 供流通的报纸或其他文献。
2. 通过演示文稿（例如 在讲座或受邀研讨会上发表）。 (iv) 将为这项研究创建社区咨询委员会，并在该委员会成员的帮助下招募研究人员。将向感兴趣的个人提供有关该研究的详细信息，并提供参与要求。 参与者将获得有关研究的小册子和患者信息表。 他们将有机会提出他们可能有的任何问题并与研究团队成员交谈。 如果他们仍然有兴趣并愿意参加，他们将被邀请参加筛选评估程序。

研究程序：符合纳入标准的参与者将在征得他们同意参与研究后以非随机方式招募。 在签署同意书之前，将向每位患者提供一份清楚说明与参与研究相关的风险和益处的信息文件。 关于参与者识别，将根据分配给每个研究中心的患者编号范围，依次为纳入的参与者分配一个研究编号。

参加者将在基线进行登记、初始数据收集（详细的病史，包括 h/o 以前的 BCG 疫苗接种和需要注意的 BCG 疫苗接种疤痕的证据）、胸部 X 光 PA 视图以排除 PTB、血液采样抗体测试（2 毫升）和 PCR（鼻咽拭子）。

符合条件的参与者将在第 0 天接受 BCG。参与者将在头 2 个月内每周通过电话进行随访，并被要求完成标准化问卷调查。 第 1、3 和 6 个月将亲自访问，而第 2 和 5 个月将通过电话完成。 参与者将在第 3 个月和第 6 个月接受 COVID 抗体检测。 如果呈阳性，将收集鼻/咽拭子进行PCR检测以进行确认。 如果出现任何不良反应或疾病，还将要求参与者致电研究人员。 此后，参与者将在六个月内每月接受一次随访。

参与者将获得一张日记卡（纸质），其中包含填写不良事件情况的说明，以及 24 小时紧急电话号码，以便在需要时联系值班研究医生。 他们将被指导如何自我评估这些 AE 的严重性。 日记卡上也会留有空间，用于自我记录未经请求的 AE，以及是否服用药物来缓解症状。

除血液外，还将收集所有参与者的鼻咽拭子。

将考虑 qRT-PCR 测试以重新确认注册时的 qRT-PCR 阳性/阴性状态。 在该队列的一个子集中（样本的 15%），同意进行免疫学子研究，将在基线收集 20 ml 血液用于免疫学和生物标志物分析。 他们还将在疫苗接种后 1、3 和 6 个月提供额外的血液样本（20 毫升），用于免疫学和生物标志物研究。

采血：征得受试者同意后，研究者将采集2ml静脉血。 调查人员将按照所有安全预防措施使用注射器收集标本，并将标本转移到血清分离管中。 所有符合条件的参与者完成样本采集后，样本将以冷链方式运送到最近的地区公共卫生实验室（DPHL）/病毒研究与诊断实验室网络（VRDLN）实验室。 在实验室中，血清将被分离并用于快速抗体检测。 SARS-CoV 2 特异性抗体的检测将使用 ICMR 验证的 SARS-CoV-2 抗体测试进行。 基于横向流动的免疫层析测试可检测 SARS-CoV 2 特异性抗体 (IgG/IgM)，周转时间为 15-20 分钟。 检测线和对照线上出现彩色条带将表明标本中存在 SARS-CoV-2 抗体（阳性结果）。 测试线中没有彩色条带将表明没有 SARS-CoV-2 抗体（阴性结果）。

免疫学分析：疫苗免疫反应的主要变量是表达 IFN-γ、TNF、IL-2、IL-17、IL-22、CD107a、穿孔素、颗粒酶 B 和颗粒溶素单独或联合使用以响应 SARS-Cov-2 和 BCG 抗原的刺激。 感兴趣的次要变量是受过训练的单核细胞和其他先天免疫细胞（包括 NK 细胞、NKT 细胞、gd T 细胞和 MAIT 细胞）的反应。 响应将通过流式细胞术在细胞内细胞因子染色 (ICS) 测定中测量。 为免疫学研究收集的血液将按如下方式使用： PBMC 分离和储存，用于上述免疫学研究；肝素锂微量容器中的全血，用于通过流式细胞术（转录组学的解卷积）进行绝对血细胞计数和干扰素γ释放测定；血浆和血清通过 ELISA 检测可溶性免疫介质，以及总 IgG 和 SARS-Cov2 特异性 IgG、IgM 和 IgA ELISA。

诊断测试：

PCR：SARS-Cov2 的分子诊断将根据 ICMR 指南使用 RT-PCR 试剂盒进行。 血清学：将使用抗体 IgG/IgM Covid-19 快速检测试剂盒。 胸部 X 光检查和症状筛查：排除结核病

亚组分析

1. 主要分析将使用整个队列进行
2. 将根据合并症对不同年龄组和风险组进行分层分析。 这将允许在更同质的亚组中评估疫苗有效性，并检查跨层修改的效果
3. 还会针对不同的地域分布和职业进行分层分析
4. 将在一部分个体 (n=200) 中进行免疫学分析