BCG-vaksine for å redusere sykelighet og dødelighet hos eldre individer i covid-19-hotspots

Rekrutteringsområde: Under Lockdown 2.0 har landet blitt klassifisert i tre nøkkelsoner - rød, oransje og grønn (26). Disse sonene vil støtte klyngeinneslutningsplanen annonsert av regjeringen, samtidig som de åpner opp resten av stedene.

Grønn sone: Steder som så langt ikke har rapportert en eneste positiv covid-19-tilfelle vil bli erklært som grønn sone under regjeringens nye plan. Dette betyr at nesten 400+ distrikter i India kan kvalifisere til å bli merket som grønn sone.

Oransje sone: Oransje sone kan se åpning av begrenset offentlig transport og tillate også unntak for viktige tjenester personell og jordbruk og høsting aktivitet for den pågående sesongen. Orange zone vil ha mindre enn 15 tilfeller av covid-19.

Rød sone: Et distrikt eller en klynge som er erklært som en rød sone, vil se strenge restriksjoner med null eller ingen aktivitet tillatt. Typisk forståelse er at ethvert sted med mer enn 15 COVID-19 positive tilfeller kan erklæres som en rød sone. Etterforskere vil inkludere de røde og oransje sonene i Delhi, Madhya Pradesh, Maharashtra, Gujarat, Tamilnadu, Rajasthan og andre interesserte stater for denne studien.

Rekrutteringsmetoder: Deltakere vil bli rekruttert gjennom (i) informasjon presentert i samfunnsorganisasjoner, sykehus, høyskoler og andre institusjoner for allmennheten. (ii) Fra en linjeliste utarbeidet av voksne over 60 år fra folketellingsdata for hotspot-områdene. (iii) Deltakere vil også bli rekruttert ved bruk av et annonse +/- registreringsskjema som er formelt godkjent av etikkkomiteen(e) og distribuert eller lagt ut i

1. aviser eller annen litteratur for opplag.
2. Via presentasjoner (f.eks. presentasjoner på forelesninger eller inviterte seminarer). (iv) Community Advisory Board vil bli opprettet for denne studien og hjelp fra medlemmene av dette styret vil bli tatt for rekruttering til studiet. Interesserte personer vil bli gitt detaljert informasjon om studien og kravene for deltakelse vil bli gitt. Deltakerne vil få utdelt brosjyre om studien og pasientinformasjonsark. De vil ha muligheten til å stille spørsmål de måtte ha og snakke med et studieteammedlem. Hvis de fortsatt er interessert og villige til å delta, vil de bli invitert til å delta i screening-evalueringsprosedyren.

Studieprosedyrer: Deltakere som oppfyller inklusjonskriteriene vil bli rekruttert på en ikke-randomisert måte etter å ha innhentet samtykke til å delta i studien. Et informasjonsdokument som tydelig angir risikoene og fordelene forbundet med deltakelsen i studien vil bli gitt til hver pasient før samtykke signeres. Når det gjelder deltakeridentifikasjon, vil et studienummer bli tildelt sekvensielt til inkluderte deltakere, i henhold til rekkevidden av pasientnummer som er tildelt hvert studiesenter.

Deltakerne vil bli sett ved baseline for påmelding, innledende datainnsamling (en detaljert sykehistorie inkludert tidligere BCG-vaksinasjon og bevis på BCG-vaksinasjonsarr som skal noteres), røntgen av thorax PA-visning for å utelukke PTB, blodprøvetaking for antistoff testing (2 ml) og PCR (nasofaryngeal vattpinne).

Kvalifiserte deltakere vil bli administrert BCG på dag 0. Deltakerne vil bli fulgt opp ukentlig på telefon de første 2 månedene og bedt om å fylle ut et standardisert spørreskjema. Måned 1, 3 og 6 vil bli besøkt personlig mens måned 2 og 5 vil bli gjennomført over telefon. Deltakerne vil bli testet for COVID-antistoffer i måned 3 og måned 6. Hvis den er positiv, vil nese-/halspinne bli samlet inn for PCR-testing for bekreftelse. Deltakerne vil også bli bedt om å ringe studiepersonalet ved eventuelle bivirkninger eller sykdom. Deltakerne vil deretter bli fulgt opp månedlig i seks måneder.

Deltakerne vil få et dagbokkort (papir), med instruksjoner som skal fylles ut i tilfelle uønskede hendelser, sammen med nødtelefonnummeret 24 timer i døgnet for å kontakte turnuslegen ved behov. De vil bli instruert i hvordan de selv kan vurdere alvorlighetsgraden av disse bivirkningene. Det vil også være plass på dagbokkortet for å selvdokumentere uønskede bivirkninger, og om det er tatt medisiner for å lindre symptomene.

I tillegg til blod vil det bli samlet inn nasofaryngeale vattpinner fra alle deltakerne.

qRT-PCR-test vil bli vurdert for å bekrefte qRT-PCR positiv/negativ status ved registrering. I en undergruppe av denne kohorten (15 % av prøven), som samtykker til immunologisk delstudie, vil 20 ml blod samles ved baseline for immunologisk og biomarkøranalyse. De vil også gi ytterligere blodprøver (20 ml) 1, 3 og 6 måneder etter vaksinasjon for immunologiske studier og biomarkørstudier.

Blodinnsamling: Etterforskerne vil samle inn 2 ml veneblod etter å ha innhentet samtykke fra deltakerne. Undersøkere vil samle prøven med en sprøyte etter alle sikkerhetstiltak og overføre prøven til serumseparatorrør. Etter fullført prøvetaking fra alle kvalifiserte deltakere, vil prøven bli transportert til nærmeste District Public Health Laboratory (DPHL)/Virus Research and Diagnostic Laboratory Network (VRDLN) laboratorium i kjølekjeden. I laboratoriet vil serum separeres og brukes til rask antistofftesting. Påvisning av SARS-CoV 2-spesifikke antistoffer vil bli utført ved hjelp av en ICMR-validert SARS-CoV-2 antistofftest. Den Lateral Flow-baserte immunkromatografiske testen oppdager SARS-CoV 2-spesifikke antistoffer (IgG/IgM) med en behandlingstid på 15-20 minutter. Tilstedeværelse av fargede bånd ved test- og kontrolllinjer vil indikere tilstedeværelsen av SARS-CoV-2-antistoffer (positivt resultat) i prøven. Fravær av farget bånd i testlinjen vil indikere fravær av SARS-CoV-2-antistoffer (negativt resultat).

Immunologianalyse: De primære variablene av interesse for immunrespons på vaksiner vil være prosentandelen av CD4+ og CD8+ T-celler som uttrykker IFN-γ, TNF, IL-2, IL-17, IL-22, CD107a, Perforin, Granzyme B og Granulysin alene eller i kombinasjon som respons på stimulering med SARS-Cov-2 og BCG antigener. Sekundære variabler av interesse vil være responsen til trente monocytter og andre medfødte immunceller inkludert NK-celler, NKT-celler, gd-T-celler og MAIT-celler. Respons vil bli målt ved flowcytometri i den intracellulære cytokinfarging (ICS) analysen. Blod samlet inn for immunologiske studier vil bli brukt som følger: PBMC-isolering og lagring for immunologiske studier beskrevet ovenfor; Fullblod i Lithium Heparin mikrotainer for absolutt blodcelletelling ved flowcytometri (dekonvolusjon for transkriptomikk) og for Interferon Gamma Release Assays; plasma og serum for løselige immunmediatorer ved ELISA og for total og SARS-Cov2 spesifikk IgG, IgM og IgA ELISA.

Diagnostiske tester:

PCR: Molekylær diagnose av SARS-Cov2 vil bli gjort ved å bruke RT-PCR-sett i henhold til ICMR-retningslinjene. Serologi: Antistoff IgG/IgM Covid-19 hurtigtestsett vil bli brukt. Røntgen thorax sammen med symptomscreening: For å utelukke tuberkulose

Undergruppeanalyse

1. Den primære analysen vil bli utført ved bruk av hele kohorten
2. Det vil bli foretatt en stratifisert analyse for ulike aldersgrupper og risikogrupper basert på komorbiditet. Dette vil gjøre det mulig å vurdere vaksineeffektivitet i mer homogene undergrupper og for å sjekke effekten av modifikasjon på tvers av strata
3. Det vil også bli gjort stratifiserte analyser for ulike geografiske fordelinger og yrker
4. Immunologisk analyse vil bli utført i en undergruppe av individer (n=200)