Vacina BCG na redução da morbidade e mortalidade em idosos em focos de COVID-19

Área de recrutamento: Sob o Lockdown 2.0, o país foi classificado em três zonas principais - Vermelha, Laranja e Verde (26). Estas zonas vão apoiar o plano de contenção de aglomerados anunciado pelo governo, abrindo ao mesmo tempo os restantes locais.

Zona Verde: Locais que até agora não relataram nenhum caso positivo de COVID-19 serão declarados como Zona Verde de acordo com o novo plano do governo. Isso significa que mais de 400 distritos da Índia podem se qualificar para serem marcados como Zona Verde.

Zona Laranja: A zona laranja pode ver a abertura de transporte público limitado e também permitir isenções para o pessoal de serviços essenciais e atividades agrícolas e de colheita para a temporada em curso. Zona laranja terá menos de 15 casos de COVID-19.

Zona Vermelha: Um distrito ou cluster declarado como zona vermelha verá restrições severas com zero ou nenhuma atividade permitida. O entendimento típico é que qualquer local com mais de 15 casos positivos de COVID-19 pode ser declarado como zona vermelha. Os investigadores incluirão as zonas vermelha e laranja de Delhi, Madhya Pradesh, Maharashtra, Gujarat, Tamilnadu, Rajasthan e outros estados interessados ​​neste estudo.

Métodos de recrutamento: Os participantes seriam recrutados por meio de (i) informações apresentadas em organizações comunitárias, hospitais, faculdades e outras instituições para o público em geral. (ii) A partir de uma lista linear preparada de adultos com idade superior a 60 anos a partir dos dados do Censo para as áreas críticas. (iii) Os participantes também serão recrutados por meio de anúncio +/- ficha de inscrição formalmente aprovada pelo(s) comitê(s) de ética e distribuída ou afixada no

1. jornais ou outra literatura para circulação.
2. Por meio de apresentações (por exemplo, apresentações em palestras ou seminários convidados). (iv) Conselho Consultivo Comunitário será criado para este estudo e a ajuda dos membros deste conselho será tomada para recrutamento para o estudo. Os indivíduos interessados ​​receberão informações detalhadas sobre o estudo e os requisitos para participação serão fornecidos. Os participantes receberão um folheto sobre o estudo e uma folha de informações do paciente. Eles terão a oportunidade de fazer qualquer pergunta que possam ter e conversar com um membro da equipe de estudo. Caso ainda tenham interesse e vontade de participar, serão convidados a participar do procedimento de avaliação triagem.

Procedimentos do estudo: Os participantes que atenderem aos critérios de inclusão serão recrutados de maneira não aleatória após obter seu consentimento para participar do estudo. Um documento informativo que indique claramente os riscos e os benefícios associados à participação no estudo será entregue a cada paciente antes de assinar o consentimento. Em relação à identificação do participante, um número de estudo será atribuído sequencialmente aos participantes incluídos, de acordo com a faixa de números de pacientes alocados para cada centro de estudo.

Os participantes serão vistos na linha de base para inscrição, coleta inicial de dados (um histórico médico detalhado, incluindo h/o vacinação BCG anterior e evidência de cicatriz de vacinação BCG a ser observada), radiografia de tórax PA para descartar PTB, amostragem de sangue para anticorpos testes (2 ml) e PCR (swab nasofaríngeo).

Aos participantes elegíveis será administrado BCG no dia 0. Os participantes serão acompanhados semanalmente por telefone durante os primeiros 2 meses e solicitados a preencher um questionário padronizado. Os meses 1, 3 e 6 serão visitados pessoalmente, enquanto os meses 2 e 5 serão concluídos por telefone. Os participantes seriam testados para anticorpos COVID no mês 3 e no mês 6. Se positivo, swab nasal/garganta seria coletado para teste de PCR para confirmação. Os participantes também serão solicitados a ligar para a equipe do estudo em caso de qualquer reação adversa ou doença. Posteriormente, os participantes serão acompanhados mensalmente por seis meses.

Os participantes receberão um cartão diário (papel), com instruções para preencher em caso de eventos adversos, juntamente com o número de telefone de emergência 24 horas para entrar em contato com o médico de plantão do estudo, se necessário. Eles serão instruídos sobre como autoavaliar a gravidade desses EAs. Também haverá espaço no cartão diário para autodocumentar EAs não solicitados e se a medicação foi tomada para aliviar os sintomas.

Além do sangue, serão coletados swabs nasofaríngeos de todos os participantes.

O teste qRT-PCR será considerado para reconfirmar o status qRT-PCR positivo/negativo na inscrição. Em um subconjunto desta coorte (15% da amostra), consentindo para subestudo imunológico, 20 ml de sangue serão coletados na linha de base para análise imunológica e de biomarcadores. Eles também fornecerão amostras de sangue adicionais (20 ml) em 1, 3 e 6 meses após a vacinação para estudos imunológicos e de biomarcadores.

Coleta de sangue: Os investigadores coletarão 2 ml de sangue venoso após obter o consentimento dos participantes. Os investigadores coletarão a amostra usando uma seringa seguindo todas as precauções de segurança e transferirão a amostra para tubos separadores de soro. Após a conclusão da coleta de amostras de todos os participantes elegíveis, a amostra será transportada para o laboratório distrital de saúde pública (DPHL)/Virus Research and Diagnostic Laboratory Network (VRDLN) mais próximo na cadeia de frio. No laboratório, o soro será separado e utilizado para testes rápidos de anticorpos. A detecção de anticorpos específicos para SARS-CoV 2 será realizada usando um teste de anticorpo SARS-CoV-2 validado por ICMR. O teste imunocromatográfico baseado em Lateral Flow detecta anticorpos específicos SARS-CoV 2 (IgG/IgM) com um tempo de resposta de 15 a 20 minutos. A presença de bandas coloridas nas linhas de teste e controle indicará a presença de anticorpos SARS-CoV-2 (resultado positivo) na amostra. A ausência de banda colorida na linha de teste indicará a ausência de anticorpos SARS-CoV-2 (resultado negativo).

Análise imunológica: As variáveis ​​primárias de interesse da resposta imune às vacinas serão a porcentagem de células T CD4+ e CD8+ que expressam IFN-γ, TNF, IL-2, IL-17, IL-22, CD107a, Perforin, Granzima B e Granulisina sozinha ou em combinação em resposta à estimulação com antígenos SARS-Cov-2 e BCG. Variáveis ​​secundárias de interesse seriam a resposta de monócitos treinados e outras células imunes inatas, incluindo células NK, células NKT, células gd T e células MAIT. A resposta será medida por citometria de fluxo no ensaio de coloração de citocinas intracelulares (ICS). O sangue coletado para estudos imunológicos será utilizado da seguinte forma: isolamento e armazenamento de PBMC para estudos imunológicos descritos acima; Sangue total em microtainer de Heparina de Lítio para contagem absoluta de células sanguíneas por citometria de fluxo (deconvolução para transcriptômica) e para Ensaios de Liberação Gama de Interferon; plasma e soro para mediadores imunológicos solúveis por ELISA e para IgG, IgM e IgA específicos totais e SARS-Cov2 ELISA.

Testes de diagnóstico:

PCR: O diagnóstico molecular de SARS-Cov2 será feito usando kits RT-PCR de acordo com as diretrizes do ICMR. Sorologia: Será utilizado o kit de teste rápido Antibody IgG/IgM Covid-19. Radiografia de tórax junto com triagem de sintomas: para descartar tuberculose

Análise de Subgrupo

1. A análise primária será realizada usando toda a coorte
2. Será realizada uma análise estratificada por várias faixas etárias e por grupos de risco com base na comorbidade. Isso permitirá que a eficácia da vacina seja avaliada em subgrupos mais homogêneos e verifique o efeito da modificação entre os estratos
3. A análise estratificada também será feita para várias distribuições geográficas e ocupações
4. A análise imunológica será realizada em um subconjunto de indivíduos (n=200)