BCG vakcína při snižování nemocnosti a úmrtnosti u starších jedinců v hotspotech COVID-19

Oblast náboru: V rámci Lockdown 2.0 byla země rozdělena do tří klíčových zón – červené, oranžové a zelené (26). Tyto zóny podpoří plán zadržování klastrů vyhlášený vládou a zároveň otevřou zbývající místa.

Zelená zóna: Místa, která dosud nenahlásila ani jeden pozitivní případ COVID-19, budou podle nového vládního plánu vyhlášena jako zelená zóna. To znamená, že téměř 400+ okresů Indie může být označeno jako zelená zóna.

Oranžová zóna: V oranžové zóně se může otevřít omezená veřejná doprava a také povolit výjimky pro personál základních služeb a zemědělskou a sklizňovou činnost pro probíhající sezónu. Oranžová zóna bude mít méně než 15 případů COVID-19.

Červená zóna: Oblast nebo shluk deklarovaný jako červená zóna bude mít přísná omezení s nulovou nebo žádnou povolenou činností. Typické chápání je, že jakékoli místo s více než 15 pozitivními případy COVID-19 může být prohlášeno za červenou zónu. Vyšetřovatelé budou pro tuto studii zahrnovat červené a oranžové zóny Dillí, Madhjapradéš, Maháráštra, Gudžarát, Tamilnadu, Rádžasthán a další zainteresované státy.

Metody náboru: Účastníci by byli získáváni prostřednictvím (i) informací prezentovaných v komunitních organizacích, nemocnicích, vysokých školách a dalších institucích široké veřejnosti. (ii) Z řádkového seznamu připraveného pro dospělé ve věku nad 60 let z údajů sčítání lidu pro oblasti hotspotů. (iii) Účastníci budou také náborováni pomocí inzerátu +/- registračního formuláře formálně schváleného etickou komisí (komisí) a distribuovaného nebo zveřejněného v

1. noviny nebo jiná literatura do oběhu.
2. Prostřednictvím prezentací (např. prezentace na přednáškách nebo zvaných seminářích). (iv) Pro tuto studii bude vytvořen komunitní poradní sbor a bude využita pomoc členů tohoto výboru s náborem do studie Zájemcům budou poskytnuty podrobné informace o studii a budou poskytnuty požadavky na účast. Účastníci obdrží brožuru o studii a informační list pro pacienta. Budou mít příležitost položit jakékoli otázky, které by mohli mít, a promluvit si se členem studijního týmu. Pokud budou mít stále zájem a ochotu se zúčastnit, budou pozváni k účasti ve screeningovém hodnocení.

Postupy studie: Účastníci splňující kritéria pro zařazení budou přijati nerandomizovaným způsobem poté, co získají jejich souhlas s účastí ve studii. Před podpisem souhlasu obdrží každý pacient informační dokument, který jasně uvádí rizika a výhody spojené s účastí ve studii. Pokud jde o identifikaci účastníka, číslo studie bude přiděleno postupně zahrnutým účastníkům podle rozsahu čísel pacientů přidělených každému studijnímu centru.

Účastníci budou vidět na začátku registrace, počáteční sběr dat (podrobná lékařská anamnéza včetně předchozího očkování BCG a důkazy jizvy po vakcinaci BCG, které je třeba zaznamenat), rentgen hrudníku PA pro vyloučení PTB, odběr krve na protilátky testování (2 ml) a PCR (výtěr z nosohltanu).

Způsobilým účastníkům bude podána BCG v den 0. Účastníci budou po dobu prvních 2 měsíců týdně telefonicky sledováni a požádáni o vyplnění standardizovaného dotazníku. 1., 3. a 6. měsíc bude osobně navštíven, zatímco 2. a 5. měsíc bude dokončen telefonicky. Účastníci budou testováni na protilátky COVID ve 3. a 6. měsíci. Pokud je pozitivní, odebere se výtěr z nosu/krku pro testování PCR pro potvrzení. Účastníci budou také požádáni, aby v případě jakýchkoli nežádoucích reakcí nebo onemocnění zavolali pracovníkům studie. Účastníci budou poté sledováni měsíčně po dobu šesti měsíců.

Účastníci obdrží deníkovou kartu (papír), s instrukcemi k vyplnění v případě nežádoucích událostí, spolu s 24hodinovým pohotovostním telefonním číslem, aby mohli v případě potřeby kontaktovat pohotovostního studijního lékaře. Budou instruováni, jak sami hodnotit závažnost těchto AE. Na kartě deníku bude také prostor pro vlastní dokumentaci nevyžádaných AE a toho, zda byly užívány léky ke zmírnění příznaků.

Všem účastníkům budou kromě krve odebrány výtěry z nosohltanu.

Test qRT-PCR bude považován za opětovné potvrzení pozitivního/negativního stavu qRT-PCR při registraci. V podskupině této kohorty (15 % vzorku), která souhlasí s imunologickou podstudií, bude na začátku odebráno 20 ml krve pro imunologickou analýzu a analýzu biomarkerů. Poskytnou také další vzorky krve (20 ml) 1, 3 a 6 měsíců po vakcinaci pro imunologické studie a studie biomarkerů.

Odběr krve: Vyšetřovatelé odeberou 2 ml žilní krve po obdržení souhlasu účastníků. Zkoušející odeberou vzorek pomocí injekční stříkačky za dodržení všech bezpečnostních opatření a přenesou vzorek do zkumavek se separátorem séra. Po dokončení odběru vzorků od všech způsobilých účastníků bude vzorek převezen do nejbližší laboratoře okresního veřejného zdraví (DPHL)/laboratoře virové výzkumné a diagnostické laboratoře (VRDLN) v chladném řetězci. V laboratoři bude sérum separováno a použito pro rychlé testování protilátek. Detekce specifických protilátek SARS-CoV 2 bude provedena pomocí testu na protilátky SARS-CoV-2 validovaného ICMR. Imunochromatografický test založený na laterálním průtoku detekuje specifické protilátky proti SARS-CoV 2 (IgG/IgM) s dobou obratu 15–20 minut. Přítomnost barevných proužků na testovacích a kontrolních liniích bude indikovat přítomnost protilátek SARS-CoV-2 (pozitivní výsledek) ve vzorku. Absence barevného proužku v testovací linii bude indikovat nepřítomnost protilátek SARS-CoV-2 (negativní výsledek).

Imunologická analýza: Primárními proměnnými zájmu imunitní odpovědi na vakcíny bude procento CD4+ a CD8+ T buněk, které exprimují IFN-γ, TNF, IL-2, IL-17, IL-22, CD107a, Perforin, Granzyme B a Granulysin samotný nebo v kombinaci v reakci na stimulaci antigeny SARS-Cov-2 a BCG. Sekundárními proměnnými by byla reakce trénovaných monocytů a dalších vrozených imunitních buněk včetně NK buněk, NKT buněk, gd T buněk a MAIT buněk. Odezva bude měřena průtokovou cytometrií v testu intracelulárního cytokinového barvení (ICS). Krev odebraná pro imunologické studie bude použita následovně: Izolace PBMC a skladování pro imunologické studie popsané výše; Plná krev v mikrozásobníku Lithium Heparin pro absolutní počítání krvinek průtokovou cytometrií (dekonvoluce pro transkriptomiku) a pro testy uvolňování interferonu Gamma; plazma a sérum pro rozpustné imunitní mediátory pomocí ELISA a pro celkové a SARS-Cov2 specifické IgG, IgM a IgA ELISA.

Diagnostické testy:

PCR: Molekulární diagnostika SARS-Cov2 bude provedena pomocí souprav RT-PCR podle pokynů ICMR. Sérologie: Bude použita souprava rychlého testu protilátek IgG/IgM Covid-19. Rentgen hrudníku spolu se screeningem příznaků: K vyloučení tuberkulózy

Analýza podskupin

1. Primární analýza bude provedena za použití celé kohorty
2. Bude provedena stratifikovaná analýza pro různé věkové skupiny a podle rizikových skupin na základě komorbidity. To umožní vyhodnotit účinnost vakcíny ve více homogenních podskupinách a zkontrolovat účinek modifikace napříč vrstvami
3. Stratifikovaná analýza bude také provedena pro různé geografické rozložení a povolání
4. Imunologická analýza bude provedena u podskupiny jedinců (n=200)