Szczepionka BCG w zmniejszaniu zachorowalności i śmiertelności u osób starszych w miejscach występowania COVID-19

Obszar rekrutacji: W ramach Lockdown 2.0 kraj został podzielony na trzy kluczowe strefy – czerwoną, pomarańczową i zieloną (26). Strefy te będą wspierać plan powstrzymywania klastrów ogłoszony przez rząd, jednocześnie otwierając pozostałe miejsca.

Zielona strefa: Miejsca, w których do tej pory nie odnotowano ani jednego przypadku pozytywnego wyniku COVID-19, zostaną ogłoszone zieloną strefą zgodnie z nowym planem rządu. Oznacza to, że ponad 400 okręgów w Indiach może kwalifikować się do oznaczenia jako Zielona Strefa.

Strefa pomarańczowa: W strefie pomarańczowej może zostać otwarty ograniczony transport publiczny, a także zezwolić na zwolnienia dla personelu usług podstawowych oraz działalności rolniczej i żniwnej w bieżącym sezonie. W strefie Orange będzie mniej niż 15 przypadków COVID-19.

Czerwona strefa: dzielnica lub klaster zadeklarowana jako czerwona strefa będzie podlegać surowym ograniczeniom z zerową lub żadną dozwoloną działalnością. Typowe rozumienie jest takie, że każde miejsce z ponad 15 pozytywnymi przypadkami COVID-19 może zostać uznane za czerwoną strefę. Badacze obejmą strefy Czerwone i Pomarańczowe w Delhi, Madhya Pradesh, Maharashtra, Gujarat, Tamilnadu, Radżastanie i innych zainteresowanych stanach w tym badaniu.

Metody rekrutacji: Uczestnicy byliby rekrutowani poprzez (i) informacje prezentowane ogółowi społeczeństwa w organizacjach społecznych, szpitalach, kolegiach i innych instytucjach. (ii) Z wykazu liniowego sporządzonego dla osób dorosłych w wieku powyżej 60 lat na podstawie danych Spisu Powszechnego dla obszarów hotspotów. (iii) Uczestnicy będą również rekrutowani za pomocą ogłoszenia +/- formularza rejestracyjnego formalnie zatwierdzonego przez komisję etyczną i rozpowszechniane lub publikowane w

1. gazety lub inną literaturę do rozpowszechniania.
2. Poprzez prezentacje (np. prezentacje na wykładach lub zaproszonych seminariach). (iv) Na potrzeby tego badania zostanie utworzona Społeczna Rada Doradcza, której członkowie będą potrzebować pomocy w rekrutacji do badania. Zainteresowanym osobom zostaną przekazane szczegółowe informacje na temat badania oraz warunki uczestnictwa. Uczestnicy otrzymają broszurę dotyczącą badania i kartę informacyjną dla pacjenta. Będą mieli okazję zadać wszelkie nurtujące ich pytania i porozmawiać z członkiem zespołu badawczego. Jeśli nadal będą zainteresowani i chętni do udziału, zostaną zaproszeni do udziału w procedurze oceny screeningowej.

Procedury badawcze: Uczestnicy spełniający kryteria włączenia zostaną zrekrutowani w sposób nierandomizowany po uzyskaniu zgody na udział w badaniu. Dokument informacyjny, który jednoznacznie wskazuje zagrożenia i korzyści związane z udziałem w badaniu, zostanie wręczony każdemu pacjentowi przed podpisaniem zgody. Jeśli chodzi o identyfikację uczestników, numer badania zostanie przydzielony sekwencyjnie włączonym uczestnikom, zgodnie z zakresem numerów pacjentów przydzielonych do każdego ośrodka badawczego.

Uczestnicy będą widziani na początku rejestracji w celu zebrania wstępnych danych (szczegółowa historia medyczna, w tym h / o wcześniejsze szczepienie BCG i dowód na bliznę po szczepieniu BCG do odnotowania), zdjęcie rentgenowskie klatki piersiowej PA w celu wykluczenia PTB, pobranie krwi na przeciwciała test (2 ml) i PCR (wymaz z nosogardzieli).

Kwalifikujący się uczestnicy otrzymają BCG w dniu 0. Uczestnicy będą co tydzień monitorowani telefonicznie przez pierwsze 2 miesiące i proszeni o wypełnienie standardowego kwestionariusza. Miesiące 1, 3 i 6 będą odwiedzane osobiście, a miesiące 2 i 5 zostaną zakończone przez telefon. Uczestnicy będą testowani na obecność przeciwciał COVID w 3. i 6. miesiącu. Jeśli wynik będzie pozytywny, zostanie pobrany wymaz z nosa/gardła do testu PCR w celu potwierdzenia. Uczestnicy zostaną również poproszeni o skontaktowanie się z personelem badania w przypadku wystąpienia jakichkolwiek działań niepożądanych lub choroby. Następnie uczestnicy będą obserwowani co miesiąc przez sześć miesięcy.

Uczestnicy otrzymają kartę dziennika (papierową) z instrukcjami, które należy wypełnić w przypadku wystąpienia zdarzeń niepożądanych, wraz z całodobowym numerem telefonu alarmowego, aby w razie potrzeby skontaktować się z dyżurującym lekarzem prowadzącym badanie. Zostaną poinstruowani, jak samodzielnie ocenić nasilenie tych zdarzeń niepożądanych. Na karcie dzienniczka znajdzie się również miejsce na samoudokumentowanie niezamówionych AE oraz tego, czy przyjmowano leki w celu złagodzenia objawów.

Oprócz krwi od wszystkich uczestników zostaną pobrane wymazy z jamy nosowo-gardłowej.

Test qRT-PCR będzie brany pod uwagę w celu ponownego potwierdzenia dodatniego/ujemnego statusu qRT-PCR podczas rejestracji. W podgrupie tej kohorty (15% próby), która wyraziła zgodę na dodatkowe badanie immunologiczne, na początku badania zostanie pobrane 20 ml krwi do analizy immunologicznej i analizy biomarkerów. Dostarczą również dodatkowe próbki krwi (20 ml) 1, 3 i 6 miesięcy po szczepieniu do badań immunologicznych i biomarkerów.

Pobranie krwi: Badacze pobiorą 2 ml krwi żylnej po uzyskaniu zgody uczestników. Badacze pobiorą próbkę za pomocą strzykawki z zachowaniem wszystkich środków ostrożności i przeniosą próbkę do probówek z separatorem surowicy. Po zakończeniu pobierania próbek od wszystkich kwalifikujących się uczestników, próbka zostanie przetransportowana do najbliższego laboratorium District Public Health Laboratory (DPHL)/Virus Research and Diagnostic Laboratory Network (VRDLN) w ramach łańcucha chłodniczego. W laboratorium surowica zostanie oddzielona i wykorzystana do szybkiego testu na obecność przeciwciał. Wykrywanie przeciwciał swoistych dla SARS-CoV-2 zostanie przeprowadzone przy użyciu zatwierdzonego przez ICMR testu przeciwciał SARS-CoV-2. Test immunochromatograficzny oparty na przepływie bocznym wykrywa przeciwciała swoiste dla SARS-CoV 2 (IgG/IgM) w czasie 15-20 minut. Obecność kolorowych prążków na liniach testowych i kontrolnych będzie wskazywać na obecność przeciwciał SARS-CoV-2 (wynik pozytywny) w próbce. Brak kolorowego paska w linii testowej będzie wskazywał na brak przeciwciał SARS-CoV-2 (wynik ujemny).

Analiza immunologiczna: Głównymi zmiennymi będącymi przedmiotem zainteresowania odpowiedzi immunologicznej na szczepionki będzie odsetek limfocytów T CD4+ i CD8+ wykazujących ekspresję IFN-γ, TNF, IL-2, IL-17, IL-22, CD107a, perforyny, granzymu B i Granulizyna sama lub w połączeniu w odpowiedzi na stymulację antygenami SARS-Cov-2 i BCG. Drugorzędowymi zmiennymi będącymi przedmiotem zainteresowania byłaby odpowiedź wyszkolonych monocytów i innych wrodzonych komórek odpornościowych, w tym komórek NK, komórek NKT, komórek T gd i komórek MAIT. Odpowiedź będzie mierzona za pomocą cytometrii przepływowej w teście barwienia wewnątrzkomórkowych cytokin (ICS). Krew pobrana do badań immunologicznych zostanie wykorzystana w następujący sposób: izolacja i przechowywanie PBMC do badań immunologicznych opisanych powyżej; Krew pełna w mikrotainerze z heparyną litową do bezwzględnego zliczania krwinek metodą cytometrii przepływowej (dekonwolucja w transkryptomice) oraz do testów uwalniania interferonu gamma; osocza i surowicy pod kątem rozpuszczalnych mediatorów immunologicznych metodą ELISA oraz całkowitych i swoistych dla SARS-Cov2 IgG, IgM i IgA ELISA.

Testy diagnostyczne:

PCR: Diagnostyka molekularna SARS-Cov2 zostanie przeprowadzona przy użyciu zestawów RT-PCR zgodnie z wytycznymi ICMR. Serologia: Zostanie użyty szybki test na przeciwciała IgG/IgM Covid-19. RTG klatki piersiowej wraz z badaniem przesiewowym objawów: Aby wykluczyć gruźlicę

Analiza podgrup

1. Analiza pierwotna zostanie przeprowadzona z wykorzystaniem całej kohorty
2. Analiza warstwowa zostanie przeprowadzona dla różnych grup wiekowych i według grup ryzyka na podstawie współzachorowalności. Umożliwi to ocenę skuteczności szczepionki w bardziej jednorodnych podgrupach i sprawdzenie wpływu modyfikacji w różnych warstwach
3. Analiza warstwowa zostanie również przeprowadzona dla różnych rozmieszczeń geograficznych i zawodów
4. Analiza immunologiczna zostanie przeprowadzona w podzbiorze osób (n=200)