Vaccino BCG nella riduzione della morbilità e della mortalità negli anziani negli hotspot COVID-19

Area di reclutamento: sotto il Lockdown 2.0, il paese è stato classificato in tre zone chiave: rossa, arancione e verde (26). Queste zone sosterranno il piano di contenimento dei cluster annunciato dal governo, aprendo al contempo il resto dei luoghi.

Zona verde: i luoghi che finora non hanno segnalato nemmeno un singolo caso positivo di COVID-19 saranno dichiarati zona verde secondo il nuovo piano del governo. Ciò significa che quasi più di 400 distretti dell'India potrebbero qualificarsi per essere etichettati come Green Zone.

Zona arancione: la zona arancione può vedere l'apertura di trasporti pubblici limitati e consentire anche esenzioni per il personale dei servizi essenziali e le attività agricole e di raccolta per la stagione in corso. La zona arancione avrà meno di 15 casi di COVID-19.

Zona rossa: un distretto o un cluster dichiarato zona rossa subirà severe restrizioni con attività pari a zero o nessuna attività consentita. La comprensione tipica è che qualsiasi luogo con più di 15 casi positivi di COVID-19 può essere dichiarato zona rossa. Gli investigatori includeranno le zone rosse e arancioni di Delhi, Madhya Pradesh, Maharashtra, Gujarat, Tamilnadu, Rajasthan e altri stati interessati a questo studio.

Metodi di reclutamento: i partecipanti verrebbero reclutati attraverso (i) informazioni presentate al pubblico in generale nelle organizzazioni della comunità, negli ospedali, nelle università e in altre istituzioni. (ii) Da un elenco di linee preparato di adulti di età superiore ai 60 anni dai dati del censimento per le aree hotspot. (iii) I partecipanti saranno reclutati anche mediante l'uso di un annuncio +/- modulo di registrazione formalmente approvato dal/i comitato/i etico/i e distribuito o pubblicato nel

1. giornali o altra letteratura per la circolazione.
2. Tramite presentazioni (ad es. presentazioni a lezioni o seminari su invito). (iv) Verrà creato un comitato consultivo comunitario per questo studio e l'aiuto dei membri di questo consiglio sarà preso per il reclutamento allo studio Alle persone interessate verranno fornite informazioni dettagliate sullo studio e verranno forniti i requisiti per la partecipazione. Ai partecipanti verrà consegnata una brochure sullo studio e una scheda informativa per il paziente. Avranno l'opportunità di porre tutte le domande che potrebbero avere e di parlare con un membro del gruppo di studio. Se sono ancora interessati e disposti a partecipare, saranno invitati a partecipare alla procedura di valutazione dello screening.

Procedure dello studio: i partecipanti che soddisfano i criteri di inclusione verranno reclutati in modo non randomizzato dopo aver ottenuto il loro consenso a partecipare allo studio. Un documento informativo che indichi chiaramente i rischi ei benefici associati alla partecipazione allo studio sarà consegnato a ciascun paziente prima della firma del consenso. Per quanto riguarda l'identificazione dei partecipanti, verrà assegnato un numero di studio in sequenza ai partecipanti inclusi, in base all'intervallo di numeri di pazienti assegnati a ciascun centro di studio.

I partecipanti saranno visti al basale per l'arruolamento, la raccolta iniziale dei dati (una storia medica dettagliata che includa h/o precedente vaccinazione BCG e l'evidenza della cicatrice da vaccinazione BCG da annotare), radiografia del torace vista PA per escludere PTB, prelievo di sangue per anticorpi test (2 ml) e PCR (tampone nasofaringeo).

Ai partecipanti idonei verrà somministrato BCG al giorno 0. I partecipanti saranno seguiti settimanalmente telefonicamente per i primi 2 mesi e verrà chiesto di completare un questionario standardizzato. I mesi 1, 3 e 6 saranno visitati di persona mentre i mesi 2 e 5 saranno completati per telefono. I partecipanti sarebbero stati testati per gli anticorpi COVID al mese 3 e al mese 6. Se positivo, il tampone nasale / faringeo verrebbe raccolto per il test PCR per la conferma. Ai partecipanti verrà inoltre chiesto di chiamare il personale dello studio in caso di reazioni avverse o malattia. I partecipanti saranno successivamente seguiti mensilmente per sei mesi.

Ai partecipanti verrà consegnata una scheda diario (cartacea), con le istruzioni da compilare in caso di eventi avversi, insieme al numero di telefono di emergenza 24 ore su 24 per contattare il medico dello studio di guardia se necessario. Saranno istruiti su come autovalutare la gravità di questi eventi avversi. Ci sarà anche spazio sulla scheda del diario per autodocumentare eventi avversi non richiesti e se sono stati assunti farmaci per alleviare i sintomi.

Oltre al sangue, verranno raccolti tamponi nasofaringei da tutti i partecipanti.

Il test qRT-PCR sarà preso in considerazione per riconfermare lo stato positivo / negativo di qRT-PCR al momento dell'arruolamento. In un sottogruppo di questa coorte (15% del campione), consenziente per il sottostudio immunologico, verranno raccolti 20 ml di sangue al basale per l'analisi immunologica e dei biomarcatori. Forniranno inoltre ulteriori campioni di sangue (20 ml) a 1, 3 e 6 mesi dopo la vaccinazione per studi immunologici e sui biomarcatori.

Raccolta del sangue: gli investigatori raccoglieranno 2 ml di sangue venoso dopo aver ottenuto il consenso dai partecipanti. Gli investigatori raccoglieranno il campione utilizzando una siringa seguendo tutte le precauzioni di sicurezza e trasferiranno il campione in provette di separazione del siero. Dopo il completamento della raccolta del campione da tutti i partecipanti idonei, il campione verrà trasportato al più vicino laboratorio distrettuale di sanità pubblica (DPHL)/Virus Research and Diagnostic Laboratory Network (VRDLN) in catena del freddo. In laboratorio, il siero verrà separato e utilizzato per il test rapido degli anticorpi. Il rilevamento degli anticorpi specifici per SARS-CoV 2 verrà eseguito utilizzando un test anticorpale SARS-CoV-2 convalidato dall'ICMR. Il test immuno-cromatografico basato sul flusso laterale rileva gli anticorpi specifici SARS-CoV 2 (IgG/IgM) con un tempo di risposta di 15-20 minuti. La presenza di bande colorate sulle linee del Test e del Controllo indicherà la presenza di anticorpi SARS-CoV-2 (risultato positivo) nel campione. L'assenza della banda colorata nella linea del test indicherà l'assenza di anticorpi SARS-CoV-2 (risultato negativo).

Analisi immunologica: le principali variabili di interesse della risposta immunitaria ai vaccini saranno la percentuale di cellule T CD4+ e CD8+ che esprimono IFN-γ, TNF, IL-2, IL-17, IL-22, CD107a, Perforin, Granzyme B e Granulisina da sola o in combinazione in risposta alla stimolazione con antigeni SARS-Cov-2 e BCG. Le variabili secondarie di interesse sarebbero la risposta dei monociti addestrati e di altre cellule immunitarie innate, comprese le cellule NK, le cellule NKT, le cellule T gd e le cellule MAIT. La risposta sarà misurata mediante citometria a flusso nel test di colorazione delle citochine intracellulari (ICS). Il sangue raccolto per gli studi immunologici sarà utilizzato come segue: isolamento e conservazione delle PBMC per gli studi immunologici sopra descritti; Sangue intero in microtainer di Litio Eparina per il conteggio assoluto delle cellule ematiche mediante citometria a flusso (deconvoluzione per trascrittomica) e per Interferon Gamma Release Assays; plasma e siero per immunomediatori solubili mediante ELISA e per IgG, IgM e IgA ELISA totale e SARS-Cov2 specifico.

Test diagnostici:

PCR: la diagnosi molecolare di SARS-Cov2 verrà effettuata utilizzando i kit RT-PCR secondo le linee guida dell'ICMR. Sierologia: verrà utilizzato il kit di test rapido per anticorpi IgG/IgM Covid-19. Radiografia del torace insieme allo screening dei sintomi: per escludere la tubercolosi

Analisi dei sottogruppi

1. L'analisi primaria verrà eseguita utilizzando l'intera coorte
2. Verrà effettuata un'analisi stratificata per vari gruppi di età e per gruppi di rischio in base alla comorbilità. Ciò consentirà di valutare l'efficacia del vaccino in sottogruppi più omogenei e di verificare l'effetto della modifica tra gli strati
3. L'analisi stratificata sarà effettuata anche per varie distribuzioni geografiche e occupazioni
4. L'analisi immunologica sarà effettuata in un sottogruppo di individui (n=200)