BCG-vaccine til at reducere sygelighed og dødelighed hos ældre personer i COVID-19-hotspots

Rekrutteringsområde: Under Lockdown 2.0 er landet blevet klassificeret i tre nøglezoner - rød, orange og grøn (26). Disse zoner vil understøtte klyngeinddæmningsplanen annonceret af regeringen, mens de åbner resten af ​​stederne.

Grøn zone: Steder, der indtil videre ikke har rapporteret en eneste positiv COVID-19-tilfælde, vil blive erklæret som grøn zone under regeringens nye plan. Det betyder, at næsten 400+ distrikter i Indien kan kvalificere sig til at blive mærket som Grøn Zone.

Orange Zone: Orange Zone kan se åbning af begrænset offentlig transport og tillade også undtagelser for væsentlige servicepersonale og landbrugs- og høstaktiviteter i den igangværende sæson. Orange zone vil have mindre end 15 tilfælde af COVID-19.

Rød zone: Et distrikt eller en klynge, der er erklæret som en rød zone, vil se alvorlige restriktioner med nul eller ingen aktivitet tilladt. Typisk forståelse er, at ethvert sted med mere end 15 COVID-19 positive tilfælde kan erklæres som en rød zone. Efterforskere vil inkludere de røde og orange zoner i Delhi, Madhya Pradesh, Maharashtra, Gujarat, Tamilnadu, Rajasthan og andre interesserede stater til denne undersøgelse.

Rekrutteringsmetoder: Deltagerne vil blive rekrutteret gennem (i) information præsenteret i samfundsorganisationer, hospitaler, gymnasier og andre institutioner for den brede offentlighed. (ii) Fra en linjeliste udarbejdet af voksne over 60 år fra folketællingsdata for hotspot-områderne. (iii) Deltagerne vil også blive rekrutteret ved brug af en annonce +/- registreringsformular, der formelt er godkendt af de etiske udvalg og distribueret eller opslået i

1. aviser eller anden litteratur til cirkulation.
2. Via præsentationer (f.eks. oplæg ved forelæsninger eller inviterede seminarer). (iv) Community Advisory Board vil blive oprettet for denne undersøgelse, og hjælp fra medlemmerne af denne bestyrelse vil blive taget til rekruttering til undersøgelsen. Interesserede personer vil få detaljerede oplysninger om undersøgelsen, og kravene til deltagelse vil blive givet. Deltagerne vil få udleveret brochure om undersøgelsen og patientinformationsark. De vil have mulighed for at stille spørgsmål, de måtte have, og at tale med et studieteammedlem. Hvis de stadig er interesserede og villige til at deltage, vil de blive inviteret til at deltage i screeningsevalueringsproceduren.

Undersøgelsesprocedurer: Deltagere, der opfylder inklusionskriterierne, vil blive rekrutteret på en ikke-randomiseret måde efter at have opnået deres samtykke til at deltage i undersøgelsen. Et informationsdokument, der klart angiver de risici og fordele, der er forbundet med deltagelse i undersøgelsen, vil blive givet til hver patient, før samtykket underskrives. Med hensyn til deltageridentifikation vil et undersøgelsesnummer blive tildelt sekventielt til inkluderede deltagere i henhold til rækken af ​​patientnumre, der er tildelt hvert studiecenter.

Deltagerne vil blive set ved baseline for tilmelding, indledende dataindsamling (en detaljeret sygehistorie inklusive h/o tidligere BCG-vaccination og tegn på BCG-vaccinationsar skal noteres), røntgenbillede af thorax PA for at udelukke PTB, blodprøvetagning for antistof test (2 ml) og PCR (nasopharyngeal podning).

Kvalificerede deltagere vil blive administreret BCG på dag 0. Deltagerne vil blive fulgt op ugentligt telefonisk i de første 2 måneder og bedt om at udfylde et standardiseret spørgeskema. Måned 1, 3 & 6 vil blive besøgt personligt, mens måned 2 & 5 vil blive gennemført over telefon. Deltagerne ville blive testet for COVID-antistoffer i måned 3 og måned 6. Hvis den er positiv, vil næse-/halspodning blive indsamlet til PCR-test til bekræftelse. Deltagerne vil også blive bedt om at ringe til undersøgelsens personale i tilfælde af eventuelle bivirkninger eller sygdom. Deltagerne vil herefter blive fulgt op månedligt i seks måneder.

Deltagerne vil få udleveret et dagbogskort (papir) med instruktioner til at udfylde i tilfælde af uønskede hændelser, sammen med det akutte 24-timers telefonnummer til at kontakte vagtlægen, hvis det er nødvendigt. De vil blive instrueret i, hvordan man selv vurderer sværhedsgraden af ​​disse bivirkninger. Der vil også være plads på dagbogskortet til selv at dokumentere uopfordrede bivirkninger, og om der er taget medicin for at lindre symptomerne.

Ud over blod vil der blive indsamlet nasopharyngeale podninger fra alle deltagere.

qRT-PCR-test vil blive overvejet at genbekræfte qRT-PCR positiv/negativ status ved tilmelding. I en undergruppe af denne kohorte (15 % af prøven), vil der, efter samtykke til immunologisk underundersøgelse, blive opsamlet 20 ml blod ved baseline til immunologisk analyse og biomarkøranalyse. De vil også give yderligere blodprøver (20 ml) 1, 3 og 6 måneder efter vaccination til immunologiske og biomarkørundersøgelser.

Blodopsamling: Efterforskerne vil indsamle 2 ml veneblod efter at have indhentet samtykke fra deltagerne. Efterforskere vil indsamle prøven ved hjælp af en sprøjte efter alle sikkerhedsforanstaltninger og overføre prøven til serumseparatorrør. Efter afslutning af prøveindsamling fra alle kvalificerede deltagere, vil prøven blive transporteret til det nærmeste District Public Health Laboratory (DPHL)/Virus Research and Diagnostic Laboratory Network (VRDLN) laboratorium i kølekæden. I laboratoriet vil serum blive separeret og brugt til hurtig antistoftestning. Påvisning af SARS-CoV 2-specifikke antistoffer vil blive udført ved hjælp af en ICMR-valideret SARS-CoV-2-antistoftest. Den Lateral Flow-baserede immunkromatografiske test påviser SARS-CoV 2-specifikke antistoffer (IgG/IgM) med en behandlingstid på 15-20 minutter. Tilstedeværelse af farvede bånd ved test- og kontrollinjer vil indikere tilstedeværelsen af ​​SARS-CoV-2-antistoffer (positivt resultat) i prøven. Fravær af farvet bånd i testlinjen vil indikere fravær af SARS-CoV-2-antistoffer (negativt resultat).

Immunologisk analyse: De primære variabler af interesse for immunrespons på vacciner vil være procentdelen af ​​CD4+ og CD8+ T-celler, der udtrykker IFN-γ, TNF, IL-2, IL-17, IL-22, CD107a, Perforin, Granzyme B og Granulysin alene eller i kombination som respons på stimulering med SARS-Cov-2 og BCG antigener. Sekundære variabler af interesse ville være responsen fra trænede monocytter og andre medfødte immunceller, herunder NK-celler, NKT-celler, gd-T-celler og MAIT-celler. Respons vil blive målt ved flowcytometri i det intracellulære cytokinfarvningsassay (ICS). Blod opsamlet til immunologiske undersøgelser vil blive brugt som følger: PBMC-isolering og opbevaring til immunologiske undersøgelser beskrevet ovenfor; Fuldblod i Lithium Heparin mikrotainer til absolut blodcelletælling ved flowcytometri (dekonvolution til transkriptomik) og til interferon gamma-frigivelsesassays; plasma og serum til opløselige immunmediatorer ved ELISA og til total og SARS-Cov2 specifik IgG, IgM og IgA ELISA.

Diagnostiske tests:

PCR: Molekylær diagnose af SARS-Cov2 vil blive udført ved at bruge RT-PCR-kits i henhold til ICMR-retningslinjerne. Serologi: Antistof IgG/IgM Covid-19 hurtig testkit vil blive brugt. Røntgen af ​​thorax sammen med symptomscreening: For at udelukke tuberkulose

Undergruppeanalyse

1. Den primære analyse vil blive udført ved hjælp af hele kohorten
2. Der vil blive foretaget en stratificeret analyse for forskellige aldersgrupper og efter risikogrupper baseret på komorbiditet. Dette vil gøre det muligt at vurdere vaccineeffektiviteten i mere homogene undergrupper og kontrollere effekten af ​​modifikation på tværs af strata
3. Stratificeret analyse vil også blive udført for forskellige geografiske fordelinger og erhverv
4. Immunologisk analyse vil blive udført i en undergruppe af individer (n=200)