BCG-rokote vähentää sairastuvuutta ja kuolleisuutta iäkkäillä henkilöillä COVID-19-hotspoteissa

Rekrytointialue: Lockdown 2.0:n mukaan maa on luokiteltu kolmeen avainalueeseen: punainen, oranssi ja vihreä (26). Nämä vyöhykkeet tukevat hallituksen ilmoittamaa klusterin eristyssuunnitelmaa ja avaavat samalla loput paikat.

Vihreä vyöhyke: Hallituksen uuden suunnitelman mukaan paikat, joissa ei ole toistaiseksi raportoitu yhtään COVID-19-positiivista tapausta, julistetaan vihreäksi vyöhykkeeksi. Tämä tarkoittaa, että lähes 400 Intian aluetta voidaan merkitä vihreäksi vyöhykkeeksi.

Oranssi vyöhyke: Oranssi vyöhyke saattaa nähdä rajoitetun julkisen liikenteen avaamisen ja sallia myös poikkeuksia välttämättömille palveluhenkilöstölle sekä maatalous- ja sadonkorjuutoiminnalle meneillään olevan kauden aikana. Oranssilla alueella on alle 15 COVID-19-tapausta.

Punainen vyöhyke: Punaiseksi vyöhykkeeksi julistettu piiri tai klusteri näkee ankarat rajoitukset, joissa toimintaa ei sallita tai se ei ole sallittua. Tyypillinen käsitys on, että mikä tahansa paikka, jossa on yli 15 COVID-19-positiivista tapausta, voidaan julistaa punaiseksi vyöhykkeeksi. Tutkijat sisällyttävät tähän tutkimukseen Delhin, Madhya Pradeshin, Maharashtran, Gujaratin, Tamilnadun, Rajasthanin ja muiden kiinnostuneiden osavaltioiden Red & Orange -vyöhykkeet.

Rekrytointimenetelmät: Osallistujat rekrytoidaan (i) yhteisön organisaatioissa, sairaaloissa, korkeakouluissa ja muissa laitoksissa suurelle yleisölle esitettävän tiedon avulla. (ii) Riviluettelosta, joka on laadittu yli 60-vuotiaista aikuisista hotspot-alueiden väestönlaskentatiedoista. (iii) Osallistujat rekrytoidaan myös käyttämällä mainosta +/- rekisteröintilomaketta, jonka eettiset toimikunnat ovat virallisesti hyväksyneet ja jotka jaetaan tai julkaistaan

1. sanomalehtiä tai muuta kirjallisuutta levitettäväksi.
2. Esitysten kautta (esim. esitykset luennoilla tai kutsuseminaareissa). (iv) Tätä tutkimusta varten perustetaan yhteisön neuvoa-antava lautakunta, ja sen jäsenten apua otetaan mukaan tutkimukseen rekrytointiin. Kiinnostuneille annetaan yksityiskohtaista tietoa tutkimuksesta ja osallistumisvaatimukset. Osallistujille jaetaan esite tutkimuksesta ja potilastietolomake. Heillä on mahdollisuus esittää kysymyksiä ja keskustella tutkimusryhmän jäsenen kanssa. Jos he ovat edelleen kiinnostuneita ja halukkaita osallistumaan, heidät kutsutaan osallistumaan seulonnan arviointimenettelyyn.

Tutkimusmenettelyt: Osallistujat, jotka täyttävät osallistumiskriteerit, rekrytoidaan ei-satunnaistetulla tavalla saatuaan suostumuksensa osallistua tutkimukseen. Jokaiselle potilaalle annetaan ennen suostumuksen allekirjoittamista tietoasiakirja, josta käy selvästi ilmi tutkimukseen osallistumiseen liittyvät riskit ja edut. Osallistujien tunnistamiseen osallistuville osallistujille annetaan peräkkäin tutkimusnumero kullekin tutkimuskeskukselle osoitettujen potilasnumeroiden mukaan.

Osallistujat nähdään lähtötilanteessa ilmoittautumisen, alustavan tiedonkeruun (yksityiskohtainen sairaushistoria, mukaan lukien aiempi h/o BCG-rokotus ja todisteet BCG-rokotteen arpista), rintakehän röntgen-PA-näkymä PTB:n poissulkemiseksi, verinäytteiden otto vasta-aineiden varalta. testaus (2 ml) ja PCR (nenänielun vanupuikko).

Tukikelpoisille osallistujille annetaan BCG päivänä 0. Osallistujia seurataan viikoittain puhelimitse ensimmäisen 2 kuukauden ajan ja heitä pyydetään täyttämään standardoitu kyselylomake. Kuukausina 1, 3 ja 6 tullaan käymään henkilökohtaisesti ja kuukaudet 2 ja 5 täytetään puhelimitse. Osallistujilta testataan COVID-vasta-aineet kuukauden 3 ja 6 kohdalla. Jos tulos on positiivinen, nenän/kurkun vanupuikko otetaan PCR-testiä varten vahvistusta varten. Osallistujia pyydetään myös soittamaan tutkimushenkilöstölle mahdollisten haittavaikutusten tai sairauden sattuessa. Sen jälkeen osallistujia seurataan kuukausittain kuuden kuukauden ajan.

Osallistujille annetaan päiväkirjakortti (paperi), jossa on ohjeet täytettäväksi haittatapahtumien varalta, sekä 24 tunnin hätäpuhelinnumero, jolla voidaan tarvittaessa ottaa yhteyttä päivystävään tutkimuslääkäriin. Heille opastetaan, kuinka he voivat itse arvioida näiden haittavaikutusten vakavuuden. Päiväkirjakortissa on myös tilaa itse dokumentoida ei-toivotut haitat ja onko oireiden lievittämiseen käytetty lääkitystä.

Kaikilta osallistujilta kerätään veren lisäksi nenänielun vanupuikkoja.

qRT-PCR-testiä harkitaan qRT-PCR:n positiivisen/negatiivisen tilan uudelleen vahvistamiseksi ilmoittautumisen yhteydessä. Tämän kohortin osajoukosta (15 % näytteestä), joka suostuu immunologiseen alatutkimukseen, kerätään lähtötilanteessa 20 ml verta immunologista ja biomarkkerianalyysiä varten. He toimittavat myös ylimääräisiä verinäytteitä (20 ml) 1, 3 ja 6 kuukautta rokotuksen jälkeen immunologisia ja biomarkkeritutkimuksia varten.

Verenotto: Tutkijat keräävät 2 ml laskimoverta saatuaan suostumuksen osallistujilta. Tutkijat keräävät näytteen ruiskulla noudattaen kaikkia turvaohjeita ja siirtävät näytteen seerumin erotusputkiin. Kun näytteiden kerääminen kaikilta osallistujilta on suoritettu, näyte kuljetetaan lähimpään piirin kansanterveyslaboratorioon (DPHL)/Virus Research and Diagnostic Laboratory Network (VRDLN) -laboratorioon kylmäketjussa. Laboratoriossa seerumi erotetaan ja käytetään nopeaan vasta-ainetestaukseen. SARS-CoV 2 -spesifisten vasta-aineiden havaitseminen suoritetaan käyttämällä ICMR-validoitua SARS-CoV-2-vasta-ainetestiä. Lateral Flow -pohjainen immuunikromatografinen testi havaitsee SARS-CoV 2 -spesifiset vasta-aineet (IgG/IgM) 15-20 minuutin läpimenoajalla. Värillisten juovien läsnäolo testi- ja kontrolliviivoilla osoittaa SARS-CoV-2-vasta-aineiden läsnäolon (positiivinen tulos) näytteessä. Värillisen juovan puuttuminen testiviivasta osoittaa SARS-CoV-2-vasta-aineiden puuttumisen (negatiivinen tulos).

Immunologinen analyysi: Rokotteiden immuunivasteen ensisijaiset kiinnostavat muuttujat ovat niiden CD4+- ja CD8+ T-solujen prosenttiosuus, jotka ilmentävät IFN-y-, TNF-, IL-2-, IL-17-, IL-22-, CD107a-, perforiini-, grantsyymi B- ja Granulysiini yksinään tai yhdistelmänä vasteena stimulaatiolle SARS-Cov-2- ja BCG-antigeeneillä. Kiinnostavia toissijaisia ​​muuttujia olisivat koulutettujen monosyyttien ja muiden synnynnäisten immuunisolujen, mukaan lukien NK-solut, NKT-solut, gd-T-solut ja MAIT-solut, vaste. Vaste mitataan virtaussytometrialla intrasellulaarisessa sytokiinivärjäys (ICS) -määrityksessä. Immunologisia tutkimuksia varten kerättyä verta käytetään seuraavasti: PBMC:n eristäminen ja varastointi edellä kuvattuja immunologisia tutkimuksia varten; Kokoveri litiumhepariinimikrotainerissa absoluuttista verisolujen laskemista varten virtaussytometrialla (dekonvoluutio transkriptiomiikkaa varten) ja interferonin gammavapautumismäärityksiin; plasma ja seerumi liukoisille immuunivälittäjille ELISA-menetelmällä sekä kokonais- ja SARS-Cov2-spesifiselle IgG-, IgM- ja IgA-ELISA:lle.

Diagnostiset testit:

PCR: SARS-Cov2:n molekyylidiagnoosi tehdään käyttämällä RT-PCR-sarjoja ICMR-ohjeiden mukaisesti. Serologia: Vasta-aine IgG/IgM Covid-19-pikatestisarjaa käytetään. Rintakehän röntgenkuvaus yhdessä oireiden seulonnan kanssa: Tuberkuloosin poissulkemiseksi

Alaryhmäanalyysi

1. Ensisijainen analyysi suoritetaan käyttämällä koko kohorttia
2. Ositusanalyysi tehdään eri ikäryhmille ja riskiryhmittäin rinnakkaissairauksien perusteella. Tämä mahdollistaa rokotteen tehokkuuden arvioimisen homogeenisemmissa alaryhmissä ja muuntelun vaikutuksen tarkistamisen eri kerroksissa
3. Stratified analyysi tehdään myös eri maantieteellisille jaloille ja ammateille
4. Immunologinen analyysi tehdään osalle yksilöitä (n = 200)