BCG-vaccin för att minska sjuklighet och dödlighet hos äldre individer i hotspots för covid-19

Rekryteringsområde: Under Lockdown 2.0 har landet klassificerats i tre nyckelzoner - röd, orange och grön (26). Dessa zoner kommer att stödja den klusterinneslutningsplan som regeringen annonserat, samtidigt som de öppnar upp resten av platserna.

Grön zon: Platser som hittills inte har rapporterat ens ett enda positivt fall av covid-19 kommer att förklaras som grön zon enligt regeringens nya plan. Det betyder att nästan 400+ distrikt i Indien kan kvalificera sig för att bli taggade som grön zon.

Orange zon: Orange zon kan se öppnandet av begränsad kollektivtrafik och även tillåta undantag för viktig servicepersonal och jordbruks- och skördeverksamhet för den pågående säsongen. Orange zone kommer att ha mindre än 15 fall av covid-19.

Röd zon: Ett distrikt eller kluster som förklarats som en röd zon kommer att se allvarliga restriktioner med noll eller ingen aktivitet tillåten. Typisk förståelse är att varje plats med fler än 15 covid-19-positiva fall kan deklareras som en röd zon. Utredarna kommer att inkludera de röda och orangea zonerna i Delhi, Madhya Pradesh, Maharashtra, Gujarat, Tamilnadu, Rajasthan och andra intresserade stater för denna studie.

Rekryteringsmetoder: Deltagare skulle rekryteras genom (i) information som presenteras i samhällsorganisationer, sjukhus, högskolor och andra institutioner för allmänheten. (ii) Från en radlista upprättad över vuxna över 60 år från folkräkningsdata för hotspotområdena. (iii) Deltagare kommer också att rekryteras med hjälp av en annons +/- registreringsformulär som formellt godkänts av etikkommittén och distribueras eller publiceras i

1. tidningar eller annan litteratur för cirkulation.
2. Via presentationer (t.ex. presentationer vid föreläsningar eller inbjudna seminarier). (iv) Community Advisory Board kommer att skapas för denna studie och hjälp av medlemmarna i denna styrelse kommer att tas för rekrytering till studien. Intresserade individer kommer att ges detaljerad information om studien och kraven för deltagande kommer att tillhandahållas. Deltagarna kommer att få broschyr om studien och patientinformationsblad. De kommer att ha möjlighet att ställa alla frågor de kan ha och att prata med en studiegruppsmedlem. Om de fortfarande är intresserade och villiga att delta kommer de att bjudas in att delta i screeningsutvärderingsförfarandet.

Studieprocedurer: Deltagare som uppfyller inklusionskriterierna kommer att rekryteras på ett icke-randomiserat sätt efter att ha erhållit sitt samtycke att delta i studien. Ett informationsdokument som tydligt anger riskerna och fördelarna med deltagandet i studien kommer att ges till varje patient innan samtycke undertecknas. När det gäller deltagaridentifiering kommer ett studienummer att tilldelas sekventiellt till inkluderade deltagare, enligt intervallet av patientnummer som tilldelats varje studiecenter.

Deltagarna kommer att ses vid baslinjen för inskrivning, initial datainsamling (en detaljerad medicinsk historia inklusive h/o tidigare BCG-vaccination och bevis på BCG-vaccinationsärr att notera), röntgenbild från bröstet för att utesluta PTB, blodprovstagning för antikropp testning (2 ml) och PCR (nasofaryngeal pinne).

Kvalificerade deltagare kommer att administreras BCG på dag 0. Deltagarna kommer att följas upp varje vecka per telefon under de första 2 månaderna och ombeds att fylla i ett standardiserat frågeformulär. Månad 1, 3 & 6 kommer att besökas personligen medan månad 2 & 5 kommer att genomföras via telefon. Deltagarna skulle testas för covid-antikroppar vid månad 3 och månad 6. Om det är positivt, skulle näs-/halspinne samlas in för PCR-testning för bekräftelse. Deltagarna kommer också att uppmanas att ringa studiepersonalen vid eventuella biverkningar eller sjukdom. Deltagarna kommer därefter att följas upp månadsvis under sex månader.

Deltagarna kommer att få ett dagbokskort (papper), med instruktioner att fylla i vid oönskade händelser, tillsammans med akuttelefonnumret 24 timmar om dygnet för att kontakta jourläkaren vid behov. De kommer att få instruktioner om hur man själv bedömer hur allvarliga dessa biverkningar är. Det kommer också att finnas utrymme på dagbokskortet för att självdokumentera oönskade biverkningar och om medicin togs för att lindra symtomen.

Förutom blod kommer nasofaryngeala pinnprover att samlas in från alla deltagare.

qRT-PCR-test kommer att övervägas för att bekräfta qRT-PCR positiv/negativ status vid registreringen. I en delmängd av denna kohort (15 % av provet), med samtycke till immunologisk delstudie, kommer 20 ml blod att samlas in vid baslinjen för immunologisk analys och biomarköranalys. De kommer också att tillhandahålla ytterligare blodprover (20 ml) 1, 3 och 6 månader efter vaccination för immunologiska studier och biomarkörstudier.

Blodinsamling: Utredarna kommer att samla in 2 ml venöst blod efter att ha erhållit medgivande från deltagarna. Utredarna kommer att samla in provet med en spruta enligt alla säkerhetsåtgärder och överföra provet till serumseparatorrör. Efter avslutad provtagning från alla kvalificerade deltagare kommer provet att transporteras till närmaste District Public Health Laboratory (DPHL)/Virus Research and Diagnostic Laboratory Network (VRDLN) laboratorium i kylkedjan. I laboratoriet kommer serum att separeras och användas för snabb antikroppstestning. Detektion av SARS-CoV 2-specifika antikroppar kommer att utföras med ett ICMR-validerat SARS-CoV-2-antikroppstest. Det Lateral Flow-baserade immunkromatografiska testet detekterar SARS-CoV 2-specifika antikroppar (IgG/IgM) med en omloppstid på 15-20 minuter. Närvaro av färgade band vid test- och kontrolllinjer indikerar närvaron av SARS-CoV-2-antikroppar (positivt resultat) i provet. Frånvaro av färgat band i testlinjen indikerar frånvaron av SARS-CoV-2-antikroppar (negativt resultat).

Immunologisk analys: De primära variablerna av intresse för immunsvar mot vaccin kommer att vara procentandelen CD4+ och CD8+ T-celler som uttrycker IFN-γ, TNF, IL-2, IL-17, IL-22, CD107a, Perforin, Granzyme B och Granulysin ensamt eller i kombination som svar på stimulering med SARS-Cov-2 och BCG-antigener. Sekundära variabler av intresse skulle vara svaret från tränade monocyter och andra medfödda immunceller inklusive NK-celler, NKT-celler, gd-T-celler och MAIT-celler. Respons kommer att mätas med flödescytometri i analysen av intracellulär cytokinfärgning (ICS). Blod som samlas in för immunologiska studier kommer att användas enligt följande: PBMC-isolering och lagring för immunologiska studier beskrivna ovan; Helblod i Litium Heparin mikrotainer för absolut blodcellsräkning genom flödescytometri (dekonvolution för transkriptomik) och för Interferon Gamma Release Assays; plasma och serum för lösliga immunmediatorer genom ELISA och för total och SARS-Cov2-specifik IgG, IgM och IgA ELISA.

Diagnostiska tester:

PCR: Molekylär diagnos av SARS-Cov2 kommer att göras med hjälp av RT-PCR-kit enligt ICMR:s riktlinjer. Serologi: Antikropp IgG/IgM Covid-19 snabbtestkit kommer att användas. Bröströntgen tillsammans med symtomscreening: För att utesluta tuberkulos

Undergruppsanalys

1. Den primära analysen kommer att utföras med hjälp av hela kohorten
2. En stratifierad analys kommer att göras för olika åldersgrupper och riskgrupper baserat på komorbiditet. Detta kommer att göra det möjligt att bedöma vaccinets effektivitet i mer homogena undergrupper och kontrollera effekten av modifiering över strata
3. Stratifierad analys kommer också att göras för olika geografiska utbredningar och yrken
4. Immunologisk analys kommer att utföras i en undergrupp av individer (n=200)