使用单胚胎移植政策的体外程序中的延迟胚胎移植

该研究被设计为一项前瞻性、随机、两臂、平行、非盲法研究，在此期间，研究人员将包括 138 对夫妇（每组 69 对）的 IVF / ICSI 用户。 周期取消或刺破但没有胚胎移植（由于未获得卵母细胞、未受精或胚胎发育停滞）将不包括在研究中。 将通过连续随机抽样程序将夫妇分配到每个组。 随机列表将专门为此项目创建，并由研究团队以外的人员妥善保管：

• 第一组（实验）：不进行新鲜移植，冷冻保存最优质的胚胎。 在冷冻保存的胚胎的后期周期中进行选择性移植。
• 第二组（对照）：最优质胚胎的新鲜移植。

研究科目：

来到 Virgen de las Nieves 大学医院人类生殖科进行第一或第二周期 IVF / ICSI 的患者。 将根据将他们归类为良好生殖预后的纳入标准选择夫妇（这与通常的 eSET 做法一致）。

夫妻只能参加一个周期的研究。 每对夫妇将接受采访以解释研究的特点，并将获得一份信息表。 必须获得每对夫妇的书面知情同意书。 由研究组外负责随机名单保管的人员分配相应的治疗组。

在开始研究之前，伦理委员会通过安达卢西亚生物医学研究伦理门户网站处理伦理批准。

为了评估零假设的目的，该假设包括接受选择性延迟单个胚胎移植的女性组和接受选择性新鲜胚胎移植女性组的活产率相等，80% 的功效建立的目的是通过对两个独立样本进行双侧卡方检验来检测统计上的显着差异，考虑到显着性水平为 5%，并假设接受新鲜转移的女性群体中的比例为 50.9% , 接受延期选拔转移的女性群体比例为 78%，女性占总人数的比例为 50%，每组需要包括 48 名女性，目标是获得96个实验单位在研。 考虑到预期辍学率为十分之三的女性，每组必须包括 69 名女性。 138 名女性将按照特定软件（Epidat，流行病学数据分析程序制表）生成的一系列随机数，使用随机程序分配到其中一组。 版本 3.1)。

方法 患者必须接受促排卵治疗，以实现多卵泡发育。 将使用所谓的“长模拟”GnRH 激动剂方案。 这包括从周期的第 22 天开始给予 0.1 mg/天的 GnRH 类似物（Decapeptyl 0.1；Lasa，巴塞罗那，西班牙）直到开始给予促性腺激素的那一天，其中剂量减少 50% 直到hCG 日。 激动剂给药 10-14 天后，通过卵巢阴道超声（无卵泡和囊肿）和血清雌二醇测定（<50 pg / mL）检查垂体抑制。 如果确认进行了这种医学垂体切除术，则每天给予 300 IU 重组 FSH (FSHr)（Gonal F, Serono, Madrid, Spain）两天，并从第 3 天到第 7 天给予 150 IU FSHr。 在这一天，进行卵泡发育的超声监测和血清雌二醇测定，以再次调整每个患者的 rFSH 剂量。 一旦卵泡反应充分（超过 3 个直径大于 18 毫米的卵泡），使用 6,500 IU 的 hCG（Ovitrelle，Merck，Darmstadt，德国）触发排卵。

然后将进行 IVF / ICSI 和胚胎培养。 要进行精子显微授精 (ICSI)，必须从卵母细胞中去除卵丘和辐射冠。 为了减少，冠卵母细胞簇复合体浸没在含有 80 IU/mL 透明质酸酶（HYASE，IVF Science Scandinavia，瑞典哥德堡，瑞典）的溶液中 10-20 秒，使用巴斯德吸管多次吸出复合体。 显微授精技术是在倒置显微镜下使用 Eppendorf 和 Narishigue 显微操作器和显微注射器进行的。 体外受精 (IVF) 在五孔板中进行，在每个孔中放置 0.5 mL IVF 培养基（瑞典 Vitrolife）和 0.5 mL Ovoil（瑞典 Vitrolife）。 每孔留五个卵丘，加入 100,000 个精子/mL。 在这两种情况下，卵母细胞都在 Thermo-Fisher 培养箱中培养，在形态动力学平台 (PrimoVision) 中，每 5-10 分钟拍摄一次卵母细胞照片。 接下来的几天进行分类评估，根据形态动力学测量的分裂时间和西班牙生殖生物学研究协会 (ASEBIR) 于 2015 年审查的形态学标准，选择具有最佳植入潜力的日子。

第三天在第2组进行胚胎移植，根据之前的标准选择最好的胚胎。 在第 1 组中，胚胎将通过玻璃化冷冻保存，选择最好的胚胎进行延迟移植。 商业玻璃化媒体 (Medicult Vitrification, Denmark) 和存储设备将是 Cryoleaf (McGill Cryoleaf, Medicult, Denmark)。 所有冷冻保存的胚胎将在-196ºC 的液氮中储存在储存缸（法国液化空气）中。 冷冻移植前一天，使用解冻工具包（Medicult Warming，丹麦）将胚胎脱玻化。 最后，胚胎在 G2 培养基 (Vitrolife) 中洗涤，在评估胚胎质量和冷冻存活率（裂解细胞的百分比）后，将其留在培养物中直至第二天。 女性的子宫内膜通过戊酸雌二醇和黄体酮处理而准备好。 在冷冻移植当天，再次评估胚胎质量，重点是胚胎分裂。 使用与转移相同的技术进行冷冻转移。

研究限制 该项目的实施考虑到了 Virgen de las Nieves 大学医院人类生殖科的可用资源，因此在这方面似乎没有任何限制。

该研究可以通过进行植入前遗传学诊断来完成，以确定在宫内移植之前是否存在胚胎遗传学改变，但我们的单位尚未进行这项技术。 同样，囊胚移植可以提高妊娠率，但会增加胚胎移植的取消率，因此在我们的科室并不常规进行。