此页面是自动翻译的，不保证翻译的准确性。请参阅 英文版 对于源文本。

急性脑血管综合征中的细胞外囊泡表面标记。 (ElViS-ACS)

2024年4月16日 更新者：Dr. med. Carlo Cereda、Ospedale Civico, Lugano

最终血液生物标志物对中风诊断和预后的临床意义有限，主要是因为临床评估和量表（提供中风严重程度）或神经影像学（提供病变的准确大小）是临床结果预测更可靠的预测因素。 在临床实践中，找到一种生物标志物会更有用，它可以帮助医生在临床图片和影像提供有限支持的情况下进行定位。

短暂性脑缺血发作（TIA）是一个典型的例子，生物标志物有利于确认和区分脑缺血过程与中风模拟。 已经对 TIA 的诊断生物标志物进行了研究，但没有一个潜在的候选标志物达到了 TIA 诊断的足够准确性。 我们的小组发现，细胞外囊泡 (EV) 可用作检测 TIA 患者脑缺血的生物标志物，因为 EV 表面抗原谱在短暂症状的患者中似乎有所不同，被判定很可能是由脑缺血引起的，与那些症状不太可能是由于脑缺血引起的患者相比。 我们的研究引起了科学界的兴趣，认识到血源性 EV 分析在扩大正确诊断和分类 TIA 和中风事件的可能性、将其与 TIA 或中风模拟事件区分开来方面的前景广阔的作用，对未来的管理和治疗具有重要影响急性缺血性脑血管综合征患者。 我们的方法的有效性需要在更大规模的前瞻性多中心研究中进行测试。

研究概览

地位

招聘中

条件

干预/治疗

详细说明

细胞外囊泡的表征 细胞外囊泡 (EV) 将在预先澄清的血清样本中进行表征（参见血液样本的转移和管理）。 EV 将通过纳米颗粒跟踪分析、蛋白质印迹、基于珠子的流式细胞术（直接和反向方法）和 ELISA 进行表征。

我们将使用配备 405 nm 激光和纳米颗粒跟踪分析 NTA 2.3 分析软件的 NanoSight LM10（马尔文仪器公司，英国）通过纳米颗粒跟踪分析 (NTA) 评估血清纳米颗粒 (NP) 的直径和浓度。 相机将记录电动汽车的布朗运动，并通过斯托克斯-爱因斯坦方程计算每毫升电动汽车的尺寸和数量。 每次分析将录制三个 60 秒的视频。

EV 免疫捕获后，将对蛋白裂解物进行蛋白质印迹分析（使用覆盖有针对 EV 特异性四跨膜蛋白、CD9、CD63 和 CD81 的抗体的珠子）。 代表性样品的印迹将与针对表面或 EV 内表达的特定标记物（TSG101、Syntenin-1、CD81、Alix）和潜在污染物（GRP94、载脂蛋白 A1、载脂蛋白 B48）的一抗一起孵育。

如前所述，将使用基于标准化多重珠的流式细胞术分析，使用 MACSPlex 人外泌体试剂盒（Miltenyi Biotec；Bergisch Gladbach，德国）进行 EV 分析。 22 将同时检测 EV 膜上常见的 37 种不同表面抗原（包括活化血小板、内皮细胞和炎症细胞的标记物）。 将从每个标记的 MFI 值中减去背景，然后使用 CD9、CD63 和 CD81 的平均荧光强度水平 (MFI) 进行标准化。 表达水平将报告为每种 EV 表面抗原的归一化 MFI（nMFI；%）（中值和四分位数范围）。

通过多重检测进行初步筛选后，单一候选 EV 生物标志物将通过反向流式细胞术和 ELISA 技术进行确认。

逆流式细胞术检测将通过用 CD9-CD63-CD81 抗体（EpCam；JSR Micro）包被的捕获珠来分离 EV，然后与针对单一 EV 表面抗原的荧光染料偶联抗体一起孵育，这与患者初始诊断相关。通过 MACSPlex 检测进行筛选。 与同种型匹配的抗体一起孵育的珠子以及在没有囊泡的情况下孵育的珠子将作为对照。 候选 EV 生物标志物也将通过 ELISA 技术进行确认，按照制造商的说明使用特定抗体。

研究类型

观察性的

注册 (估计的)

200

联系人和位置

本节提供了进行研究的人员的详细联系信息，以及有关进行该研究的地点的信息。

学习联系方式

研究联系人备份

学习地点

  • 瑞士
    • Ticino
      • Lugano、Ticino、瑞士、CH-6900
        • 招聘中
        • Neurocenter of Southern Switzerland, Ospedale Civico
        • 首席研究员：
          • Carlo Cereda
        • 接触：
        • 副研究员：
          • Giovanni Bianco
        • 副研究员：
          • Lucio Barile

参与标准

研究人员寻找符合特定描述的人，称为资格标准。这些标准的一些例子是一个人的一般健康状况或先前的治疗。

资格标准

适合学习的年龄

  • 成人
  • 年长者

接受健康志愿者

不

取样方法

概率样本

研究人群

我们将招募所有因症状提示脑血管综合征而入住中风病房的患者

描述

纳入标准：

受以下因素影响：

I. 症状出现 48 小时内怀疑缺血性轻微中风（推测为血管病因且 NIHSS ≤327, 28 导致局灶性脑功能急性丧失）或 II. TIA（定义为持续 <24 小时的局灶性神经系统症状急性发作，推测由转诊时脑缺血引起）19 III． 症状与 I. 或 II. 相似。 但高度怀疑非缺血性疾病是该事件的原因；

2）年龄≥18岁； 3）入院后48-72小时内是否进行脑磁共振检查； 4) 基线CT/MRI是否无出血； 5) 如果获得知情同意。

排除标准：

  1. 眼部 TIA（一过性黑蒙）；
  2. MRI 的禁忌症；
  3. 怀孕;
  4. 伴随的急性/慢性炎症性疾病（例如感染、自身免疫性疾病）；
  5. 伴随的血液系统疾病；
  6. 30天内中枢神经系统感染；
  7. 30天内严重头部外伤；
  8. 90天内进行大手术。

学习计划

本节提供研究计划的详细信息，包括研究的设计方式和研究的衡量标准。

研究是如何设计的？

设计细节

队列和干预

团体/队列
干预/治疗
中风
诊断测试：细胞外囊泡 (EV) 分析

患者接受血液样本进行 EV 分析：EV 将通过纳米颗粒跟踪分析、蛋白质印迹、基于珠子的流式细胞术（直接和反向方法）和 ELISA 进行表征。

我们将使用 NanoSight LM10 通过纳米颗粒跟踪分析 (NTA) 评估血清纳米颗粒 (NP) 的直径和浓度。 EV 免疫捕获后，将对蛋白裂解物进行蛋白质印迹分析（使用覆盖有针对 EV 特异性四跨膜蛋白、CD9、CD63 和 CD81 的抗体的珠子）。 如前所述，将使用基于标准化多重珠的流式细胞术分析，使用 MACSPlex 人外泌体试剂盒（Miltenyi Biotec；Bergisch Gladbach，德国）进行 EV 分析。 22 将同时检测 EV 膜上常见的 37 种不同表面抗原（包括活化血小板、内皮细胞和炎症细胞的标记物）。
TIA
诊断测试：细胞外囊泡 (EV) 分析

患者接受血液样本进行 EV 分析：EV 将通过纳米颗粒跟踪分析、蛋白质印迹、基于珠子的流式细胞术（直接和反向方法）和 ELISA 进行表征。

我们将使用 NanoSight LM10 通过纳米颗粒跟踪分析 (NTA) 评估血清纳米颗粒 (NP) 的直径和浓度。 EV 免疫捕获后，将对蛋白裂解物进行蛋白质印迹分析（使用覆盖有针对 EV 特异性四跨膜蛋白、CD9、CD63 和 CD81 的抗体的珠子）。 如前所述，将使用基于标准化多重珠的流式细胞术分析，使用 MACSPlex 人外泌体试剂盒（Miltenyi Biotec；Bergisch Gladbach，德国）进行 EV 分析。 22 将同时检测 EV 膜上常见的 37 种不同表面抗原（包括活化血小板、内皮细胞和炎症细胞的标记物）。
中风模仿者
诊断测试：细胞外囊泡 (EV) 分析

患者接受血液样本进行 EV 分析：EV 将通过纳米颗粒跟踪分析、蛋白质印迹、基于珠子的流式细胞术（直接和反向方法）和 ELISA 进行表征。

我们将使用 NanoSight LM10 通过纳米颗粒跟踪分析 (NTA) 评估血清纳米颗粒 (NP) 的直径和浓度。 EV 免疫捕获后，将对蛋白裂解物进行蛋白质印迹分析（使用覆盖有针对 EV 特异性四跨膜蛋白、CD9、CD63 和 CD81 的抗体的珠子）。 如前所述，将使用基于标准化多重珠的流式细胞术分析，使用 MACSPlex 人外泌体试剂盒（Miltenyi Biotec；Bergisch Gladbach，德国）进行 EV 分析。 22 将同时检测 EV 膜上常见的 37 种不同表面抗原（包括活化血小板、内皮细胞和炎症细胞的标记物）。

研究衡量的是什么？

主要结果指标

结果测量
措施说明
大体时间
TIA 与 TIA 模拟的区别
大体时间：症状出现后 72 小时
确定 EV 分析（分析囊泡表面表达的抗原）的性能，添加到结构化临床（PREDISC 评分）和成像评估（脑 MRI）中，以区分 TIA 和 TIA 模拟（非缺血事件）。
症状出现后 72 小时

次要结果测量

结果测量
措施说明
大体时间
TIA 与中风的区别
大体时间：急性期，3个月和12个月
确定 EV 分析的性能，以区分 TIA（急性病变 MRI 阴性）和急性缺血性中风（AIS，MRI 证实）。
急性期，3个月和12个月
中风病因学
大体时间：急性期，3个月和12个月
确定 EV 分析的性能，以对缺血事件的预先指定原因进行分类
急性期，3个月和12个月

合作者和调查者

在这里您可以找到参与这项研究的人员和组织。

赞助

Ospedale Civico, Lugano

合作者

Giovanni Bianco
Lucio Barile

研究记录日期

这些日期跟踪向 ClinicalTrials.gov 提交研究记录和摘要结果的进度。研究记录和报告的结果由国家医学图书馆 (NLM) 审查，以确保它们在发布到公共网站之前符合特定的质量控制标准。

研究主要日期

学习开始 (实际的)

2022年11月18日

初级完成 (估计的)

2025年12月31日

研究完成 (估计的)

2026年1月31日

研究注册日期

首次提交

2024年3月13日

首先提交符合 QC 标准的

2024年3月19日

首次发布 (实际的)

2024年3月20日

研究记录更新

最后更新发布 (实际的)

2024年4月18日

上次提交的符合 QC 标准的更新

2024年4月16日

最后验证

2024年4月1日

更多信息

与本研究相关的术语

其他相关的 MeSH 术语

其他研究编号

  • NSISTRCR_2201

计划个人参与者数据 (IPD)

计划共享个人参与者数据 (IPD)？

不

药物和器械信息、研究文件

研究美国 FDA 监管的药品

不

研究美国 FDA 监管的设备产品

不

此信息直接从 clinicaltrials.gov 网站检索，没有任何更改。如果您有任何更改、删除或更新研究详细信息的请求，请联系 register@clinicaltrials.gov. clinicaltrials.gov 上实施更改，我们的网站上也会自动更新.

搜索类似试验

赞助者和合作者

医疗条件

药物干预

CROs by country

CROs in Zimbabwe

条件

罕见疾病

药物干预

膳食补充剂

赞助者/合作者

地点

3
订阅