Věk krve při transfuzi srpkovitých buněk

Vyšetřovatelé sestavili multidisciplinární vyšetřovací tým, aby prozkoumal potenciální účinky starších jednotek červených krvinek u dospělých se srpkovitou anémií (SCD). Pracovníci studie mají k dispozici předběžné údaje, které ukazují: 1) mezi řediteli krevních bank panuje nejednotnost ohledně účinků starších jednotek u dospělých s SCD, 2) v našem ústavu jsou mnoha dospělým podávány starší jednotky, 3) starší jednotky aktivují makrofágy a 4) tato fyziologie podporovaná staršími jednotkami je spojena se zvýšeným rizikem infekce. Náš tým je nyní připraven učinit další vyšetřovací krok: prospektivní, randomizovanou studii.

V Milwaukee je 1/3 jednotek transfuzovaných dospělým s SCD starší než 30 dní, ale celostátně některé omezují transfuzi starších jednotek. Asi čtyři sta dospělých dostávají péči na klinice srpkovité anémie pro dospělé ve Froedtert Hospital v Milwaukee, z nichž asi 23 dostává chronické ambulantní transfuze kvůli chronické bolesti nebo profylaxi mrtvice. Transfuze se podávají dospělým bez ohledu na věk skladování, s výjimkou případu výměny červených krvinek, pro kterou platí zásada používat jednotky staré méně než 14 dní. V 3letém retrospektivním přehledu transfuzí podaných dospělým s SCD bylo prostou transfuzí podáno 627 jednotek během 281 ambulantních setkání. Celková střední doba skladování jednotek byla 22 dní (rozmezí: 2-42 dní) a 25 % jednotek podaných transfuzí bylo skladováno 33 dní nebo déle.

Za účelem zjištění názorů a politik jiných ředitelů nemocničních krevních bank ohledně používání starších jednotek červených krvinek u pacientů s SCD provedli pracovníci studie celostátní průzkum (n=90). Zatímco pouze 23 % respondentů mělo pro pacienty s SCD politiku omezení věku při skladování, 31 % si myslelo, že starší jednotky nejsou tak účinné jako mladší jednotky, a 65 % věřilo, že jsou potřeba politiky založené na důkazech.

Dospělí s SCD mohou být citliví na účinky fyziologie starší jednotky, protože jsou náchylní k infekci, jsou zaníceni a špatně vybaveni k manipulaci s přebytkem železa. V kohortě 40 dospělých v ustáleném stavu s SCD vyšetřovatelé specificky měřili markery zánětu a přebytku železa. Bylo zjištěno, že vysoce citlivý C-reaktivní protein, marker systémového zánětu, je výrazně zvýšený (medián 5,6 mg/l, rozmezí 0,4-60 mg/l; referenční rozmezí <1,0 mg/l), stejně jako feritin, marker zásoby železa (medián 2 969 ng/ml, rozmezí 20-12 300 ng/ml; referenční rozmezí 13-400 ng/ml).

Čtyřicet chronicky transfuzovaných dospělých s SCD bude randomizováno dvojitě zaslepeným způsobem, aby dostali jednotky ve věku ≥ 30 dnů nebo ≤ 10 dnů pro maximálně 3 po sobě jdoucí ambulantní transfuze. Subjekty budou randomizovány do bloků po 5 a stratifikovány podle věku: bude zařazeno alespoň 10 subjektů z každého z věkových rozmezí 16-30 a 31-60 let. Z jednotek červených krvinek budou před transfuzí odebrány sterilní vzorky. Pacientovi bude také odebrána periferní krev 1 měsíc před randomizací, bezprostředně před transfuzí a 2 a 24 hodin po transfuzi. Hemoglobin bude měřen před transfuzí, 2 a 24 hodin po transfuzi a 2 týdny po transfuzi. Účastníci budou denně vyplňovat standardizované deníky, aby dokumentovali příznaky infekce, bolesti SCD, léky a použití na pohotovostním oddělení (ED) nebo v nemocnici. Budou shromažďovány deníky a účastníci budou hodnoceni při každém transfuzním setkání a 4 týdny po poslední transfuzi. Aby bylo zajištěno dodržování, koordinátoři budou každý týden kontaktovat subjekty za účelem vyplnění deníků.

Pracovníci studie vyhodnotí červené krvinky před a po transfuzi pro fosfatidylserin (PE), fosfatidylethanolamin (PS) a mikročástice, jak je uvedeno výše u všech vzorků krve. Bílé krvinky budou izolovány zavedenými separačními technikami. Populace bílých krvinek, které jsou předmětem zájmu, budou definovány jejich umístěním na dopředném rozptylovém/bočním rozptylovém grafu a jejich pozitivitou pomocí klíčových identifikačních markerů značených fluorochromem (makrofágy: CD14, neutrofily: CD16). Jakmile jsou identifikovány požadované buněčné populace, budou buňky hodnoceny na různé markery aktivace. Frakce plazmy z každého pacienta a jednotky červených krvinek se odkloní, aby se stanovily koncentrace volného hemu/hemoglobinu, cytokinů a NTBI, v daném pořadí.