Infuze dárcovských cytokinem indukovaných zabíječských buněk (CIK) u hematologických pacientů s relapsem po transplantaci haploidentických kmenových buněk (Haplo-CIK)

Recidiva onemocnění je hlavní příčinou mortality po alogenní transplantaci hematopoetických kmenových buněk (HSCT) pro hematologické malignity. Když alogenní transplantace selže, nejběžnější terapeutickou strategií je zvýšení protinádorové aktivity imunitního systému dárce prostřednictvím infuze dárcovských lymfocytů (DLI). Použití DLI může účinně léčit omezené relapsy, ale může vyvolat reakci štěpu proti hostiteli (GvHD) v rozsahu 40-60 % pacientů. S pokrokem v postupu HSCT se stalo použití HLA-neshodných (haplo) rodinných dárců proveditelným a rozšířilo příležitost pro HSCT na téměř všechny pacienty, kterým chybí HLA-shodný dárce. Díky slibným výsledkům zákroku a snadnějšímu přístupu k dárci prudce narůstá počet transplantací haplo-HSCT. Strategie zaměřené na vyvolání imunitní kontroly relapsu po haplo-HSCT jsou však brzděny absencí prospektivních údajů, které by vedly léčbu, a strachem z indukce GvHD v tomto nastavení hluboké HLA disparity mezi dárcem a příjemcem.

• Navzdory tomu, že použití DLI v haplo-HSCT není standardní praxí, jsou DLI příležitostně empiricky používány, zejména kvůli nedostatku alternativní léčby.
• Cytokine Induced Killer (CIK) buňky jsou T lymfocyty exprimující marker CD56, tzn. CIK jsou CD3/CD56 dvojitě pozitivní buňky. CIK buňky jsou produkovány in vitro inkubací krevních leukocytů podle specifického expanzního protokolu, který zahrnuje počáteční stimulaci interferonem-gama a anti-CD3 protilátkou, následovanou expanzí (interleukinem-2) IL-2. Buňky CIK jsou cytotoxické, protinádorové buňky neomezené na MHC, které sdílejí charakteristiky jak T, tak NK buněk a vykazují in vivo velmi silnou cytolytickou aktivitu proti leukémii, štěp proti leukémii, přičemž v podstatě postrádají reaktivitu štěpu proti hostiteli. Vykazují přirozenou cytotoxicitu bez MHC (receptor T lymfocytů) nezávislou na TCR proti maligním cílovým buňkám, zahrnující uvolňování perforinu a granzymu a NKG2D, stejně jako CD56 a další malé cílové molekuly. V posledních 15 letech výzkumníci rozsáhle studovali použití cytokinem indukovaných zabíječských buněk (CIK) jako alternativní buněčné terapie k léčbě relapsu onemocnění po HSCT. Klíčovým rysem buněčné terapie CIK v kontextu haplo-HSCT je nižší riziko indukce GvHD ve srovnání s DLI, což by mohlo umožnit vyhnout se ničivému účinku akutní a chronické GvHD ve smyslu snížení přežití, kvality života, invalidity a potřeba další péče. Kromě dramatického dopadu na kvalitu a kvantitu života pacientů jsou náklady na zdravotnický systém na řízení akutní a chronické GvHD skutečně mimořádně vysoké. V tomto ohledu byly buňky CIK považovány za buněčnou terapii, která je spojena s příznivějším terapeutickým indexem ve srovnání s DLI.
• V rané studii fáze I badatelé pozorovali remise u 3 z 11 pacientů, kteří byli léčeni infuzí buněk CIK v době, kdy byly detekovatelné maligní buňky. V každém z těchto 3 případů byl pacient dříve neúspěšně léčen konvenční DLI. Úspěšná indukce remise infuzí buněk CIK po neúspěšné DLI naznačuje, že aktivita GVL (štěp versus leukémie) buněk CIK byla přisuzována NK-T buňkám. V následné fázi I klinické studie byla hodnocena proveditelnost použití buněk CIK od sourozeneckých dárců shodných s HLA. Pomocí návrhu eskalace dávky výzkumníci ukázali, že buňky CIK mohou být podávány v dávkách až 1x10^8 na kg tělesné hmotnosti příjemce, aniž by došlo k akutní toxicitě související s infuzí. Výzkumníci nedávno oznámili konečné výsledky multicentrické pilotní studie fáze II, které ukazují, že léčba CIK buňkami pro relaps po HSCT je účinná s nízkou toxicitou ve smyslu GvHD ve srovnání s DLI. Pro tento návrh je důležité, že v této studii bylo 5 pacientů léčeno v kontextu haplo-HSCT. Ty nevykazovaly žádnou odlišnou reakci nebo bezpečnostní obavy ve srovnání s jinými pacienty, což naznačuje proveditelnost tohoto přístupu v haploidentickém kontextu. Podobně další studie buněčné terapie CIK v HSCT zahrnující také pacienty s haploidentickými dárci potvrdila proveditelnost a bezpečnost tohoto přístupu. Vzhledem k tomu, že infúzní T lymfocyty jsou spojeny s rizikem indukce GvHD, zejména v prostředí haploidentické transplantace, je třeba v rané fázi klinických studií testovat nové buněčné terapie manipulované tak, aby minimalizovaly GvHD a zároveň zvýšily účinnost štěpu proti leukémii. Cílem předkládaného návrhu je tedy použít buňky CIK jako platformu pro bezpečnou a účinnou buněčnou terapii v kontextu haploidentické transplantace. Vzhledem k tomu, že ve studiích fáze I/II nebylo dosaženo žádné toxicity omezující dávku a dosud se neobjevil žádný jasný vztah mezi dávkou a toxicitou i odpovědí, plánovali výzkumníci v této studii použít konečnou standardní dávku naší předchozí studie fáze II 5x106 buněk/kg, 5x10^6 a 10x10^6 buněk/kg bez úpravy plánu. Každé 3 týdny budou podávány tři infuze buněk CIK.