Individualizované postprandiální glukózové odpovědi u diabetu 1. typu

Nábor: Účastníci budou získáváni pomocí inzerátů prostřednictvím univerzitních kanálů. Vyšetřovatelé se také obrátí na místní a národní diabetologické charitativní organizace (Diabetes UK, JDRF), s nimiž vyšetřovatelé úzce spolupracují na propagaci prostřednictvím písemných publikací (časopisy pro pacienty), webových stránek, sociálních médií a skupin na podporu pacientů. Kromě toho budou vyšetřovatelé kontaktovat pacienty, kteří se dříve účastnili našeho výzkumu a kteří souhlasili s tím, aby byli kontaktováni ohledně budoucího výzkumu. Kontaktní údaje na výzkumný tým budou uvedeny v inzerátech; zainteresovaným účastníkům bude k dispozici úvodní telefonický hovor, aby mohli prodiskutovat studii, odpovědět na jakékoli otázky a získat kontaktní informace pro zaslání balíčku informací o studii včetně informačního listu účastníka. Účastníci dostanou 6 týdnů na rozhodnutí, zda se studie zúčastní.

Předběžná návštěva: Pacienti se zúčastní předběžné návštěvy v našich specializovaných laboratořích na University of Sunderland, aby posoudili způsobilost a získali písemný informovaný souhlas od člena výzkumného týmu vyškoleného v GCP. Při této návštěvě budou souhlasní účastníci vybaveni zaslepeným CGM v reálném čase a akcelerometrem a bude jim poskytnut jídelní deník. Během této návštěvy pacienti vyplní dotazník k posouzení jejich zdravotní anamnézy a fyzické aktivity. Jak zařízení CGM, tak akcelerometr budou účastníci nosit po dobu jejich účasti ve studii; obě zařízení včetně sběru dat vrátí účastníci výzkumnému týmu buď osobně, nebo poštou (pomocí předplacené obálky).

Měření CGM: Během předběžné návštěvy laboratoře bude vložen malý přístroj CGM (CGM; Freestyle Libre Pro; Abbott Diabetes Care). Jedná se o malý diskrétní, voděodolný senzor s tenkým vláknem (tloušťka <0,4 m), které se vkládá (bezbolestně) 5 mm pod povrch kůže na horní části paže. Senzor bude zaveden do podkožní tkáně na přední části paže. Místo zavedení bude považováno za ekvidistantní mezi nejstřednější částí horní části paže a bude označeno nesmazatelným inkoustem, takže počáteční umístění může být replikováno při následných zavedeních v nepravděpodobném případě, že by senzor selhal. Senzor je zkalibrován z výroby, takže je mnohem pohodlnější a odstraňuje riziko nepřesností senzoru v důsledku chyby uživatele při kalibraci (nepřesnost kapilárního měřiče, neumytí rukou atd.), které lze pozorovat u jiných zařízení CGM. Údaje o glukóze generované CGM jsou maskovány (tj. účastníci nemohou vidět své údaje o glukóze, a tak nemohou na základě těchto informací změnit svůj léčebný režim). K aktivaci a načtení dat se používá jediné čtecí zařízení. Přesnost a bezpečnost tohoto zařízení byla stanovena v T1D v celém rozsahu hladin glukózy pravděpodobně pozorovaných v této studii, včetně hladin v normálním rozmezí; nejnovější generace snímače CGM má od roku 2018 MARD <9 %. Navíc, jelikož je nyní prostřednictvím NHS lidem s T1D k dispozici nezaslepená verze tohoto zařízení s léčebnými indikacemi, je použití této technologie pro osoby s T1D považováno za přijatelné. Účastníci studie, kteří používají Freestyle Libre ke sledování svých glykemických profilů, mohou nadále používat zařízení jako obvykle, ale budou požádáni, aby nosili další zaslepený senzor. Celkově budou pacienti požádáni, aby nosili zařízení CGM po dobu 6 nepřetržitých týdnů, sestávajících ze 4 týdnů pozorování následovaných 2 týdny pozorování, během nichž bude probíhat laboratorní experimentální testování.

Akcelerometr: Účastníkům bude vydán a vybaven akcelerometr (GeneActiv, nošený na paži), který poskytne komplexní hodnocení vzorů sezení/stání (tj. přidělené držení těla) a úrovně fyzické aktivity. Údaje shromážděné z tohoto zařízení budou použity k odhadu denního energetického výdeje (pomocí apriorních řezných bodů) a výpočtu úrovní fyzické aktivity včetně času stráveného v různých polohách a činnostech během jednotlivých částí dne před a po každé návštěvě laboratoře. To umožní kvantifikaci, standardizaci a replikaci vzorců fyzické aktivity během epizod volného života. Celkově budou pacienti požádáni, aby nosili akcelerometr po dobu 2 po sobě jdoucích týdnů.

Zdravotní anamnéza: Zahrnuje: věk, pohlaví, trvání diabetu, inzulinovou terapii (průměrná celková denní dávka a bazální dávka inzulinu), související zdravotní stavy, rodinnou anamnézu T2D a kardiovaskulárního onemocnění, neznalost hypoglykémie (hodnoceno kombinací Clarke a Zlaté metody).

Hodnocení fyzické aktivity: Pacienti vyplní IPAQ (International Physical Activity Questionnaire), dotazník škály přínosů cvičení/bariér a Bariéry fyzické aktivity u diabetu 1. typu. Ty posoudí současnou úroveň účasti na fyzické aktivitě, stejně jako obecné a pro diabetes specifické faktory a překážky fyzické aktivity.

Antropometrie: Antropometrické údaje budou zahrnovat: hmotnost, výšku, obvod pasu a poměr pasu a boků. Složení těla bude stanoveno pomocí metody bioelektrické impedance [Seca mBCA 525], jak je podrobně popsáno výše. Krevní tlak bude měřen spolu s měřením indexu kotníku. Pro všechny pacienty bude vypočtena odhadovaná rychlost odstraňování glukózy (eGDR; míra inzulinové rezistence).

Posouzení stravy: Pacienti vyplní dotazník o frekvenci jídla (dietní nástroj pro výuku výživy) a bude jim poskytnuta potravinová váha a deník jídla, aby si mohli zaznamenat vážené jídlo. Celkem účastníci vyplní deník váženého jídla po dobu 1 týdne.

Darování krve: Bude proveden jeden odběr 50 ml krve, který bude retrospektivně analyzován na parametry vaskulárního a metabolického zdraví. Krev bude odebrána pomocí techniky venepunkce vyškoleným flebotomem.

Experimentální laboratorní návštěvy Předlaboratorní fáze: Před první experimentální návštěvou vyšetřovatelé posoudí glykemickou kontrolu (CGM) a vzorce fyzické aktivity (akcelerometr) po dobu 4 a 1 týdne, v daném pořadí. Pacienti budou muset používat své dietní záznamové listy k replikaci svých stravovacích návyků 48 hodin před každou experimentální laboratorní návštěvou. Pro standardizaci glykemické kontroly a biochemických parametrů bude účastníkům poskytnuto standardizované jídlo, které bude konzumováno večer před každou návštěvou experimentální laboratoře na základě jejich hmotnosti (~635 kcal; vegetariánské lasagne; Tesco). Vzhledem k tomu, že akutní cvičení může zvýšit účinek inzulinu až na 48 hodin, budou účastníci požádáni, aby během 48 hodin před každou návštěvou laboratoře přešli na středně silnou až intenzivní fyzickou aktivitu/cvičení, aby se předešlo možnému dopadu této aktivity na glykémii. a riziko hypoglykémie. Navíc během 24 hodin před každou návštěvou laboratoře budou účastníci požádáni, aby přestali užívat kofein a alkohol, o kterých je známo, že ovlivňují hladiny glukózy.

Aby se předešlo jakémukoli matoucímu vlivu hyper/hypoglykémie nebo nemoci, výzkumník zavolá ráno každého testovacího dne - pokud je hladina glukózy v krvi mimo rozmezí 4-12 mmol/l nebo pokud se účastník necítí dobře s ketony v krvi >0,6 mmol/ L, pokusná návštěva bude odložena. Dávkování a načasování podávání inzulínu, stejně jako jakékoli užívané doplňky/vitamíny, budou standardizovány po dobu trvání každého zkušebního období. Pro kontrolu potenciálního matoucího účinku inzulinového režimu (CSII vs. MDI) a medikace budou inzulinový režim a medikace zahrnuty jako kovariance do statistického modelu. Účastníkům používajícím CSII bude doporučeno, aby mezi návštěvami studie neprováděli změny nastavení podávání inzulínové pumpy a inzulínového režimu. Účastníkům léčeným MDI bude doporučeno, aby neměnili svůj inzulínový režim mezi studijními návštěvami. Vzhledem k pravděpodobnosti změn glykemické kontroly a/nebo požadavků na inzulín během delších časových období dokončí ženy před menopauzou každý stav 1 týdenním vymýváním, jako u všech ostatních účastníků. Menstruační fáze bude zaznamenána pro každý stav a kontrolována jako kovariát ve statistických modelech.

Hlavní experimentální návštěvy: V randomizovaném zkříženém designu se pacienti zúčastní dvou samostatných ranních (~08:00) laboratorních návštěv (trvajících asi 4,5 hodiny) v rámci specializovaného klinického testovacího zařízení na Univeristy of Sunderland, každou proložené jedním týdnem. Každá experimentální podmínka bude prováděna v kontrolovaném laboratorním prostředí, aby se maximalizovala vnitřní validita a minimalizovala se vlastní variabilita méně kontrolovaných „skutečných“ nastavení. Kromě přestávek na toaletu budou účastníci usazeni do pohodlného křesla a budou instruováni, aby minimalizovali nadměrný pohyb.

Při každé příležitosti a po příchodu do laboratoře po celonočním půstu zaujmou účastníci vsedě a odpočívají, zatímco jim do předloktní žíly zavedou kanylu o průměru 20 gauge (Vasofix, B. Braun, Melsungen AG, Melsungen, Německo). nedominantní rameno; Před experimentálním testováním budou odebrány vzorky žilní krve v klidu na lačno. Po počátečním odběru krve bude pacientům při každé příležitosti podána standardizovaná snídaňová směs obsahující makronutrienty. Čtyři hodiny po snídani dostanou účastníci před propuštěním domů standardizované obědové jídlo se smíšeným obsahem makronutrientů. Každé jídlo bude odpovídat obsahu sacharidů (rovná se 1g.sacharid.kg.BM-1 ), tuku, bílkovin a vlákniny, ale liší se glykemickým indexem prostřednictvím manipulace se složením sacharidů tak, aby představovalo jídlo s nízkým nebo vysokým glykemickým indexem. Podání inzulínu bude standardizováno napříč návštěvami na základě metody počítání sacharidů. Jídlům bude předcházet bolus inzulinu, vypočítaný z obvyklého poměru inzulinu k sacharidům každého účastníka (bez korekční dávky), podávaný 10 minut před jídlem pacientům léčeným na místě vpichu inzulinu standardizujícím MDI. Načasování a množství vody zkonzumované s každým jídlem a ad libitum během trvání první návštěvy budou zaznamenávány tak, aby to bylo možné opakovat při dalších návštěvách.

Odběr vzorků krve: Pravidelné vzorky krve budou odebírány ve 30minutových intervalech v průběhu 4hodinového pozorovacího okna a začnou bezprostředně před konzumací snídaňového jídla). V každém časovém bodě se odebere 10 ml plné žilní krve a rozdělí se do vakuových nádob před centrifugací při 3000 ot/min po dobu 15 minut při 4ºC. Plazma bude separována a skladována při -80 stupních Celsia pro retrospektivní analýzu nebo okamžitou analýzu pro panel vaskulárních zánětlivých a trombotických parametrů, včetně plazmatických hladin C-reaktivního proteinu (CRP), komplementu C3, fibrinogenu, inhibitorů aktivátoru plazminogenu (PAI )-1, interleukin lb, bude hodnocen pomocí standardních technik ELISA. Dalších 5 ml žilní krve bude odebráno v klidu na jednom rameni studie pro C-peptid a rutinní krevní testy (včetně HbA1c, U&E, LFT, úplný lipidový profil, poměr albuminu a kreatininu v moči (pokud nebyly provedeny do tří měsíců) zápisu). Celkem bude odebráno 8 vzorků krve s celkovým objemem krve 85 ml, což je přibližně 1/5 celkového odběru krve. Celkový objem krve, který má být odebrán, je bezpečný a je podobný jiným studiím, které výzkumníci dříve provedli u lidí s T1D. Dále vyšetřovatelé tvrdě pracovali s našimi zástupci PPI, aby minimalizovali zátěž účastníků všech studijních postupů; objem a frekvence odběrů krve byly našimi zástupci PPI považovány za přijatelné.

Období polaboratorního pozorování:

Po posledním odběru krve 7 hodin po snídani budou účastníci propuštěni z laboratoře. Glykémie bude nadále monitorována za podmínek volného života celkem 48 hodin po intervenci pomocí CGM. Protože se vyšetřovatelé zajímají o 48hodinové glukózové reakce po našem zásahu (včetně fenoménu úsvitu), účastníci dostanou dvě standardizovaná jídla, která budou konzumovat jako večeři a snídani, a budou muset opakovat svůj dietní příjem napříč studiemi po celou dobu trvání. 48hodinového období po intervenci, aby bylo možné kontrolovat potenciálně matoucí účinky diety na kontrolu glykémie.